DYNAMICS OF CYTOKINS AND THEIR INTERRELATION IN LIVER CIRRHOSIS

Full Text

Введение Изучению цирроза печени и его осложнений посвящено множество клинических и экспериментальных исследований. Достигнуты успехи в изучении этиологических и предрасполагающих к этому заболеванию факторов. Вместе с тем, многие вопросы патогенеза осложнений цирроза печени остаются еще недостаточно изученным, а результаты научных исследований, проводимых в этом направлении, противоречивы. В настоящее время наиболее правомочной теоретической основой, объясняющей этиологию развития осложнений при циррозе печени, считается теория периферической вазодилатации, однако и она не дает ответа на все существующие вопросы по данной проблеме [1, 2]. В настоящее время недостаточно изучены частота возникновения и характер осложнений при циррозе печени на фоне влияния цитокинов на активацию патологического процесса в печени и нарушение портального кровотока [3-6]. Кроме того, существуют данные об активации цитокинового каскада при циррозе печени. Так, гиперпродукция фактора некроза опухоли альфа- и интерлейкина-6 вызывает повреждение печени и коррелирует с тяжестью течения цирроза печени [7, 8]. Учитывая разнородность данных в литературе, касающихся уровня цитокинов в сыворотке крови и их влияния, исследования механизмов патогенеза и осложнений при циррозе печени в этом направлении должны неуклонно продолжаться. В тоже время нет четких данных о взаимосвязи между функциональными показателями печени и уровнями цитокинемий при циррозах [9, 10]. Материалы и методы исследования Основные выводы работы основаны на научном материале, полученном при исследовании 117 пациентов циррозами печени (ЦП) вирусной этиологии без сопутствующих основному диагнозу воспалительных процессов органов и систем в стадии обострения, повышения гормонального статуса и артериальной гипертонии 3 степени. У наибольшего количества больных (n = 54 (46,1%)) ЦП развивался на фоне HCV-инфекции, при HBV-инфекции - у 41 (35,1%) и микс-инфекции (HCV + HBV) - у 22 (18,8%) пациентов. ЦП развивался преимущественно от 10 и более лет с момента установления диагноза. Наименьший период развития ЦП отмечался у больных смешанной этиологии (HBV + HCV-инфекций), но в то же время статистически не достоверно (р = 0,079) в сравнении с больными других этиологией. В среднем ЦП развивался в течение 10,1±2,8 лет и имел место во всех возрастных периодах больных. ЦП чаще развивался у мужчин (n = 91 (77,8%)), чем у женщин (n = 26 (22,2%) и в более молодом возрасте - у мужчин в возрастном интервале 55,4±2,9 лет, у женщин - 62,3±3,5 лет. Средний возраст всех больных составил 57,3±4,6 лет. Диагноз заболевания с верификацией результатов диагностики и лечения ставился в полном соответствии с классификацией экспертов ВОЗ (Лос-Анджелес, 1994) и Национальных клинических рекомендаций Всероссийского научного общества гастроэнтерологов (2011). На основании классификации ЦП по Chald - Pugh (1996) пациенты были разделены на 3 группы: І группу составили больные (n = 38) Chald - Pugh класса А с ФНО-α и ИЛ-2, ИЛ-6; ІІ группу - больные (n = 40) Chald - Pugh класса В c ФНО-α и ИЛ-2, ИЛ-6; в ІІІ группу вошли больные (n = 39) Chald -Pugh класса С с ФНО-α и ИЛ-2, ИЛ-6. Контрольную группу составили 30 здоровых добровольцев (доноры крови). Определения уровней интерлейкина-2 (ИЛ-2), интерлейкина-6 (ИЛ-6) и фактора некроза опухоли альфа (ФНО-α) были основаны на методе твердофазного «сэндвич»-варианте иммуноферментного анализа. Для получения результатов и динамических наблюдений, адекватно отражающих изменение концентраций ИЛ-2, ИЛ-6 и ФНО-α в крови, использовались наборы реагентов одного наименования («Интерлейкин-2 - ифа - бест, «Интерлейкин - 6 - ифа бест» и «ФНО - альфа - ифа - бест») и одного того же предприятия - изготовителя (Н. Новгород). Концентрации цитокинов измерялись в крови с 9 до 11 часов. Степень достоверности работы состояла из нескольких этапов. На первом этапе классическим методом, основанным на теории выборки, был проведен расчет объема нужной статистической выборки. Полученный статистический материал группировался в вариационные ряды, которые далее анализировались на соответствие распределения с помощью дескриптивной статистики, закона распределения Гаусса-Лапласа. Также использовались непараметрические методы статистики, основанные на конкордации Кендалла и критериев Фридмана. Были использованы средние величины, в сравнительном анализе учитывался показатель M±SD. На втором этапе обработки полученного статистического материала была проведена группировка данных по вариационным рядам с учетом величины статистической значимости результатов при p < 0,05. По величинам интерквартильного размаха оценивалась величина распределения плотности Гаусса. С помощью корреляционно - матричного метода статистики Спирмена осуществлялось определение степени взаимосвязи между отдельными признаками. Непосредственно статистическая обработка осуществлялась при помощи статистической программы Stat Soft Statistica, версия 8.0. Результаты и их обсуждение Были изучены параметры уровней ИЛ-2, ИЛ-6 и ФНО-α в крови у больных ЦП классов А, В, С. Результаты представлены в таблице 1. Таблица 1 Количественные значения цитокинов при циррозах печени классов А, В и С по Chald -Pugh Цитокины Статистические показатели М ÷ М Ме М SD m Размах Плотность Гаусса Больные циррозами печени Chald - Pugh класса А (n = 38) Косой вертикальный размер правой доли, мм Печень ИЛ-2, пг / мл 1,83-2,32 1,94 2,02 0,17 0,15 0,49 0,34 ИЛ-6, пг ̸мл 5,15-9,32 6,45 6,47 0,91 0,63 4,17 0,97 ФНО-α, пг/ мл 1,23-3,15 2,32 2,47 0,61 0,52 1,92 0,99 Больные циррозами печени Chald - Pugh класса В (n = 40) ИЛ-2, пг/мл 1,02-9,35 2,12 3,66 2,99 2,46 8,34 5,52 ИЛ-6, пг/мл 1,11-14,95 8,32 8,97 3,95 3,01 13,85 5,33 ФНО-α, пг/мл 1,78-3,11 2,83 2,62 0,47 1,56 5,37 3,24 Больные циррозами печени Chald - Pugh класса С (n = 39) ИЛ-2, пг/мл 1,04-8,39 2,46 3,99 2,41 2,01 7,35 4,27 ИЛ-6, пг/мл 9,94-25,21 13,31 14,89 4,96 4,01 15,24 7,94 ФНО-α, пг/мл 1,74-7,11 3,29 3,96 1,82 0,38 1,33 0,80 Примечание: приведены значения при CI = 0,95(±) Из данных, представленных в таблице 1, видно, что при ЦП в зависимости от стадии компенсации отмечается общая тенденция к увеличению уровней всех исследуемых в крови цитокинов, но в пределах референсных значений, за исключением ИЛ-6. Так, при ЦП класса А уровни ИЛ-2, ИЛ-6, ФНО-α колебались в пределах 1,83-2,32 пг/мл, 5,15-9,32 пг/мл, 1,23-3,15 пг/мл и в среднем составили 2,02±0,17 пг/мл, 6,47±0,91 пг/мл, 2,47±0,61 пг/мл соответственно. При ЦП класса В уровни ИЛ-2, ИЛ-6, ФНО-α колебались в пределах 1,02-9,35 пг/мл, 1,11-14,95 пг/мл, 1,78-3,11 пг/мл и в среднем составили 3,66±2,99 пг/мл, 8,97±3,95 пг/мл, 2,62±0,47 пг/мл соответственно. У больных ЦП класса С уровни ИЛ-2, ИЛ-6, ФНО-α колебались в пределах 1,04-8,39 пг/мл, 9,94-25,21 пг/мл, 1,74-7,11 пг/мл и в среднем составили 3,99±2,41 пг/мл, 14,89±4,96 пг/мл, 3,96±1,82 пг/мл соответственно. При ЦП класса С пределы колебаний средних значений ИЛ-6 были выше референсных значений доноров и отмечались в пределах 14,89±4,96 пг/мл. Также необходимо отметить, что колебания уровней ИЛ-6 при ЦП класса А находились в пределах референсных значений, класса В - у 42,5% из 40 больных, класса С только у 30,8% из 39 больных. У других больных ЦП классов В и С уровни колебаний ИЛ-6 превышали референсные значения. У больных ЦП класса А величины интерквартильных размахов уровней ИЛ-2, ИЛ-6, ФНО-α составляли 0,49, 4,17, 0,99, медианы - в пределах 1,94, 6,45, 2,83 соответственно. У больных ЦП класса В величины интерквартильных размахов уровней ИЛ-2, ИЛ-6, ФНО-α составляли 8,34, 13,85, 5,37, медианы - 2,12, 9,22, 3,29 соответственно. У больных ЦП класса С величины интерквартильных размахов уровней ИЛ-2, ИЛ-6, ФНО-α были 7,35, 15,27, 1,33, медианы - 2,46, 13,31, 2,32 соответственно. У доноров в возрасте от 20 до 60 лет пределы колебаний концентраций для ИЛ-2 составляли от 0,1 до 9,7 пг/мл, ИЛ-6 от 0,2 до 9,8 пг/мл и ФНО-α от 0,1 до 4,7 пг/мл соответственно (у доноров полученные данные уровней статистически не противоречат заводу-изготовителю). По медиане уровень цитокинемии у больных ЦП выше в сравнении с донорами. Была изучена взаимосвязь между уровнями ИЛ-2, - 6, ФНО-α при ЦП классов А, В, С. Результаты представлены в таблице 2. Таблица 2 Результаты матричного корреляционного анализа взаимосвязи цитокинов при ЦП классов А, В, С ИЛ-6 ЦП А ИЛ6 ЦП В ИЛ6 ЦП С ФНО ЦП А ФНО ЦП В ФНО ЦП С ИЛ2 ЦП А ИЛ2 ЦП В ИЛ2 ЦП С ИЛ6 ЦП А 0,006 0,043 -0,499 -0,175 0,080 -0,371 -0,112 -0,070 ИЛ6 ЦП В 0,006 -0,072 -0,140 -0,007 0,206 0,372 -0,060 -0,237 ИЛ6 ЦП С 0,043 -0,072 -0,155 0,166 0,292 0,040 0,234 -0,127 ФНО ЦП А -0,499 -0,140 -0,155 0,305 0,080 -0,224 -0,098 0,187 ФНО ЦП В -0,175 -0,007 0,166 0,305 0,012 -0,175 0,421 -0,371 ФНО ЦП С 0,080 0,206 0,292 0,080 0,012 0,109 -0,023 -0,053 ИЛ2 ЦП А -0,371 0,372 0,040 -0,224 -0,175 0,109 -0,060 -0,091 ИЛ2 ЦП В -0,112 -0,060 0,234 -0,098 0,421 -0,023 -0,060 -0,316 ИЛ2 ЦП С -0,070 -0,237 -0,127 0,187 -0,371 -0,053 -0,091 -0,316 Из данных, представленных в таблице 2, видно, что в результате матричного корреляционного анализа взаимосвязей между цитокинами при циррозах печени классов А, В, С было выявлено, что наиболее значимые корреляционные взаимосвязи наблюдались между фактором некроза опухоли - α и интерлейкином - 6 при при ЦП класса А (r = 0,499), фактором некроза опухоли - α и интерлейкином - 2 при ЦП класса В (r = 0,421). Выводы 1. На фоне снижения компенсации цирроза печени отмечается повышение сывороточных уровней ИЛ 2, ИЛ 6 и ФНО α в пределах референсных значений, за исключением уровня ИЛ-6 при цирроза печени класса С. У данной категории больных уровень ИЛ-6 превышает референсные значения и находится в пределах от 9,94 до 25,21 пг/мл со средней концентрацией 14,89±4,96 пг/мл. 2. Количественные соотношения и степень взаимосвязи между цитокинами определяются компенсацией цирроза. Значимая корреляционная взаимосвязь отмечается между ФНО-α и ИЛ-6 (r = 0,499) при циррозе печени класса А, между ФНО-α и ИЛ-2 (r = 0,421) при циррозе печени класса В.

About the authors

B B Fishman

Novgorod State University named after Yaroslav the Wise, Velikiy Novgorod, Russia

M A Toneeva

Novgorod State University named after Yaroslav the Wise, Velikiy Novgorod, Russia

V E Kulikov

Novgorod State University named after Yaroslav the Wise, Velikiy Novgorod, Russia

V A Kornilova

Novgorod State University named after Yaroslav the Wise, Velikiy Novgorod, Russia

E R Antonova

Novgorod State University named after Yaroslav the Wise, Velikiy Novgorod, Russia

References

Supplementary files