Eksperimental'noe obosnovanie primeneniya immunomodulyatora moliksan v kachestve sredstva terapii gerpesvirusnoy infektsii

Abstract

Full Text

Герпес представляет собой серьезную медико-социальную проблему. Это одна из самых распространенных вирусных инфекций человека. По данным Всемирной организации здравоохранения, около 70% населения нашей планеты инфицировано вирусом простого герпеса и примерно у 10-20% из них имеются те или иные клинические проявления герпетической инфекции. Вирусы герпеса простого 1-го типа (ВГП-1) вызывают разнообразные поражения нервной системы: энцефалиты, менингиты, миелиты, полинейропатии. Наиболее часто встречаются энцефалит или менингоэнцефа-лит, который может либо проявляться в виде локализованной формы поражения центральной нервной системы, либо быть одним из синдромов генерализованной герпетической инфекции, сочетаясь с поражениями кожи и внутренних органов (печень, поджелудочная железа, почки). Определенную опасность несет генитальный герпес, вызываемый вирусом герпеса простого 2-го типа (ВГП-2), который является одной из наиболее социально значимых проблем в клинической вирусологии. Последствиями генитального герпеса матери являются проблемное вынашивание плода, заболевания новорожденного. Лечение любой нозологической формы простого герпеса представляет собой сложный медицинский аспект. Основным препаратом, использующимся для терапии простого герпеса, является синтетический аналог гуа-нозина - ацикловир (зовиракс). Однако, несмотря на позитивные возможности терапии простого герпеса синтетическими аналогами нуклеозидов, его лечение, как правило, бывает длительным и не всегда эффективным. Побочное действие нуклеозидов проявляется в миелосупрессии, гепатотоксическом влиянии, нарушении функции нервной, иммунной систем, кишечника и почек. В связи с этим актуальной задачей медицинской науки является создание, испытание и внедрение в клиническую практику средств фармакотерапии простого герпеса, основанных на стимуляции иммунного ответа организма, позволяющих потенцировать лечебный эффект синтетических аналогов нуклеозидов, а также устраняющих или сглаживающих их побочное действие. Большие потенциальные возможности в этом плане имеет поколение пептидных иммуномодуляторов, одним из которых является препарат «Моликсан». Целью исследования явилась экспериментальная оценка эффективности препарата «Моликсан» в качестве средства лечения генерализованного герпеса, вызываемого ВГП-1 и ВГП-2. Исследования выполнены на белых беспородных мышах массой 16-18 г в клинике экспериментальных биологических моделей Военно-медицинской академии им. С.М.Ки-рова в строгом соответствии с соблюдением принципов Хельсинкской декларации о гуманном отношении к животным. Накопление ВГП проводили посредством интрацеребраль-ного заражения мышей-сосунков. Инфекционную активность вируссодержащих материалов определяли по методу Рида-Менча титрованием на мышах-сосунках. Величину ЛД50 (летальная доза, вызывающая гибель 50% зараженных вирусом животных) применительно к каждому возбудителю определяли на белых беспородных мышах с расчетом этого критерия по методу Кербера в модификации И.П.Ашмарина и А.А.Воробьева (1962). Для моделирования герпетической инфекции использовали вирус герпеса простого 1-го типа, штамм УС, исходный титр вируса 10-2 и 10-5 ЛД50/мл, или вирус герпеса простого 2-го типа, штамм ВН, исходный титр вируса 10-2 и 10-3 ЛД50/мл. Моделирование герпетической инфекции осуществляли путем внутрибрюшин-ного введения животным суспензии ВГП-1 или ВГП-2 в объеме 0,5 мл. За 2 ч перед заражением животным в целях понижения естественной резистентности внутримышечно вводили 0,2 мл гидрокортизона. Молисан (ЗАО «ФАРМА ВАМ») применяли подкожно в объеме 0,5 мл в разовой дозе 30 мг/кг по двум схемам: - за 24 ч до заражения, одновременно с заражением, через 24, 48 и 72 ч после заражения (схема 1 - экстренной профилактики); - одновременно с заражением, через 24, 48 и 72 ч после заражения (схема 2 - раннего этиотропного лечения). Эффективность изучаемого препарата определяли по показателям выживаемости лабораторных животных и средней продолжительности жизни погибших мышей, сопоставляя данные животных подопытных (получавших соответствующие препараты) и контрольных групп. 64 «(Военно-медицинский журнал», 2’2014 КРАТКИЕ СООБЩЕНИЯ В результате проведенных исследований установлено, что препарат «Моликсан» при введении по обеим указанным схемам оказывает выраженное защитное действие в отношении экспериментальной герпесвирусной инфекции. При этом, если моликсан применяли по схеме 1, то выживаемость инфицированных ВГП-1 животных составила 100% при титре вируса 10-5 ЛД50/мл и 80% при титре вируса 10-2 ЛД50/мл. Аналогичные результаты по выживаемости получены и при использовании упомянутого препарата по схеме 2: выживаемость инфицированных ВГП-1 мышей при титре вируса 10-5 ЛД50/мл также составила 100%, а при титре вируса 10-2 ЛД50/мл - 85%. Кроме того, введение мо-ликсана способствовало увеличению в 3-4 раза средней продолжительности жизни погибших от ВГП-1 животных. Нельзя не отметить, что моликсан обладал практически одинаковой защитной эффективностью при заражении ВГП-1 вне зависимости от дозы вируса и схемы применения самого препарата. Результаты последующих исследований показали, что оцениваемый препарат оказывает защитное действие и в отношении экспериментальной герпесвирусной инфекции, вызванной ВГП-2. Так, если моликсан применяли по схеме 1, то в зависимости от заражающей дозы вируса защитный эффект со ставил 60-70% на фоне 100% летальности в контроле. Если же препарат применяли по схеме 2, то в этих условиях защитный эффект в зависимости от заражающей дозы вируса герпеса 2-го типа составил 60% (исходный титр вируса 10-2 ЛД50/мл) и 80% (исходный титр вируса 10-3 ЛД50/мл) на фоне 100% летальности у мышей контрольных групп. Следует также отметить, что применение молик-сана по обеим схемам позволяло увеличить в 1,5-2,5 раза среднюю продолжительность жизни мышей, инфицированных ВГП-2. Полученные результаты свидетельствуют о том, что профилактическое и лечебное применение препарата «Моликсан» позволяет увеличить выживаемость мелких лабораторных животных, инфицированных ВГП 1-го и 2-го типов. Возможный механизм противовирусной активности изучаемого препарата может быть связан со способностью моликсана вызывать индукцию синтеза ин-терферона-а и антимикробных пептидов. Анализ результатов проведенных исследований позволяет сделать заключение о том, что препарат «Моликсан» можно рассматривать в качестве перспективного средства экстренной профилактики и раннего этиотроп-ного лечения герпетической инфекции, вызванной воздействием ВГП как 1-го, так и