Анализ потребления глюкозы и глутамата в питательных средах как метод оценки качества эмбрионов человека пятых суток развития


Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Доступ платный или только для подписчиков

Аннотация

Цель исследования. Оценить изменение содержания глюкозы и глутамата в культуральных средах эмбрионов 5 суток развития методом флуориметрической детекции и определить ассоциацию исследуемых показателей с качеством и плоидностью эмбрионов. Материал и методы. В ходе одномоментного исследования в параллельных группах были исследованы 68 образцов сред культивирования эмбрионов различного морфологического качества от 21 пациентки в возрасте до 45 лет, проходящих программу ЭКО (ИКСИ) с использованием препаратов гонадотропинов и с проведением преимплантационного генетического скрининга методом сравнительной геномной гибридизации по показаниям. Анализ потребления глюкозы и глутамата в средах культивирования эмбрионов (5 суток развития) проводился методом флуоресцентной фотометрии с использованием наборов реактивов Amplex Red Glucose Assay kit и Amplex Red glutamic Acid Assay kit (Molecular Probes, Life technologies). Результаты. В результате исследования было установлено, что применение предложенных методических подходов позволяет регистрировать потребление глюкозы эмбрионами после пяти суток культивирования. Было показано, что для эмбрионов, демонстрирующих более высокие показатели развития к моменту исследования, характерен повышенный уровень потребления глюкозы. Также было установлено, что эмбрионы с нормальным и анэуплоидным кариотипом не проявляют достоверных отличий в потреблении глюкозы на пятый день культивирования. Оценка имплантационного потенциала и содержания глюкозы в питательных средах показала, что у эмбрионов с повышенным потреблением глюкозы возрастает вероятность развития беременности после переноса. Заключение: На основании полученных данных, в перспективе можно рекомендовать предложенный метод измерения концентрации глюкозы в качестве дополнительного неинвазивного исследования для селективного переноса эмбрионов со сходными морфологическими параметрами.

Полный текст

Доступ закрыт

Об авторах

Инна Михайловна Зорина

ФГБУ НМИЦ АГП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России

Email: aflnna_153@mail.ru
аспирант отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия им. профессора Б.В. Леонова

Вероника Юрьевна Смольникова

ФГБУ НМИЦ АГП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России

Email: veronika.smolnikova@mail.ru
д.м.н., ведущий научный сотрудник отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия им. профессора Б.В. Леонова

Чупалав Максудович Эльдаров

ФГБУ НМИЦ АГП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России

младший научный сотрудник лаборатории молекулярной патофизиологии

Светлана Анатольевна Ярыгина

ФГБУ НМИЦ АГП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России

аспирант отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия имени профессора Б.В. Леонова

Виктория Константиновна Горшинова

ФГБУ НМИЦ АГП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России

Email: chiasma@mail.ru
аспирант отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия им. профессора Б.В. Леонова

Наталья Петровна Макарова

ФГБУ НМИЦ АГП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России

к.б.н., эмбриолог, научный сотрудник отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия им. профессора Б.В. Леонова

Елена Анатольевна Калинина

ФГБУ НМИЦ АГП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России

Email: e_kalinina@oparina4.ru
д.м.н., руководитель отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия имени профессора Б.В. Леонова

Михаил Юрьевич Бобров

ФГБУ НМИЦ АГП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России

Email: mbobr@mail.ru
к.х.н., руководитель лаборатории молекулярной патофизиологии

Список литературы

  1. Беляева Н.А., Калинина Е.А., Горшинова В.К., Зобова А.В., Глинкина Ж.И. Возможности применения преимплантационной генетической диагностики с целью повышения эффективности программ ЭКО/ИКСИ у супружеских пар с мужским фактором бесплодия и генетическими особенностями у мужчин. Акушерство и гинекология. 2016; 8: 107-11. http://dx.doi.Org/10.18565/aig.2016.8.107-111
  2. Зобова А.В., Екимов А.Н., Беляева Н.А., Кулакова Е.В., Смольникова В.Ю., Владимирова И.В., Макарова Н.П., Калинина Е.А. Применение преимплантационного генетического скрининга у бесплодных супружеских пар: собственный опыт. В. кн.: Материалы XXVI Международной конференции Российской ассоциации репродукции человека: тезисы докладов. 7-10 сентября 2016 Москва. М.; 2016: 169-70.
  3. Seli E., Botros L., Sakkas D., Burns D.H. Noninvasive metabolomic profiling of embryo culture media using proton nuclear magnetic resonance correlates with reproductive potential of embryos in women undergoing in vitro fertilization. Fertil. Steril. 2008; 90(6): 2183-9.
  4. Vergouw C.G., Botros L.L., Roos P., Lens J.W., Schats R., Hompes P.G. et al. Metabolomic profiling by near-infrared spectroscopy as a tool to assess embryo viability: a novel, non-invasive method for embryo selection. Hum. Reprod. 2008; 23(7): 1499-504.
  5. Wong K.M., Repping S., Mastenbroek S. Limitations of embryo selection methods. Semin. Reprod. Med. 2014; 32(2): 127-33.
  6. Cimadomo D., Capalbo A., Ubaldi F.M., Scarica C., Palagiano A., Canipari R., Rienzi L. The impact of biopsy on human embryo developmental potential during preimplantation genetic diagnosis. Biomed. Res. Int. 2016; 2016: 7193075.
  7. van Echten-Arends J., Mastenbroek S., Sikkema-Raddatz B., Korevaar J.C., Heineman M.J., van der Veen F., Repping S. Chromosomal mosaicism in human preimplantation embryos: a systematic review. Hum. Reprod. Update. 2011; 17(5): 620-7.
  8. Northrop L.E., Treff N.R., Levy B., Scott R.T. Jr. SNP microarray-based 24 chromosome aneuploidy screening demonstrates that cleavage-stage FISH poorly predicts aneuploidy in embryos that develop to morphologically normal blastocysts. Mol. Hum. Reprod. 2010; 16(8): 590-600.
  9. Renard J.P., Philippon A., Menezo Y. In-vitro uptake of glucose by bovine blastocysts. J. Reprod. Fertil. 1980; 58(1): 161-4.
  10. Sakkas D., Sueldo K., Katz-Jaffe M. Gamete and embryo selection. Genomics, metabolomics and morphological assessment. SpringerBriefs in Reproductive Biology. 2014; 6-7.
  11. Gardner D.K., Leese H.J. Assessment of embryo viability prior to transfer by the noninvasive measurement of glucose uptake. J. Exp. Zool. 1987; 242(1): 103-5.
  12. Lane M., Gardner D.K. Selection of viable mouse blastocysts prior to transfer using a metabolic criterion. Hum. Reprod. 1996; 11(9): 1975-8.
  13. Crha I., Mâdr A., Musilovâ J., Glatz Z., Zâkovâ J., Ventruba P. The new technologies for the analytical examination of the embryonic metabolome and its prospects. Ceska Gynekol. 2012; 77(6): 502-6.
  14. Gardner D.K., Lane M., Stevens J., Schoolcraft W.B. Noninvasive assessment of human embryonutrient consumption as a measure of developmental potential. Fertil. Steril. 2001; 76(6): 1175-80.
  15. Gardner D.K., Wale P.L., Collins R., Lane M. Glucose consumption of single post-compaction human embryos is predictive of embryo sex and live birth outcome. Hum. Reprod. 2011; 26(8): 1981-6.
  16. Приказ МЗ РФ №107н от 30 августа 2012 г. „О порядке использования вспомогательных репродуктивных технологий, противопоказаниях и ограничениях к их применению” (с изменениями и дополнениями).
  17. Alpha Scientists in Reproductive Medicine and ESHRE Special Interest Group of Embryology. The Istanbul consensus workshop on embryo assessment: proceedings of an expert meeting. Hum. Reprod. 2011; 26(6): 1270-83.
  18. Leese H.J. Metabolic control during preimplantation mammalian development. Hum. Reprod. Update. 1995; 1(1): 63-72.
  19. Leese H.J., Barton A.M. Pyruvate and glucose uptake by mouse ova and preimplantation embryos. J. Reprod. Fertil. 1984; 72(1): 9-13.
  20. Brison D.R., Leese H.J. Energy metabolism in late preimplantation rat embryos. J. Reprod. Fertil. 1991; 93(1): 245-51.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© ООО «Бионика Медиа», 2018