Выделение нуклеиновых кислот из клеточной биомассы микроводоросли Chlorella vulgaris и определение их количества фотоколориметрическим методом


Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Доступ платный или только для подписчиков

Аннотация

Нуклеиновые кислоты хлореллы участвуют в передаче закодированной генетической информации от поколения к поколению микроводоросли, обеспечивая сохранность и долговечность вида. Информация о количестве нуклеиновых кислот, присутствующих в хлорелле, позволит в дальнейшем создать препараты на основе ДНК и РНК в виде натриевых солей. Представлены результаты количественного анализа нуклеиновых кислот в зеленой микроводоросли Chlorella vulgaris (штамм ИФР № С-111). Щелочной и кислотный гидролиз РНК и ДНК из биомассы данного микроорганизма проводился по адаптированному и приспособленному биохимическому методу Шмидта-Тангаузера. Разработан и модернизирован эффективный метод фотоколори-метрического определения количества ДНК и РНК в гидролизате по специфическим цветным реакциям на углеводные мономеры дезоксирибозу и рибозу соответственно, с использованием 96-луночного планшетного фотометра-ридера, применяемого для иммуноферментного (ИФА) скрининга. Определен экспериментально оптимальный светофильтр на 620 нм (оранжевый) для регистрации окрашенных соединений дезоксирибозы и рибозы после цветных реакций специфическими растворами реагентов дифениламина и орцина. Построены соответствующие градуировочные зависимости с коэффициентом линейности не менее r = = 0,999 для количественного определения ДНК и РНК в объеме гидролизатов, что позволило определить количество нуклеиновых кислот в навеске биомассы Chlorella vulgaris.

Полный текст

Доступ закрыт

Об авторах

Б. О Роик

Курская государственная сельскохозяйственная академия им. И.И. Иванова

Email: bogdan.biochem.roik@mail.ru
аспирант, кафедра физиологии и химии им. проф. А.А. Сысоева

М. М Наумов

Курская государственная сельскохозяйственная академия им. И.И. Иванова

Email: naumovmm@rambler.ru
д.в.н., профессор, кафедра физиологии и химии им. проф. А.А. Сысоева

Список литературы

  1. Bock C., Krienitz L., Proschold T. Taxonomic reassessment of the genus Chlorella (Trebouxiophyceae) using molecular signatures (barcodes), including description of seven new species. Fottea. 2011; 11 (2):293-312.
  2. Darienko T., Gustavs L., Mudimu O., et al. Chloroidium, a common terrestrial coccoid green alga previously assigned to Chlorella (Trebouxiophyceae, Chlorophyta). Eur. J. Phycol. 2010; 45:79-95.
  3. Роик Б.О., Наумов Н.М., Лукьянов В.А., Наумов М.М. Биохимические показатели и аминокислотный состав кормовой добавки «Альгавет». Материалы Междунар. научно-практич. конф. «Интеграция науки и сельскохозяйственного производства». Ч.1. Курск: КГСХА, 2017. С. 294-296.
  4. Хлорелла - суперводоросль с полезными свойствами для здоровья. [Электронный ресурс]. Дата обращения: 21.09.2019. URL: http://fitfan.ru/nutrition/10258-khlorella-11-super-svojjstv.html.
  5. Huss V.A.R., Scharpf T.K., Kessler E. Deoxyribonucleic-acid reassociation in the taxonomy of the genus Chlorella. V. Chlorella vulgaris, C. luteoviridis, C. minutissima, and C. zofingiensis. Arch. Microbiol. 1989; 152:512-514.
  6. Федянина Л.Н., Беседнова Н.Н., Эпштейн Л.М. и др. Лекарственные препараты и биологически активные добавки к пище на основе нуклеиновых кислот различного происхождения. Тихоокеанский медицинский журнал. 2007; 4:9-12.
  7. Каплина Э.Н. Деринат - природный иммуномодулятор для детей и взрослых. М.: Научная книга, 2005.
  8. Пашук Л.К., Апрышко Г.Н., Трещалина Е.М. Препараты ДНК как потенциальные терапевтические средства. Химико-фармацевтический журнал. 1995; 6:61-64.
  9. Серебряная Н.Б., Новик А.А. ДНК как иммуностимулятор (обзор литературы). Медицинская иммунология. 2001; 3(1):27-34.
  10. Каплина Э.Н. Использование препарата Деринат в различных областях медицины. Материалы 1-й Всеросс. конф. «Использование препарата деринат в различных областях медицины». М., 2000. С. 47.
  11. Воронин С., Гуменюк А., Ханис А., Фёдоров Ю. Натрия нуклеинат - эффективный иммуномодулятор. Животноводство России. Секция Ветеринария. 2015; 7: 21.
  12. Нуклеиновые кислоты, влияние на иммунитет. [Электронный ресурс]. Дата обращения: 21.09.2019. - URL: http://www.blackpantera.ru/useful/health/dictionary/19413.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML

Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах