


Том 25, № 4 (2022)
- Год: 2022
- Статей: 8
- URL: https://journals.eco-vector.com/1560-9596/issue/view/5740
Фармацевтическая химия
Определение содержания флавоноидов в цветках, листьях и побегах боярышника
Аннотация
Актуальность. Лекарственные препараты на основе сырья боярышника (Crataegus sp.) успешно применяются в качестве кардиотонических средств как в Российской Федерации, так и за рубежом. Однако в качестве сырья боярышника в нашей стране находят применение только цветки и плоды, тогда как зарубежный опыт показывает возможность применения в качестве сырья побегов боярышника, собранных на стадии цветения растения. Источником нового вида сырья могут служить боярышник кроваво-красный (Crataegus sanguinea Pall.), боярышник однопестичный (Crataegus monogina Jacq.) и боярышник мягковатый (полумягкий) (Crataegus submollis Sarg.). Как показали исследования, проведенные ранее, листья боярышника кроваво-красного обладают кардиотоническим эффектом и диуретическим действием, а побеги боярышника мягковатого могут применяться в качестве антидепрессантов. Цель исследования - сравнительное изучение флавоноидного состава цветков, листьев и побегов некоторых видов рода боярышник (Crataegus L.). Материал и методы. Объект исследования - цветки, листья и побеги боярышника кроваво-красного, боярышника однопестичного и боярышника мягковатого были собранные в период цветения растений на территории Ботанического сада Самарского университета в мае 2021 г. Во всех видах сырья определяли содержание флавоноидов. Качественный анализ проводили методом тонкослойной хроматографии и УФ-спектрофотометрии. Методом количественного анализа была выбрана дифференциальная спектрофотометрия. Результаты. Сравнительный анализ цветков, листьев и побегов боярышника показал, что цветки боярышника исследуемых видов близки по флавоноидному составу, тогда как листья и побеги заметно отличаются, хотя в рамках одного вида их флавоноидный состав близок. Во всех видах сырья отмечается содержание хлорогеновой кислоты и гиперозида. Выводы. Флавоноидный состав побегов и листьев боярышника близок у соответствующих видов, поэтому количественный анализ листьев и побегов боярышника следует проводить методом дифференциальной спектрофотометрии. В случае листьев и побегов боярышника мягковатого целесообразно проводить определение суммы флавоноидов в пересчете на гиперозид (длина волны 412 нм), а в случае боярышника кроваво-красного и боярышника однопестичного - определять содержание суммы флавоноидов в пересчете на 2П-О-рамнозида витексин (длина волны 392 нм). Листья и побеги боярышника являются перспективными видами лекарственного растительного сырья. Боярышник мягковатый - перспективный источник лекарственных растительных препаратов.



Многомерный анализ спектров рентгеновской флуоресценции как возможный подход для сравнительного изучения элементного состава плодов и семян Mangifera indica, Actinidia deliciosa, Nigella sp
Аннотация
Актуальность. Специфика растительного сырья как объекта рентгенофлуоресцентного анализа (РФА) обусловлена неоднородным накоплением элементов на субклеточном и тканевом уровне - в растениях элементы присутствуют в адсорбированной, коллоидной, ионной формах, как органоминеральные комплексы и полимерные соединения. Поэтому исследование растительных субстратов ограничено наличием матричных эффектов, для учета которых необходим набор стандартов - образцов сравнения. Цель работы - без применения стандарта исследовать степень обусловленных географией произрастания межвидовых и внутривидовых различий в элементных профилях растительных образцов, применяя метод главных компонент для обработки спектров рентгеновской флуоресценции. Материал и методы. Предложенный подход применен для исследования элементных профилей плодов растений рода Actinidia, Mangifera и семян растений рода Nigella. Работа выполнена на энергодисперсионном рентгенофлуоресцентном спектрометре EDX-7000 Shimadzu. Для обработки данных методом главных компонент использовали ПО OriginPro 2017 (OriginLab, США). Результаты. Показана эффективность метода главных компонент в обработке массива данных рентгеновской флуоресценции образцов. В результате анализа элементного состава высушенных семян плодов киви выявлено, что образцы, вне зависимости от региона произрастания, достаточно схожи по химическому составу, который, по-видимому, является видоспецифичным. Установлено, что применение РФА для оценки содержания кальция в съедобной части плода по стабильным и воспроизводимым результатам, полученным для семян в целом перспективно. На примере плодов манго показано, что измельчение тканей плода приводит к увеличению интенсивности сигнала флуоресценции всех элементов. Рентгенофлуоресцентный анализ позволяет открыть далеко не все элементы в составе растительной матрицы, однако соотношения значений сигналов флуоресценции складывается в характерную и видоспецифичную картину. Выводы. Полученные результаты свидетельствуют о перспективности исследований по оценке возможности использования РФА в совокупности с методом главных компонент для экспресс-анализа элементного состава растительного материала и визуализации различий, обусловленных особенностями накопления элементов растениями разных видов или регионов произрастания.



