INVESTIGATION OF CYTOCHROM P450 2C19 GENETIC POLYMORPHISM AND ITS EFFECT ON THE THERAPY OUTCOME IN PATIENTS WITH GERDIN THE CRIMEAN POPULATION

Full Text

ВведениеГастроэзофагеальная рефлюксная болезнь (ГЭРБ) является одним из наиболее распро- страненных и потенциально серьезных заболе- ваний пищевода, имеющим в последнее время достоверную тенденцию к увеличению распро- страненности и значительно ухудшающим каче- ство жизни пациентов [1]. Стоит отметить, что наибольшую распространенность ГЭРБ имеет в Северной и Южной Америке (18,1%-27,8%), на Ближнем Востоке (8,7%-33,1%), в Австралии (11,6%), Европе (2,5-7,8%) [2].В основе ГЭРБ лежит заброс содержимо- го желудка в пищевод - гастроэзофагеальный рефлюкс. Результатом большинства желудоч- но-пищеводных рефлюксов, физиологичных и патологических, является заброс в пищевод кислого желудочного содержимого. Патологи- ческий кислый гастроэзофагальный рефлюкс вызывает повреждение пищевода с развитием типичной рефлюксной симптоматики: изжо- ги, отрыжки кислым. Это характерно для двух наиболее часто встречающихся формы ГЭРБ- неэрозивной рефлюксной болезни и рефлюкс- эзофагита [3]. В некоторых же случаях, беспо-коящие симптомы могут возникать и во время физиологического гастроэзофагеального реф- люкса. В таких случаях говорят о гиперчувстви- тельности пищевода к рефлюксу, которая Рим- скими критериями IV пересмотра отнесена к функциональным заболеваниям пищевода [4].2Тем не менее, препаратами выбора для ку- пирования рефлюксных симптомов при всех вышеперечисленных состояниях, а также для эпителизации эрозий слизистой оболочки пи- щевода являются ингибиторы протонной пом- пы (ИПП). Не смотря на то, что эти препара- ты далеки от «идеальных» антисекреторных средств, они обладают наиболее выраженной и длительной кислотосупрессивной способно- стью по сравнению с антацидами и Н - блокато- рами рецепторов гистамина [5].В метаболизме ИПП ключевую роль играет цитохром Р450 2C19 (CYP2C19) [6]. Именно он определяет скорость метаболизма ИПП, ко- торая варьирует в различных этнических груп- пах вследствие феномена генетического поли- морфизма [7]. В настоящее идентифицировано 27 вариантов аллелей CYP2C19, но наиболее подробно описаны CYP2C19 * 2, CYP2C19 * 3,и CYP2C19 * 17 аллели [8]. Распространенность мутантных аллелей в популяции пациентов с кислотозависимыми заболеваниями может вли- ять на результат терапии [9].Как известно, Крымская популяция неодно- родна и представлена различными этническими группами [10]. Впервые в этой популяции у паци- ентов с ГЭРБ был исследован генетический поли- морфизм CYP2C19, а также изучено его влияние на исход кислотосупрессивной терапии ИПП.Материалы и методыБыли проанализированы результаты гене- тического исследования полиморфизма гена CYP2C19 у 136 пациентов, соответствующие критериям включения, наблюдавшихся ам- булаторно или стационарно ГБУЗ РК «РКБ им. Н.А. Семашко (г. Симферополь) за пери- од с 2013 по 2014 гг. Все пациенты были рас- пределены на три группы: с эрозивным эзофа- гитом (ЭЭ)-49 человек, с неэрозивной ГЭРБ (НЭРБ)-60 человек, с гиперчувствительно- стью пищевода к рефлюксу (ГП)-27 человек. Во всех трех группах был назначен пантопра- зол в стандартной дозировке за 30-40 минут до первого приема пищи.Критерии включения: подписанное инфор- мированное согласие на участие в исследовании и выполнение всех необходимых исследований, мужчины и женщины в возрасте от 18 до 60 лет, проживающие в Крыму с верифицированными кислыми рефлюксами. Критерии исключения: эозинофильный эзофагит, функциональная из- жога, прочие заболевания пищевода: ахалазия, дивертикулы, рубцовые стриктуры, варикозное расширение вен пищевода, поражения пищево- да при склеродермии, СКВ, болезни Крона, на- личие тяжёлых сопутствующих заболеваний в стадии суб- и декомпенсации; злокачественный опухолевый процесс любой локализации; алко- гольная и наркотическая зависимость; беремен- ные или кормящие женщины; больные с низкой приверженностью к лечению.