On antibody level to brain galactoc erebrosides in blood serum in healthy children of early age and women

Full Text

Весьма важным этапом патогенеза различных  нарушений нервной системы перинатального периода, раннего детского возраста, а иногда и всей жизни человека является нарушение нормальных взаимоотношений в системе мать—плацента—плод, в основе которых могут быть иммунологические механизмы [12]. Дисфункция иммунной системы у детей может быть как генетически обусловленной, так и приобретенной в результате воздействия неблагоприятных факторов во внутриутробном или постнатальном периоде [5, 12].

Известно, что в процессе онтогенеза происходит обособление головного мозга от иммунной системы, и поэтому даже неповрежденная мозговая ткань в условиях повышенной проницаемости гематоэнцефалического барьера является аутоантигеном, а в крови могут появляться противомозговые антитела. Эти процессы значительно усиливаются при наличии повреждения клеточных мембран ЦНС.

При изучении взаимоотношений нервной и иммунной систем у детей раннего возраста вопрос осложняется тем, что активные процессы миелинизации, сопровождающиеся у них гиперпродукцией мозговых антигенов, протекают на фоне неполной изоляции нервной ткани гематоэнцефалическим барьером [1, 4].

В настоящее время в клинической медицине практически отсутствуют удобные методы оценки иммунореактивности организма по отношению к нервной ткани.. Используемые методы оценки иммунных и аутоиммунных процессов не являются строго специфическими по отношению к нервной ткани, так как в них в качестве тест- антигенов применяются гомогенаты или водносолевые экстракты и лиофилизированные порошки ткани мозга, в состав которых входят белки, протеолипидные комплексы и гликопротеины, содержащиеся не только в нервной, но и в других тканях организма.

По рекомендации ВОЗ в иммунологических исследованиях должны использоваться очищенные и специфические для данной ткани антигены с известной химической структурой. Для нервной ткани такими свойствами антигенного маркера обладают гликолипиды галактоцереброзиды (ГалЦ). Доказано, что ГалЦ являются специфическими компонентами миелина и мембран клеток, продуцирующих миелин (олигодендроцитов в центральной нервной системе и леммоцитов в периферической нервной системе) [2, 7, 8]. Обнаружение аутоантител к этому антигену может использоваться как для диагностики повреждения клеточных структур нервной ткани, так и для оценки выраженности аутосенсибилизации у детей и взрослых к антигенам нервной ткани [2].

В качестве контроля необходимо иметь сведения об уровне антител к специфическим антигенам мозга, в частности к ГалЦ у здоровых детей в разные возрастные периоды, так как эти данные в зависимости от возраста могут значительно различаться. В пользу такого предположения свидетельствуют имеющиеся в литературе сведения о значительной вариабельности показателей гуморального и клеточного иммунитета у здоровых детей разного возраста [13].

Актуальной является также диагностика нарушений в иммунной системе у детей, считающихся практически здоровыми. Вполне вероятно, что скрытые, латентные иммунологические расстройства могут служить одним из факторов риска развития у них церебральных осложнений на фоне инфекций, после черепно-мозговых травм, прививок и т.д.

В настоящее время уровень антител к ГалЦ изучен у здоровых взрослых [2] и у небольшого числа здоровых детей, причем сведения о детях представлены без анализа в каждом возрастном периоде [11].

Целью настоящей работы являлось изучение уровня антител к ГалЦ мозга у здоровых детей раннего возраста в разные возрастные периоды, у родильниц и здоровых женщин в периоде между родами. Полученные результаты покажут, имеется ли продукция аутоантител к ГалЦ у детей и у их матерей, позволят оценить значение аутосенсибилизации организма к нервной ткани в патогенезе церебральных нарушений у детей, а также выделить группу риска развития этих осложнений в последующем.

Антитела к ГалЦ мозга определяли, применяя микромодификацию реакции связывания комплемента (РСК) в полистироловых панелях. В качестве антигена в реакции использовали суспензию липидов в веронал-мединаловом буфере (pH 7,4, содержащую 11,2 мкг ГалЦ, 38,7 мкг холестерина и 37,5 мкг лецитина на 1 мл суспензии) [10]. Добавление холестерина и лецитина необходимо для формирования липидных мицелл и стабилизации суспензии ГалЦ-АГ. В качестве рефренс-сыворотки использовали сыворотку кроликов, иммунизированных ГалЦ, имевшую титр антител к ГалЦ по РСК 1:64 - 1:128 [3].

ГалЦ и лецитин, необходимые для проведения иммунологического анализа, получали из хлороформ-метанолового экстракта мозга быка методом тонкослойной хроматографии на силикагеле.

Всего было обследовано 206 лиц, у которых, по данным анамнеза и клинического наблюдения, не было каких-либо пароксизмальных расстройств сознания, очаговых неврологических симптомов и нарушений психоречевого развития. Эта группа состояла из 14 здоровых женщин в возрасте от 22 до 36 лет, 12 родильниц и 180 детей в возрасте от 4 дней до 3 лет. Дети и взрослые были обследованы в клиниках или амбулаторно.

К моменту обследования все лица контрольной группы считались здоровыми. Сведения о перенесенных ранее заболеваниях у детей представлены в табл. 1.