Химико-токсикологическое исследование залеплона и его метаболитов в биологическом объекте моче
Аннотация
Актуальность. Производные бензодиазепинов являются психоактивными веществами, модуляторами рецепторов гамма-аминомасляной кислоты (ГАМК), проявляющими снотворное, седативное, анксиолитическое и противосудорожное действие. На основании этого механизма действия широкое применение в медицинской практике имеет место использование агонистов бензодиазепиновых рецепторов небензодиазепинового ряда. К небензодиазепиновым анксиолитикам относятся так называемые Z-препараты, по названию первых препаратов из этой группы (зопиклон, золпидем, залеплон). По механизму действия они являются селективными агонистами омега-1-подтипа (зопиклон, золпидем) и омега-2-подтипа (залеплон) бензодиазепиновых рецепторов макромолекулярного ГАМКА-рецепторного комплекса. В настоящее время в России из этой группы препаратов наиболее доступным является залеплон. Цель исследования - разработка методики обнаружения залеплона и его метаболитов в моче методом ВЭЖХ-МС с ВР с использованием технологии Orbitrap для целей и задач судебно-медицинской экспертизы. Материал и методы. Утренняя моча отбиралась у пациентов, которые принимали терапевтические концентрации залеплона по назначению врача. Исследовали действующее вещество залеплон в качестве спиртового раствора с содержанием 1 мг/мл исследуемого вещества. Для исследования использовалась ВЭЖХ-МС с высоким разрешением с использованием технологии Orbitrap на приборе. Поскольку при направлении на судебно-медицинскую экспертизу для химико-токсикологического исследования симптоматика побочных эффектов у залеплона схожа с производными бензодиазепина, то пробоподготовку проводили по общепринятой схеме для соединений этой группы. Результаты. Разработана методика идентификации залеплона в извлечениях из мочи методом ВЭЖХ-МС с ВР с использованием технологии Orbitrap в качестве подтверждающего метода при проведении судебно-химического и химико-токсикологического исследования мочи. Обнаружены и установлены времена удерживания метаболита 5-оксозалеплона после перорального приема и определены характерные ионы для использования при идентификации. Выводы. Проведенная валидационная оценка разработанной методики свидетельствует о ее пригодности для судебно-химического и химико-токсикологического анализа. Для биологического объекта - мочи относительное стандартное отклонение (RSD,%) при оценке сходимости и внутрилабораторной воспроизводимости времен удерживания не превышала 5%.



Медицинская химия
Изменение активности лизосомальных цистеиновых протеаз спермоплазмы у пациентов с нарушением репродуктивной функции
Аннотация
Актуальность. Одной из серьезных проблем современного общества является мужское бесплодие, на долю которого приходится 7% в общей структуре бесплодных браков. Причины, приводящие к нему, не всегда понятны. Все исследования эякулята в основном базируются на химико-микроскопических исследованиях. Биохимические показатели спермы в настоящее время определяются в недостаточном объеме, поэтому введение новых биохимических маркеров для диагностики снижения фертильности у мужчин очень актуальны. Цель работы - изучение активности катепсинов B, L и Н, содержащихся в акросоме сперматозоидов, у мужчин с нарушениями репродуктивной функции. Материал и методы. Материалом для исследования являлась спермоплазма, которая была получена от 30 пациентов с диагнозом хронический простатит и 30 пациентов с диагнозом варикоцеле с жалобами на репродуктивное здоровье. Контрольную группу составили 30 пациентов без заболеваний мочеполовой системы при физикальном осмотре и не имеющих в анамнезе жалоб на репродуктивное здоровье. Спермоплазму получали методом центрифугирования образца спермы в течение 10 мин при скорости 1000 об/мин. Активность катепсинов В, L, H в спермоплазме определяли спектрофлуориметрическим методом по A.J. Barrett и H. Kirschke. Результаты. Результаты исследования показали следующее: активность катепсина В у пациентов с диагнозом хронический простатит снижена в 3,4 раза, у пациентов с диагнозом варикоцеле - в 18,5 раза; активность катепсина L у пациентов с хроническим простатитом снижена в 3,5 раза, при варикоцеле - в 20 раз; активность катепсина H при хроническом простатите снижена в 3,3 раза, у пациентов с варикоцеле - в 25,5 раза. Выводы. Изучена активность лизосомалных цистеиновых протеаз В, L, H у пациентов с нарушением репродуктивной функции. Было обнаружено снижение активности катепсинов В, L, H у данных пациентов, в отличие от пациентов без признаков нарушения фертильности. Таким образом, изменение активности катепсинов В, L и H может рассматриваться как один из возможных маркеров диагностики мужского бесплодия.