Молекулярно-генетическое исследование проводилось в лаборатории.Использоваласьтест-системаSeeplex®CYP2C19 Genotyping Set. Выявление полиморфных вари- антов генов включало следующие этапы: выде- ление целевой дНК из крови, амплификация целевой дНК с помощью двухпраймерной си-стемы dPOTM (dual Priming Oligonucleotide), последующий электрофорез в агаровом геле с помощью ScreenTape® системы.Статистическая обработка и анализ полу- ченных данных проводились на персональ- ном компьютере с помощью языка статисти- ческого программирования R версии v3.2.0 (R development Core Team. R: A language and environment for statistical computing. R Foundation for Statistical Computing, ISBN 3-900051-07-0. Vienna, Austria. 2008.http://www.r-project.org/).для рaсчетa рaзличий в группaх срaвнения, по пaрaметрaм, вырaженных в кaчественных переменных использовaлся рaсчет критерия Хи-квaдрaт и расчет отношения шансов. Крити- ческий уровень знaчимости был устaновлен нa вероятности ошибки первого типa не более 5% (< 0,05). для количественной оценки резуль- тата проведенных исследований использован показатель отношения шансов (ОШ), рассчи- тывается по формуле:ОШ=(a/c)/(b/d)=a · d/b · c.При величине показателя больше 1, вероят- ность события в основной группе выше, чем в контрольнойРезультаты и их обсуждениеВ ходе проведенного исследования у данной выборки пациентов Крымской популяции гене- тический полиморфизм был представлен гено- типами *1  *1 и *1 / *2, остальные виды геноти- пов не встречались, что соответствует данным литературы.Нами было проанализировано распределение генотипов CYP2C19 в зависимости от пола, ре- зультаты анализа представлены в табл. 1. Генотип 1*/1* чаще встречался среди лиц женского пола - 63,2%, а среди лиц мужского пола - 36,8%. Анало- гичная картина была выявлена и в отношении генотипа 1*/2*. Носителями мутантного гетеро- зиготного состояния оказалось 63,4% женщин и 36,6% мужчин (2= 0,001; d.f.=1; р=0,977). От-ношение шансов в группе мужчин составило 1,007 (95%дИ: 0,754 - 1,316), в то же время, сре- ди женщин данный показатель не достиг значе- ния единицы и оказался статистически не зна- чимым - 0,996 (95%дИ: 0,622 - 1,630).Таблица 1Распределения генотипов Cyp 2C19 среди мужского и женского пола Крымской популяцииГенотипПол, абс. (%)d.f.2р-оценкаЖенскийМужской1*/1*60 (63,2%)35 (36,8%)10,0010,9771*/2*26 (63,4%)15 (36,6%)Отношение шансов0,9961,00795% доверительный интервал0,754 - 1,3160,622- 1,630При анализе эффективности кислотосу- прессивной терапии было выявлено, что сре- ди носителей генотипа 1*/2* полный ответ на терапию ИПП встречался значительно чаще, в 85,4% случаев, чем в группе пациентов с геноти-пом 1*/1*- 52,6% (2= 13,094;d.f.=1; р=0,000)(табл. 2). Отношение шансов в группе эф- фективной терапии составило 0,617 (95%дИ: 0,490 - 0,775), а в группе с неэффективной те- рапией - 3,237 (95%дИ: 1,500 - 6,984).Таблица 2Частота встречаемости генотипов Cyp 2C19 при различной эффективности терапииГенотипЭффективность, абс. (%)d.f.2р-оценкаЭффективная терапияНеэффективная терапия1*/1*50 (52,6%)45 (47,4%)113,0940,0001*/2*35 (85,4%)6 (14,6%)Отношение шансов0,6173,23795% доверительный интервал0,490- 0,7751,500- 6,984При дальнейшем анализе были получены ин- тересные данные, касающиеся частоты встреча- емости генотипов CYP 2C19 среди пациентов с НЭРБ, ЭЭ и ГП в группах с различным исходом терапии (табл. 3).