 

Таблица1. Характеристика соматических заболеваний, имевшихся в анамнезе у обследованных детей

Клинический диагноз	Возраст, мес
	до 1 месяца	1—3	3—6	6—12	12—18	1—24	24—36 и более	Итого
Ранее не болели	20	1	3	3	1	1	4	33
Отит	—	1	2	2	2	2	3	12
Гипотрофия	—	10	—	3		3	1	17
Пилороспазм	—	4	1	—	—	—	—	5
Рахит	—	2	4	1	2	3	1	13
ОРВИ (легкая форма)	—	3	4	2	1	1	1	12
Бронхит	—	4	7	7	6	4	4	32
Кишечная колика	—	2	3	4	8	6	6	29
Нефропатия Сколиоз и дисплазия	—	1	4	2	2	2	3	14
тазобедренных суставов	—	2	2	1	3	3	2	13
Итого	20	30	30	25	25	25	25	180

 

Приведенные в таблице данные свидетельствуют об отсутствии у детей тяжелых заболеваний в анамнезе, а также о примерно одинаковом распределении заболеваний по возрасту. Следовательно, перенесенные соматические заболевания у них не могли существенно повлиять на титр антител к ГалЦ. Взрослые также считались практически здоровыми.

Результаты исследования антител к ГалЦ мозга у здоровых людей - женщин, родильниц и новорожденных представлены в табл. 2.

 

Таблица 2. Титры антител к ГАЛЦ в сыворотке крови у здоровых женщин, родильниц и новорожденных

Титры антител к ГАЛЦ
у здоровых женщин	у родильниц	у новорожденных
1:2	1:64	1:64
1:2	1:128	1:128
0	1:256	1:256
0	1:512	1:512
1:4	1:16	1:32
1:2	1:32	1:64
1:2	1:64	1:128
1:4	1:128	1:256
0	1:512	1:512
0	1:64	1:128
0	1:256	1:512
1:4	1:512	1:512
1:2
0

 

Данные таблицы подтверждают, что у здоровых женщин в межродовом периоде аутоантитела к ГалЦ либо не выявляются, либо обнаруживаются в очень низких титрах (до 1:4), не превышающих верхнюю границу нормы, ранее установленную для здоровых взрослых. В то же время у всех женщин в послеродовом периоде и у их новорожденных были выявлены аутоантитела к ГалЦ в высоких титрах - от 1:32 до 1:512. Полученные результаты обследования родильниц и новорожденных дают основание предположить, что аутоантитела к ГалЦ у новорожденных появляются вследствие их трансплацентарного переноса из крови матери. Наличие антител к ГалЦ у новорожденных нельзя отнести за счет их продукции собственной иммунной системой плода, так как при нормальном течении внутриутробного периода продукция антител В-клетками вообще отсутствует [5, 0].

Обнаружение высокого уровня аутоантител к специфическому антигену нервной ткани у практически здоровых женщин в послеродовом периоде и у новорожденных является совершенно новым, неожиданным фактом, поскольку у здоровых взрослых людей и у детей эти антитела обычно не выявляются или обнаруживаются только их следы [2, 11]. Появление антител к антигенам нервной ткани у родильниц, по-видимому, можно считать результатом активации адаптационно-защитных механизмов, возникающих вследствие гибели части клеток нервной ткани плода в ходе ее интенсивной дифференцировки в последние месяцы внутриутробного периода и в первый период после рождения [14].

Трансплантационный контакт специфических антигенов, в том числе и ГалЦ, с иммунокомпетентными клетками в организме матери неизбежно вызывает продукцию специфических аутоантител из-за того, что иммунная система, как известно, не имеет толерантности к антигенам забарьерных тканей, какой является ткань нервной системы.

Интерес представляет состояние уровня антител к ГалЦ в сыворотке крови у здоровых детей в зависимости от возраста. Эти показатели представлены в табл. 3.

 

Таблица 3. Динамика уровня аутоантител к ГалЦ у здоровых детей разного возраста

Возраст детей	n	Наличие титра аутоантител к ГалЦ (в % от числа								обследованных)
		0	1:2	1:4	1:8	1:16	1:32	1:64	1:128		1:256	1:512
До 1 месяца	20	0	0	0	0	5	5	10	15		20	45
3 месяца	30	0	6,7	16,7	60	13,3	3,3	0	0		0	0
6 месяцев	30	10	33,3	26,7	23,3	6,7	0	0	0		0	0
Один год	25	16	24	36	24	0	0	0	0		0	0
6 месяцев	25	32	12	28	28	0	0	0	0		0	0
2 года	25	16	20	52	12	0	0	0	0		0	0
3 года	25	8	28	52	12	0	0	0	0		0	0

 

Анализ показателей аутоантител к ГалЦ у детей в динамике свидетельствует о том, что уровень антител у большинства детей резко снижается уже в первые 3 месяца жизни, а к 6 месяцам приближается к границе нормы у взрослых. У части детей от 6 месяцев до 3 лет антитела к ГалЦ не обнаруживаются совсем, лишь у небольшой группы детей (12%) к 2-3 годам уровень антител незначительно превышает норму взрослых. Однако следует учитывать, что титр 1:8 лишь в 2 раза выше границы нормы у взрослых и не является диагностически значимым.

Таким образом, наличие антител к гликолипидному антигену мозга у новорожденных является вполне закономерным, как и их элиминация в течение первого года жизни. Этот факт необходимо принимать во внимание при использовании показателей противогалактоцереброзидных аутоантител в качества диагностического теста, подтверждающего повреждение клеточных структур нервной ткани при различных поражениях центральной нервной системы у детей.

About the authors

V. I. Guzeva

Saint Petersburg State Pediatric Medical Academy

Author for correspondence.
Email: info@eco-vector.com
Russian Federation, St. Petersburg

N. Р. Taranova

Saint Petersburg State Pediatric Medical Academy

Email: info@eco-vector.com
Russian Federation, St. Petersburg

I. В. Mikhailov

Saint Petersburg State Pediatric Medical Academy

Email: info@eco-vector.com
Russian Federation, St. Petersburg

References

Supplementary files