Об уровне антител к галактоцереброзидам мозга в сыворотке крови у здоровых детей раннего возраста и у женщин

Полный текст

Весьма важным этапом патогенеза различных  нарушений нервной системы перинатального периода, раннего детского возраста, а иногда и всей жизни человека является нарушение нормальных взаимоотношений в системе мать—плацента—плод, в основе которых могут быть иммунологические механизмы [12]. Дисфункция иммунной системы у детей может быть как генетически обусловленной, так и приобретенной в результате воздействия неблагоприятных факторов во внутриутробном или постнатальном периоде [5, 12].

Известно, что в процессе онтогенеза происходит обособление головного мозга от иммунной системы, и поэтому даже неповрежденная мозговая ткань в условиях повышенной проницаемости гематоэнцефалического барьера является аутоантигеном, а в крови могут появляться противомозговые антитела. Эти процессы значительно усиливаются при наличии повреждения клеточных мембран ЦНС.

При изучении взаимоотношений нервной и иммунной систем у детей раннего возраста вопрос осложняется тем, что активные процессы миелинизации, сопровождающиеся у них гиперпродукцией мозговых антигенов, протекают на фоне неполной изоляции нервной ткани гематоэнцефалическим барьером [1, 4].

В настоящее время в клинической медицине практически отсутствуют удобные методы оценки иммунореактивности организма по отношению к нервной ткани.. Используемые методы оценки иммунных и аутоиммунных процессов не являются строго специфическими по отношению к нервной ткани, так как в них в качестве тест- антигенов применяются гомогенаты или водносолевые экстракты и лиофилизированные порошки ткани мозга, в состав которых входят белки, протеолипидные комплексы и гликопротеины, содержащиеся не только в нервной, но и в других тканях организма.

По рекомендации ВОЗ в иммунологических исследованиях должны использоваться очищенные и специфические для данной ткани антигены с известной химической структурой. Для нервной ткани такими свойствами антигенного маркера обладают гликолипиды галактоцереброзиды (ГалЦ). Доказано, что ГалЦ являются специфическими компонентами миелина и мембран клеток, продуцирующих миелин (олигодендроцитов в центральной нервной системе и леммоцитов в периферической нервной системе) [2, 7, 8]. Обнаружение аутоантител к этому антигену может использоваться как для диагностики повреждения клеточных структур нервной ткани, так и для оценки выраженности аутосенсибилизации у детей и взрослых к антигенам нервной ткани [2].

В качестве контроля необходимо иметь сведения об уровне антител к специфическим антигенам мозга, в частности к ГалЦ у здоровых детей в разные возрастные периоды, так как эти данные в зависимости от возраста могут значительно различаться. В пользу такого предположения свидетельствуют имеющиеся в литературе сведения о значительной вариабельности показателей гуморального и клеточного иммунитета у здоровых детей разного возраста [13].

Актуальной является также диагностика нарушений в иммунной системе у детей, считающихся практически здоровыми. Вполне вероятно, что скрытые, латентные иммунологические расстройства могут служить одним из факторов риска развития у них церебральных осложнений на фоне инфекций, после черепно-мозговых травм, прививок и т.д.

В настоящее время уровень антител к ГалЦ изучен у здоровых взрослых [2] и у небольшого числа здоровых детей, причем сведения о детях представлены без анализа в каждом возрастном периоде [11].

Целью настоящей работы являлось изучение уровня антител к ГалЦ мозга у здоровых детей раннего возраста в разные возрастные периоды, у родильниц и здоровых женщин в периоде между родами. Полученные результаты покажут, имеется ли продукция аутоантител к ГалЦ у детей и у их матерей, позволят оценить значение аутосенсибилизации организма к нервной ткани в патогенезе церебральных нарушений у детей, а также выделить группу риска развития этих осложнений в последующем.

Антитела к ГалЦ мозга определяли, применяя микромодификацию реакции связывания комплемента (РСК) в полистироловых панелях. В качестве антигена в реакции использовали суспензию липидов в веронал-мединаловом буфере (pH 7,4, содержащую 11,2 мкг ГалЦ, 38,7 мкг холестерина и 37,5 мкг лецитина на 1 мл суспензии) [10]. Добавление холестерина и лецитина необходимо для формирования липидных мицелл и стабилизации суспензии ГалЦ-АГ. В качестве рефренс-сыворотки использовали сыворотку кроликов, иммунизированных ГалЦ, имевшую титр антител к ГалЦ по РСК 1:64 - 1:128 [3].

ГалЦ и лецитин, необходимые для проведения иммунологического анализа, получали из хлороформ-метанолового экстракта мозга быка методом тонкослойной хроматографии на силикагеле.

Всего было обследовано 206 лиц, у которых, по данным анамнеза и клинического наблюдения, не было каких-либо пароксизмальных расстройств сознания, очаговых неврологических симптомов и нарушений психоречевого развития. Эта группа состояла из 14 здоровых женщин в возрасте от 22 до 36 лет, 12 родильниц и 180 детей в возрасте от 4 дней до 3 лет. Дети и взрослые были обследованы в клиниках или амбулаторно.

К моменту обследования все лица контрольной группы считались здоровыми. Сведения о перенесенных ранее заболеваниях у детей представлены в табл. 1.