У пациентов с ЭЭ не было найдено статисти- чески значимых различий в распределении гено- типов CYP2C19 в зависимости от эффективности терапии (2=0,915; d.f.=1; р=0,339). Показатель отношения шансов в группе неэффективной тера- пии ЭЭ составил 1,795 (95%дИ: 0,485 - 6,643), а в группе эффективной терапии ЭЭ не достиг значе- ния единицы 0,801 (95%дИ: 0,543 - 1,182).В группе НЭРБ значительно чаще наблюдал- ся благоприятный ответ на кислотосупрессив-ную терапию ИПП (2=11,916; d.f.=1; р=0,001), при этом в 100% наблюдений с благоприятным исходом был определен генотип 1*/2*. Отно- шение шансов в группе эффективной терапии НЭРБ не достигло значения единицы и соста- вило - 0,548 (95%дИ: 0,416 - 0,721).Среди пациентов с ГП значительно чаще наблюдался неблагоприятный исход терапии (2=8,429; d.f.=1; р=0,004), и в 85,7% он встре- чался у носителей генотипа 1*/1*. Отношение шансов в группе неэффективной терапии ГП со- ставило - 2,786 (95%дИ: 1,199-6,472). Отноше- ние шансов в группе эффективной терапии ГП не достигло значения единицы и составило - 0,206 (95%дИ: 0,054-0,783).Таблица 3Частота встречаемости генотипов Cyp 2C19 среди пациентов с НЭРБ, ЭЭ и ГП в группах с различным исходом терапииГенотипИсход, абс. (%)d.f.2р-оценкаЭффективная терапияНеэффективная терапияЭЭ1*/1* (homEM)25 (64,1%)14 (35,9%)10,9150,3391*/2* (hetEM)8 (80,0%)2 (20,0%)Отношение шансов0,8011,79595% доверительный0,543-1,1820,485-6,643интервалНЭРБ1*/1* (homEM)23 (54,8%)19 (45,2%)111,9160,0011*/2* (hetEM)18 (100,0%)0 (0,0%)Отношение шансов0,5483,23795% доверительный0,416-0,721-интервалГП1*/1* (homEM)2 (14,3%)12 (85,7%)18,4290,0041*/2* (hetEM)9 (69,2%)4 (30,8%)Отношение шансов0,2062,78695% доверительный0,054-0,7831,199-6,472интервалЗаключениеНа основании вышеизложенного, можно сказать, что носительство генотипов 1*/1* и 1*/2* одинаково часто встречается, как среди лиц мужского, так и среди лиц женского пола. Однако, показатель отношения шансов, равный 1,007 свидетельствует о том, что мужской пол более склонен к носительству генотипа 1*/1*, и, как следствие, можно предположить большую вероятность неблагоприятного исхода кислото- супрессивной терапии. При анализе эффектив- ности терапии в обще группе было выявлено, что у пациентов с генотипом 1*/2* значительно чаще возникает полный ответ на терапию ИПП, а носители генотипа 1*/1* более склонны к раз- витию неблагоприятного исхода (показатель отношения шансов равен 3,237).При анализе в группах было установлено, что у пациентов с ЭЭ одинаково часто встреча- лись носители обоих генотипов 1*/1* и 1*/2*, при этом неблагоприятный исход терапии чаще встречался у носителей генотипа 1*/2* (пока- затель отношения шансов равен 1,795). Средипациентов с НЭРБ значительно чаще встречал- ся благоприятный исход терапии ИПП, однако носительство ни одного из генотипов не было идентифицировано прогностичекий фактор, что, по-видимому, могло быть связано с малым размером выборки. В группе ГП значитель- но чаще встречалась устойчивость к терапии ИПП, при этом пациенты с генотипом 1*/1* были более склонны к развитию неблагопри- ятного исходу лечения (показатель отношения шансов равен 2,786).Таким образом, носительство генотипа 1*/1* в группах больных ЭЭ и ГП по данным нашего исследования являлось фактором риска разви- тия неблагоприятного ответа на терапию ИПП. Значимость данного фактора в группе пациен- тов с НЭРБ требует проведения дополнитель- ных исследований в данной популяции с вклю- чением большего числа участников.

About the authors

Yu S Rabotyagova

Crimean Federal university named after V.I. Vernadsky

I L Klyaritskaya

Crimean Federal university named after V.I. Vernadsky

References

Supplementary files