Роль антиоксидантов в регуляции воспалительного ответа клеток цельной крови на фоне их стимуляции митогенами и липополисахаридом
Аннотация
Актуальность. Антиоксиданты играют важную роль в профилактике различных патологических состояний, включая радиационные повреждения, инфекции, иммунный ответ и др. Дефицит антиоксидантов на фоне усиления процессов пероксидации ассоциируется с прогрессированием различных патологических процессов, в том числе инфекционного воспаления. Соотношение между активностью антиоксидантной системы и состоянием перекисного окисления липидов взаимосвязано с фосфорилированием отдельных внутриклеточных ферментов, участвующих в функционировании рецептор-ассоциированных сигнальных путей. Показано, что антиоксиданты обладают иммуномодулирующим влиянием при инфекционных процессах, способствуя изменению продукции цитокинов, активности фагоцитоза, антителопродукции и т.п. Цель исследования - охарактеризовать влияние антиоксидантов на стимулированную митогеном и липополисахаридом продукцию цитокинов и содержание в мононуклеарных лейкоцитах терминальных MAPK/SAPK протеинкиназ. Материал и методы. Материалом для исследования служила венозная кровь, забиравшаяся в утренние часы из локтевой вены у практически здоровых лиц из числа доноров крови обоего пола в возрасте 20-25 лет. В лизатах мононуклеарных клеток (МНК) цельной крови методом ИФА оценивали содержание стресс-активируемой протеинкиназы JNK 1 и 2 изоформ (JNK1/2), митоген-активируемой протеинкиназы p38, уровень субъединицы р65 ядерного фактора транскрипции NF-kB. В супернатантах исследовали уровень интерлейкинов (ИЛ): ИЛ-lß, -2, -4, -6, -8, -10, -12, -13, -17А, -19, -21, -22, -23, -28, ФНОа, ИНФy, РАИЛ-1, ТРФР, GM-CSF, липополисахаридсвязывающего белка, цАМФ, концентрацию антиоксидантов и перекисей. Результаты. Проведенный анализ показал, что высокий уровень антиоксидантной активности крови на фоне митогенной стимуляции и воздействия на клетки липополисахарида ассоциирован с повышением продукции ИЛ-10, ИЛ-12, GM-CGF, ИЛ-4, ЦОГ-2, цАМФ, СОД, а также снижением уровней ИЛ-1, ИЛ-17А, липополисахаридсвязывающего протеина, уменьшением содержания в МНК протеинкиназы JNK и p38. Выводы. Высокий уровень антиоксидантов способствует частичному ослаблению провоспалительной активности клеток цельной крови подвергнутых митогенной стимуляции и активации липополисахаридом. Иммунорегулирующие эффекты антиоксидантов определяются изменением в МНК активности терминальных протеинкиназ MAPK/SAPK-сигнального пути, в частности, JNK и p38 возможно за счет активации посредством цАМФ сигнального пути PKA/CREB.



Вопросы экспериментальной биологии и медицины
Некоторые аспекты доклинического изучения безопасности лапчатки белой (Potentilla alba L.) экстракта сухого
Аннотация
Актуальность. В последнее время для лечения заболеваний щитовидной железы предлагается использовать лекарственные средства растительного происхождения, которые способны оказывать влияние на функциональную активность и структуру щитовидной железы. Одним из таких перспективных объектов считается лапчатка белая (Potentilla alba L., семейство Розоцветные - Rosacea), которая является эффективным регулятором уровня гормонов щитовидной железы и применяется в комплексном лечении указанной патологии эндокринной системы. Цель исследования - оценить общетоксическое действие лапчатки белой экстракта сухого в условиях хронического опыта для определения возможности разработки на его основе новых лекарственных средств, рекомендуемых при лечении заболеваний щитовидной железы. Материал и методы. Хронический эксперимент проведен на самцах и самках крыс Wistar. Исследуемый экстракт вводили внутрижелудочно в течение 90 дней в дозах 25, 125 и 375 мг/кг. Контрольным животным давали воду. Регистрировали интегральные показатели здоровья экспериментальных животных, брали пробы периферической крови для определения гематологических и биохимических показателей, изучали функциональное состояние сердечно-сосудистой системы (ЭКГ-исследование), центральной нервной системы по ориентировочным реакциям в тесте «открытое поле», выделительную функцию почек на фоне 3%-ной водной нагрузки. В конце эксперимента проводили патогистологические исследования внутренних органов крыс. Результаты. Длительное введение лапчатки белой экстракта сухого в желудок клинически здоровым крысам обоего пола в 2,5-кратных, 12,5-кратных и 37,5-кратных терапевтических дозах вызывало дозозависимую гипофункцию щитовидной железы и оказывало гиполипидемическое действие. Лапчатки белой экстракт сухой во всех испытанных дозах не проявлял токсического влияния на кровь, сердечно-сосудистую и нервную систему крыс. Длительное введение лапчатки белой экстракта сухого в максимальной испытанной дозе (375 мг/кг) приводило к умеренному повреждающему действию на печень и почки крыс обоего пола, а также семенники. Установлена пороговая доза - 25 мг/кг. Выводы. Результаты исследования послужили основанием для создания на основе изученного экстракта новых тиреотропных лекарственных средств системного действия (капсулы 0,050 г, таблетки 0,150 г) и рекомендации их для дальнейшего изучения.



Желчегонная активность фракций, выделенных из Calendula officinalis L
Аннотация
Актуальность. Лекарственные средства, из растительного сырья, обладающие желчегонными и гепатопротекторными свойствами, имеют широкий диапазон действия, высокую эффективность, доступность, взаимозаменяемость и возможность длительного применения без побочных проявлений, что обусловливает актуальность исследования растительного сырья. Цель исследования - определение желчегонной активности бутанольной, этилацетатной, гексановой и хлороформной фракций в дозах 50 мг/кг из соцветий календулы лекарственной, культивируемой в России. Материал и методы. Исследование проводили на наркотизированных белых крысах-самцах Wistar с массой 180-200 г при введении per os фракций в дозах 50 мг/кг. Желчь собирали трубочкой, вставленной в общий желчный проток через каждый час в течение четырех часов подряд. Результаты. Установлено, что бутанольная фракция повышает холеретическую реакцию на 27-47%, гексановая - на 20%, хлороформная - на 12%, этилацетатная - на 10%. Наиболее выраженным желчегонным свойством обладала бутанольная фракция, которая повышала холеретическую реакцию на 27-47% по сравнению с контролем, за ней следовали гексановая фракция (20%), хлороформная фракция (12%) и этилацетатная фракция (10%). Желчегонная реакция оставалась на высоком уровне в течение четырех часов после введения бутанольной и гексановой фракций. Стимулирующее влияние на синтез и выделение холатов наиболее выражено у этилацетатной фракции, за ней следуют бутанольная, хлороформная и гексановая фракции. Выводы. Установлено выраженное желчегонное действие бутанольной фракции цветков календулы лекарственной, обусловленное высоким содержанием флавоноидов (35-40%), которые являются основным классом соединений этой фракции.



Защита и биотехнология растений
Содержание фенольных соединений и эфирного масла в сырье мяты перечной (Mentha x piperita L.) при выращивании в условиях органической культуры
Аннотация
Актуальность. Изучение качественных показателей основных лекарственных растений является актуальной задачей производства органического сырья. Мята перечная (Mentha x piperita L.) является одной из наиболее востребованных в мире лекарственных культур, которую используют для получения мятного листа, эфирного масла, для производства фиточаёв, где органическая продукция занимает свой отдельный сегмент. Фармакологически значимыми соединениями в мяте являются эфирное масло и фенольные соединения (в том числе флавоноиды и дубильные вещества). Цель работы - оценка содержания эфирного масла, суммы фенольных соединений, флавоноидов и дубильных веществ в листе пяти сортов мяты перечной, выращенных в условиях органической культуры. Материал и методы. В качестве объектов были выбраны сорта Митчамская, Апельсиновая, Кубанская 6, Тик-так, Мультимента. Урожайность определяли в фазе цветения. Содержание эфирного масла выявляли методом гидродистилляции по Клевенджеру, компонентный состав - методом газовой хроматографии, сумму фенольных соединений и дубильных веществ - по методу Фолина-Чокальтеу в водно-спиртовой вытяжке в пересчёте на галловую кислоту. Определение флавоноидов в водно-спиртовой вытяжке проводили алюмохлоридным методом в пересчёте на рутин. Результаты. Содержание эфирного масла в зависимости от сорта колебалось от 0,89 до 2,91% за 2 года при содержании ментола у ментольных сортов от 25,99 до 50,36 %. Сырьё мяты характеризуется высоким содержанием суммы фенольных соединений (от 9,33% у сорта Митчамская до 10,77% у сорта Мультимента). Содержание флавоноидов в зависимости от сорта колебалось от 2,25% у сорта Кубанская 6 до 4,22% у сорта Апельсиновая. Среднее содержание дубильных веществ за два года не превышало 1,5%. Выводы. Выращивание мяты перечной в органической культуре позволяет получить сырьё с высоким содержанием фенольных соединений (в том числе флавоноидов) и эфирного масла.