 

Таблица1. Характеристика соматических заболеваний, имевшихся в анамнезе у обследованных детей

Клинический диагноз	Возраст, мес
	до 1 месяца	1—3	3—6	6—12	12—18	1—24	24—36 и более	Итого
Ранее не болели	20	1	3	3	1	1	4	33
Отит	—	1	2	2	2	2	3	12
Гипотрофия	—	10	—	3		3	1	17
Пилороспазм	—	4	1	—	—	—	—	5
Рахит	—	2	4	1	2	3	1	13
ОРВИ (легкая форма)	—	3	4	2	1	1	1	12
Бронхит	—	4	7	7	6	4	4	32
Кишечная колика	—	2	3	4	8	6	6	29
Нефропатия Сколиоз и дисплазия	—	1	4	2	2	2	3	14
тазобедренных суставов	—	2	2	1	3	3	2	13
Итого	20	30	30	25	25	25	25	180

 

Приведенные в таблице данные свидетельствуют об отсутствии у детей тяжелых заболеваний в анамнезе, а также о примерно одинаковом распределении заболеваний по возрасту. Следовательно, перенесенные соматические заболевания у них не могли существенно повлиять на титр антител к ГалЦ. Взрослые также считались практически здоровыми.

Результаты исследования антител к ГалЦ мозга у здоровых людей - женщин, родильниц и новорожденных представлены в табл. 2.

 

Таблица 2. Титры антител к ГАЛЦ в сыворотке крови у здоровых женщин, родильниц и новорожденных

Титры антител к ГАЛЦ
у здоровых женщин	у родильниц	у новорожденных
1:2	1:64	1:64
1:2	1:128	1:128
0	1:256	1:256
0	1:512	1:512
1:4	1:16	1:32
1:2	1:32	1:64
1:2	1:64	1:128
1:4	1:128	1:256
0	1:512	1:512
0	1:64	1:128
0	1:256	1:512
1:4	1:512	1:512
1:2
0

 

Данные таблицы подтверждают, что у здоровых женщин в межродовом периоде аутоантитела к ГалЦ либо не выявляются, либо обнаруживаются в очень низких титрах (до 1:4), не превышающих верхнюю границу нормы, ранее установленную для здоровых взрослых. В то же время у всех женщин в послеродовом периоде и у их новорожденных были выявлены аутоантитела к ГалЦ в высоких титрах - от 1:32 до 1:512. Полученные результаты обследования родильниц и новорожденных дают основание предположить, что аутоантитела к ГалЦ у новорожденных появляются вследствие их трансплацентарного переноса из крови матери. Наличие антител к ГалЦ у новорожденных нельзя отнести за счет их продукции собственной иммунной системой плода, так как при нормальном течении внутриутробного периода продукция антител В-клетками вообще отсутствует [5, 0].

Обнаружение высокого уровня аутоантител к специфическому антигену нервной ткани у практически здоровых женщин в послеродовом периоде и у новорожденных является совершенно новым, неожиданным фактом, поскольку у здоровых взрослых людей и у детей эти антитела обычно не выявляются или обнаруживаются только их следы [2, 11]. Появление антител к антигенам нервной ткани у родильниц, по-видимому, можно считать результатом активации адаптационно-защитных механизмов, возникающих вследствие гибели части клеток нервной ткани плода в ходе ее интенсивной дифференцировки в последние месяцы внутриутробного периода и в первый период после рождения [14].

Трансплантационный контакт специфических антигенов, в том числе и ГалЦ, с иммунокомпетентными клетками в организме матери неизбежно вызывает продукцию специфических аутоантител из-за того, что иммунная система, как известно, не имеет толерантности к антигенам забарьерных тканей, какой является ткань нервной системы.

Интерес представляет состояние уровня антител к ГалЦ в сыворотке крови у здоровых детей в зависимости от возраста. Эти показатели представлены в табл. 3.

 

Таблица 3. Динамика уровня аутоантител к ГалЦ у здоровых детей разного возраста

Возраст детей	n	Наличие титра аутоантител к ГалЦ (в % от числа								обследованных)
		0	1:2	1:4	1:8	1:16	1:32	1:64	1:128		1:256	1:512
До 1 месяца	20	0	0	0	0	5	5	10	15		20	45
3 месяца	30	0	6,7	16,7	60	13,3	3,3	0	0		0	0
6 месяцев	30	10	33,3	26,7	23,3	6,7	0	0	0		0	0
Один год	25	16	24	36	24	0	0	0	0		0	0
6 месяцев	25	32	12	28	28	0	0	0	0		0	0
2 года	25	16	20	52	12	0	0	0	0		0	0
3 года	25	8	28	52	12	0	0	0	0		0	0

 

Анализ показателей аутоантител к ГалЦ у детей в динамике свидетельствует о том, что уровень антител у большинства детей резко снижается уже в первые 3 месяца жизни, а к 6 месяцам приближается к границе нормы у взрослых. У части детей от 6 месяцев до 3 лет антитела к ГалЦ не обнаруживаются совсем, лишь у небольшой группы детей (12%) к 2-3 годам уровень антител незначительно превышает норму взрослых. Однако следует учитывать, что титр 1:8 лишь в 2 раза выше границы нормы у взрослых и не является диагностически значимым.

Таким образом, наличие антител к гликолипидному антигену мозга у новорожденных является вполне закономерным, как и их элиминация в течение первого года жизни. Этот факт необходимо принимать во внимание при использовании показателей противогалактоцереброзидных аутоантител в качества диагностического теста, подтверждающего повреждение клеточных структур нервной ткани при различных поражениях центральной нервной системы у детей.

Об авторах

В. И. Гузева

Санкт-Петербургская государственная педиатрическая медицинская академия

Автор, ответственный за переписку.
Email: info@eco-vector.com
Россия, Санкт-Петербург

Н. П. Таранова

Санкт-Петербургская государственная педиатрическая медицинская академия

Email: info@eco-vector.com
Россия, Санкт-Петербург

И. Б. Михайлов

Санкт-Петербургская государственная педиатрическая медицинская академия

Email: info@eco-vector.com
Россия, Санкт-Петербург

Список литературы

Дополнительные файлы