Открытый доступ Открытый доступ  Доступ закрыт Доступ предоставлен  Доступ закрыт Доступ платный или только для подписчиков

Том 25, № 4 (2022)

Весь выпуск

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Доступ платный или только для подписчиков

Фармацевтическая химия

Определение содержания флавоноидов в цветках, листьях и побегах боярышника

Куркин В.А., Волкова Н.А., Правдивцева О.Е., Куркина А.В., Трифонова П.В., Дубищев А.В., Агапов А.И., Егорова С.Н.

Аннотация

Актуальность. Лекарственные препараты на основе сырья боярышника (Crataegus sp.) успешно применяются в качестве кардиотонических средств как в Российской Федерации, так и за рубежом. Однако в качестве сырья боярышника в нашей стране находят применение только цветки и плоды, тогда как зарубежный опыт показывает возможность применения в качестве сырья побегов боярышника, собранных на стадии цветения растения. Источником нового вида сырья могут служить боярышник кроваво-красный (Crataegus sanguinea Pall.), боярышник однопестичный (Crataegus monogina Jacq.) и боярышник мягковатый (полумягкий) (Crataegus submollis Sarg.). Как показали исследования, проведенные ранее, листья боярышника кроваво-красного обладают кардиотоническим эффектом и диуретическим действием, а побеги боярышника мягковатого могут применяться в качестве антидепрессантов. Цель исследования - сравнительное изучение флавоноидного состава цветков, листьев и побегов некоторых видов рода боярышник (Crataegus L.). Материал и методы. Объект исследования - цветки, листья и побеги боярышника кроваво-красного, боярышника однопестичного и боярышника мягковатого были собранные в период цветения растений на территории Ботанического сада Самарского университета в мае 2021 г. Во всех видах сырья определяли содержание флавоноидов. Качественный анализ проводили методом тонкослойной хроматографии и УФ-спектрофотометрии. Методом количественного анализа была выбрана дифференциальная спектрофотометрия. Результаты. Сравнительный анализ цветков, листьев и побегов боярышника показал, что цветки боярышника исследуемых видов близки по флавоноидному составу, тогда как листья и побеги заметно отличаются, хотя в рамках одного вида их флавоноидный состав близок. Во всех видах сырья отмечается содержание хлорогеновой кислоты и гиперозида. Выводы. Флавоноидный состав побегов и листьев боярышника близок у соответствующих видов, поэтому количественный анализ листьев и побегов боярышника следует проводить методом дифференциальной спектрофотометрии. В случае листьев и побегов боярышника мягковатого целесообразно проводить определение суммы флавоноидов в пересчете на гиперозид (длина волны 412 нм), а в случае боярышника кроваво-красного и боярышника однопестичного - определять содержание суммы флавоноидов в пересчете на 2П-О-рамнозида витексин (длина волны 392 нм). Листья и побеги боярышника являются перспективными видами лекарственного растительного сырья. Боярышник мягковатый - перспективный источник лекарственных растительных препаратов.

Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2022;25(4):3-9
pages 3-9 views

Многомерный анализ спектров рентгеновской флуоресценции как возможный подход для сравнительного изучения элементного состава плодов и семян Mangifera indica, Actinidia deliciosa, Nigella sp

Морозова М.А., Марухленко А.В., Максимова Т.В., Ньямбосе Д.

Аннотация

Актуальность. Специфика растительного сырья как объекта рентгенофлуоресцентного анализа (РФА) обусловлена неоднородным накоплением элементов на субклеточном и тканевом уровне - в растениях элементы присутствуют в адсорбированной, коллоидной, ионной формах, как органоминеральные комплексы и полимерные соединения. Поэтому исследование растительных субстратов ограничено наличием матричных эффектов, для учета которых необходим набор стандартов - образцов сравнения. Цель работы - без применения стандарта исследовать степень обусловленных географией произрастания межвидовых и внутривидовых различий в элементных профилях растительных образцов, применяя метод главных компонент для обработки спектров рентгеновской флуоресценции. Материал и методы. Предложенный подход применен для исследования элементных профилей плодов растений рода Actinidia, Mangifera и семян растений рода Nigella. Работа выполнена на энергодисперсионном рентгенофлуоресцентном спектрометре EDX-7000 Shimadzu. Для обработки данных методом главных компонент использовали ПО OriginPro 2017 (OriginLab, США). Результаты. Показана эффективность метода главных компонент в обработке массива данных рентгеновской флуоресценции образцов. В результате анализа элементного состава высушенных семян плодов киви выявлено, что образцы, вне зависимости от региона произрастания, достаточно схожи по химическому составу, который, по-видимому, является видоспецифичным. Установлено, что применение РФА для оценки содержания кальция в съедобной части плода по стабильным и воспроизводимым результатам, полученным для семян в целом перспективно. На примере плодов манго показано, что измельчение тканей плода приводит к увеличению интенсивности сигнала флуоресценции всех элементов. Рентгенофлуоресцентный анализ позволяет открыть далеко не все элементы в составе растительной матрицы, однако соотношения значений сигналов флуоресценции складывается в характерную и видоспецифичную картину. Выводы. Полученные результаты свидетельствуют о перспективности исследований по оценке возможности использования РФА в совокупности с методом главных компонент для экспресс-анализа элементного состава растительного материала и визуализации различий, обусловленных особенностями накопления элементов растениями разных видов или регионов произрастания.

Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2022;25(4):10-14
pages 10-14 views

Химико-токсикологическое исследование залеплона и его метаболитов в биологическом объекте моче

Волкова А.А., Калёкин Р.А., Орлова А.М., Москалева Н.Е., Маркин П.А., Асташкина О.Г.

Аннотация

Актуальность. Производные бензодиазепинов являются психоактивными веществами, модуляторами рецепторов гамма-аминомасляной кислоты (ГАМК), проявляющими снотворное, седативное, анксиолитическое и противосудорожное действие. На основании этого механизма действия широкое применение в медицинской практике имеет место использование агонистов бензодиазепиновых рецепторов небензодиазепинового ряда. К небензодиазепиновым анксиолитикам относятся так называемые Z-препараты, по названию первых препаратов из этой группы (зопиклон, золпидем, залеплон). По механизму действия они являются селективными агонистами омега-1-подтипа (зопиклон, золпидем) и омега-2-подтипа (залеплон) бензодиазепиновых рецепторов макромолекулярного ГАМКА-рецепторного комплекса. В настоящее время в России из этой группы препаратов наиболее доступным является залеплон. Цель исследования - разработка методики обнаружения залеплона и его метаболитов в моче методом ВЭЖХ-МС с ВР с использованием технологии Orbitrap для целей и задач судебно-медицинской экспертизы. Материал и методы. Утренняя моча отбиралась у пациентов, которые принимали терапевтические концентрации залеплона по назначению врача. Исследовали действующее вещество залеплон в качестве спиртового раствора с содержанием 1 мг/мл исследуемого вещества. Для исследования использовалась ВЭЖХ-МС с высоким разрешением с использованием технологии Orbitrap на приборе. Поскольку при направлении на судебно-медицинскую экспертизу для химико-токсикологического исследования симптоматика побочных эффектов у залеплона схожа с производными бензодиазепина, то пробоподготовку проводили по общепринятой схеме для соединений этой группы. Результаты. Разработана методика идентификации залеплона в извлечениях из мочи методом ВЭЖХ-МС с ВР с использованием технологии Orbitrap в качестве подтверждающего метода при проведении судебно-химического и химико-токсикологического исследования мочи. Обнаружены и установлены времена удерживания метаболита 5-оксозалеплона после перорального приема и определены характерные ионы для использования при идентификации. Выводы. Проведенная валидационная оценка разработанной методики свидетельствует о ее пригодности для судебно-химического и химико-токсикологического анализа. Для биологического объекта - мочи относительное стандартное отклонение (RSD,%) при оценке сходимости и внутрилабораторной воспроизводимости времен удерживания не превышала 5%.

Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2022;25(4):15-22
pages 15-22 views

Медицинская химия

Изменение активности лизосомальных цистеиновых протеаз спермоплазмы у пациентов с нарушением репродуктивной функции

Иштулин А.Ф., Короткова Н.В., Матвеева И.В., Исаков С.А., Минаев И.В., Полякова П.М.

Аннотация

Актуальность. Одной из серьезных проблем современного общества является мужское бесплодие, на долю которого приходится 7% в общей структуре бесплодных браков. Причины, приводящие к нему, не всегда понятны. Все исследования эякулята в основном базируются на химико-микроскопических исследованиях. Биохимические показатели спермы в настоящее время определяются в недостаточном объеме, поэтому введение новых биохимических маркеров для диагностики снижения фертильности у мужчин очень актуальны. Цель работы - изучение активности катепсинов B, L и Н, содержащихся в акросоме сперматозоидов, у мужчин с нарушениями репродуктивной функции. Материал и методы. Материалом для исследования являлась спермоплазма, которая была получена от 30 пациентов с диагнозом хронический простатит и 30 пациентов с диагнозом варикоцеле с жалобами на репродуктивное здоровье. Контрольную группу составили 30 пациентов без заболеваний мочеполовой системы при физикальном осмотре и не имеющих в анамнезе жалоб на репродуктивное здоровье. Спермоплазму получали методом центрифугирования образца спермы в течение 10 мин при скорости 1000 об/мин. Активность катепсинов В, L, H в спермоплазме определяли спектрофлуориметрическим методом по A.J. Barrett и H. Kirschke. Результаты. Результаты исследования показали следующее: активность катепсина В у пациентов с диагнозом хронический простатит снижена в 3,4 раза, у пациентов с диагнозом варикоцеле - в 18,5 раза; активность катепсина L у пациентов с хроническим простатитом снижена в 3,5 раза, при варикоцеле - в 20 раз; активность катепсина H при хроническом простатите снижена в 3,3 раза, у пациентов с варикоцеле - в 25,5 раза. Выводы. Изучена активность лизосомалных цистеиновых протеаз В, L, H у пациентов с нарушением репродуктивной функции. Было обнаружено снижение активности катепсинов В, L, H у данных пациентов, в отличие от пациентов без признаков нарушения фертильности. Таким образом, изменение активности катепсинов В, L и H может рассматриваться как один из возможных маркеров диагностики мужского бесплодия.

Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2022;25(4):23-28
pages 23-28 views

Роль антиоксидантов в регуляции воспалительного ответа клеток цельной крови на фоне их стимуляции митогенами и липополисахаридом

Логаткина А.В., Бондарь С.С., Никифоров В.С., Бондарь Н.В., Терехов И.В., Парфенюк В.К.

Аннотация

Актуальность. Антиоксиданты играют важную роль в профилактике различных патологических состояний, включая радиационные повреждения, инфекции, иммунный ответ и др. Дефицит антиоксидантов на фоне усиления процессов пероксидации ассоциируется с прогрессированием различных патологических процессов, в том числе инфекционного воспаления. Соотношение между активностью антиоксидантной системы и состоянием перекисного окисления липидов взаимосвязано с фосфорилированием отдельных внутриклеточных ферментов, участвующих в функционировании рецептор-ассоциированных сигнальных путей. Показано, что антиоксиданты обладают иммуномодулирующим влиянием при инфекционных процессах, способствуя изменению продукции цитокинов, активности фагоцитоза, антителопродукции и т.п. Цель исследования - охарактеризовать влияние антиоксидантов на стимулированную митогеном и липополисахаридом продукцию цитокинов и содержание в мононуклеарных лейкоцитах терминальных MAPK/SAPK протеинкиназ. Материал и методы. Материалом для исследования служила венозная кровь, забиравшаяся в утренние часы из локтевой вены у практически здоровых лиц из числа доноров крови обоего пола в возрасте 20-25 лет. В лизатах мононуклеарных клеток (МНК) цельной крови методом ИФА оценивали содержание стресс-активируемой протеинкиназы JNK 1 и 2 изоформ (JNK1/2), митоген-активируемой протеинкиназы p38, уровень субъединицы р65 ядерного фактора транскрипции NF-kB. В супернатантах исследовали уровень интерлейкинов (ИЛ): ИЛ-lß, -2, -4, -6, -8, -10, -12, -13, -17А, -19, -21, -22, -23, -28, ФНОа, ИНФy, РАИЛ-1, ТРФР, GM-CSF, липополисахаридсвязывающего белка, цАМФ, концентрацию антиоксидантов и перекисей. Результаты. Проведенный анализ показал, что высокий уровень антиоксидантной активности крови на фоне митогенной стимуляции и воздействия на клетки липополисахарида ассоциирован с повышением продукции ИЛ-10, ИЛ-12, GM-CGF, ИЛ-4, ЦОГ-2, цАМФ, СОД, а также снижением уровней ИЛ-1, ИЛ-17А, липополисахаридсвязывающего протеина, уменьшением содержания в МНК протеинкиназы JNK и p38. Выводы. Высокий уровень антиоксидантов способствует частичному ослаблению провоспалительной активности клеток цельной крови подвергнутых митогенной стимуляции и активации липополисахаридом. Иммунорегулирующие эффекты антиоксидантов определяются изменением в МНК активности терминальных протеинкиназ MAPK/SAPK-сигнального пути, в частности, JNK и p38 возможно за счет активации посредством цАМФ сигнального пути PKA/CREB.

Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2022;25(4):29-39
pages 29-39 views

Вопросы экспериментальной биологии и медицины

Некоторые аспекты доклинического изучения безопасности лапчатки белой (Potentilla alba L.) экстракта сухого

Крепкова Л.В., Бабенко А.Н., Лемясева С.В., Боровкова М.В., Кузина О.С.

Аннотация

Актуальность. В последнее время для лечения заболеваний щитовидной железы предлагается использовать лекарственные средства растительного происхождения, которые способны оказывать влияние на функциональную активность и структуру щитовидной железы. Одним из таких перспективных объектов считается лапчатка белая (Potentilla alba L., семейство Розоцветные - Rosacea), которая является эффективным регулятором уровня гормонов щитовидной железы и применяется в комплексном лечении указанной патологии эндокринной системы. Цель исследования - оценить общетоксическое действие лапчатки белой экстракта сухого в условиях хронического опыта для определения возможности разработки на его основе новых лекарственных средств, рекомендуемых при лечении заболеваний щитовидной железы. Материал и методы. Хронический эксперимент проведен на самцах и самках крыс Wistar. Исследуемый экстракт вводили внутрижелудочно в течение 90 дней в дозах 25, 125 и 375 мг/кг. Контрольным животным давали воду. Регистрировали интегральные показатели здоровья экспериментальных животных, брали пробы периферической крови для определения гематологических и биохимических показателей, изучали функциональное состояние сердечно-сосудистой системы (ЭКГ-исследование), центральной нервной системы по ориентировочным реакциям в тесте «открытое поле», выделительную функцию почек на фоне 3%-ной водной нагрузки. В конце эксперимента проводили патогистологические исследования внутренних органов крыс. Результаты. Длительное введение лапчатки белой экстракта сухого в желудок клинически здоровым крысам обоего пола в 2,5-кратных, 12,5-кратных и 37,5-кратных терапевтических дозах вызывало дозозависимую гипофункцию щитовидной железы и оказывало гиполипидемическое действие. Лапчатки белой экстракт сухой во всех испытанных дозах не проявлял токсического влияния на кровь, сердечно-сосудистую и нервную систему крыс. Длительное введение лапчатки белой экстракта сухого в максимальной испытанной дозе (375 мг/кг) приводило к умеренному повреждающему действию на печень и почки крыс обоего пола, а также семенники. Установлена пороговая доза - 25 мг/кг. Выводы. Результаты исследования послужили основанием для создания на основе изученного экстракта новых тиреотропных лекарственных средств системного действия (капсулы 0,050 г, таблетки 0,150 г) и рекомендации их для дальнейшего изучения.

Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2022;25(4):40-47
pages 40-47 views

Желчегонная активность фракций, выделенных из Calendula officinalis L

Николаев С.М., Бадмаев Н.С., Самбуева З.Г., Оленников Д.Н., Кащенко Н.И.

Аннотация

Актуальность. Лекарственные средства, из растительного сырья, обладающие желчегонными и гепатопротекторными свойствами, имеют широкий диапазон действия, высокую эффективность, доступность, взаимозаменяемость и возможность длительного применения без побочных проявлений, что обусловливает актуальность исследования растительного сырья. Цель исследования - определение желчегонной активности бутанольной, этилацетатной, гексановой и хлороформной фракций в дозах 50 мг/кг из соцветий календулы лекарственной, культивируемой в России. Материал и методы. Исследование проводили на наркотизированных белых крысах-самцах Wistar с массой 180-200 г при введении per os фракций в дозах 50 мг/кг. Желчь собирали трубочкой, вставленной в общий желчный проток через каждый час в течение четырех часов подряд. Результаты. Установлено, что бутанольная фракция повышает холеретическую реакцию на 27-47%, гексановая - на 20%, хлороформная - на 12%, этилацетатная - на 10%. Наиболее выраженным желчегонным свойством обладала бутанольная фракция, которая повышала холеретическую реакцию на 27-47% по сравнению с контролем, за ней следовали гексановая фракция (20%), хлороформная фракция (12%) и этилацетатная фракция (10%). Желчегонная реакция оставалась на высоком уровне в течение четырех часов после введения бутанольной и гексановой фракций. Стимулирующее влияние на синтез и выделение холатов наиболее выражено у этилацетатной фракции, за ней следуют бутанольная, хлороформная и гексановая фракции. Выводы. Установлено выраженное желчегонное действие бутанольной фракции цветков календулы лекарственной, обусловленное высоким содержанием флавоноидов (35-40%), которые являются основным классом соединений этой фракции.

Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2022;25(4):48-51
pages 48-51 views

Защита и биотехнология растений

Содержание фенольных соединений и эфирного масла в сырье мяты перечной (Mentha x piperita L.) при выращивании в условиях органической культуры

Маланкина Е.Л., Ткачёва Е.Н., Терехова В.И., Зуйкова Е.Ю.

Аннотация

Актуальность. Изучение качественных показателей основных лекарственных растений является актуальной задачей производства органического сырья. Мята перечная (Mentha x piperita L.) является одной из наиболее востребованных в мире лекарственных культур, которую используют для получения мятного листа, эфирного масла, для производства фиточаёв, где органическая продукция занимает свой отдельный сегмент. Фармакологически значимыми соединениями в мяте являются эфирное масло и фенольные соединения (в том числе флавоноиды и дубильные вещества). Цель работы - оценка содержания эфирного масла, суммы фенольных соединений, флавоноидов и дубильных веществ в листе пяти сортов мяты перечной, выращенных в условиях органической культуры. Материал и методы. В качестве объектов были выбраны сорта Митчамская, Апельсиновая, Кубанская 6, Тик-так, Мультимента. Урожайность определяли в фазе цветения. Содержание эфирного масла выявляли методом гидродистилляции по Клевенджеру, компонентный состав - методом газовой хроматографии, сумму фенольных соединений и дубильных веществ - по методу Фолина-Чокальтеу в водно-спиртовой вытяжке в пересчёте на галловую кислоту. Определение флавоноидов в водно-спиртовой вытяжке проводили алюмохлоридным методом в пересчёте на рутин. Результаты. Содержание эфирного масла в зависимости от сорта колебалось от 0,89 до 2,91% за 2 года при содержании ментола у ментольных сортов от 25,99 до 50,36 %. Сырьё мяты характеризуется высоким содержанием суммы фенольных соединений (от 9,33% у сорта Митчамская до 10,77% у сорта Мультимента). Содержание флавоноидов в зависимости от сорта колебалось от 2,25% у сорта Кубанская 6 до 4,22% у сорта Апельсиновая. Среднее содержание дубильных веществ за два года не превышало 1,5%. Выводы. Выращивание мяты перечной в органической культуре позволяет получить сырьё с высоким содержанием фенольных соединений (в том числе флавоноидов) и эфирного масла.

Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2022;25(4):52-60
pages 52-60 views