Выделение нуклеиновых кислот из клеточной биомассы микроводоросли Chlorella vulgaris и определение их количества фотоколориметрическим методом
- Авторы: Роик Б.О1, Наумов М.М1
-
Учреждения:
- Курская государственная сельскохозяйственная академия им. И.И. Иванова
- Выпуск: Том 23, № 1 (2020)
- Страницы: 36-41
- Раздел: Статьи
- URL: https://journals.eco-vector.com/1560-9596/article/view/112714
- DOI: https://doi.org/10.29296/25877313-2020-01-06
- ID: 112714
Цитировать
Полный текст
Открытый доступ
Доступ предоставлен
Доступ платный или только для подписчиков
Доступ предоставлен
Доступ платный или только для подписчиков
Аннотация
Нуклеиновые кислоты хлореллы участвуют в передаче закодированной генетической информации от поколения к поколению микроводоросли, обеспечивая сохранность и долговечность вида. Информация о количестве нуклеиновых кислот, присутствующих в хлорелле, позволит в дальнейшем создать препараты на основе ДНК и РНК в виде натриевых солей. Представлены результаты количественного анализа нуклеиновых кислот в зеленой микроводоросли Chlorella vulgaris (штамм ИФР № С-111). Щелочной и кислотный гидролиз РНК и ДНК из биомассы данного микроорганизма проводился по адаптированному и приспособленному биохимическому методу Шмидта-Тангаузера. Разработан и модернизирован эффективный метод фотоколори-метрического определения количества ДНК и РНК в гидролизате по специфическим цветным реакциям на углеводные мономеры дезоксирибозу и рибозу соответственно, с использованием 96-луночного планшетного фотометра-ридера, применяемого для иммуноферментного (ИФА) скрининга. Определен экспериментально оптимальный светофильтр на 620 нм (оранжевый) для регистрации окрашенных соединений дезоксирибозы и рибозы после цветных реакций специфическими растворами реагентов дифениламина и орцина. Построены соответствующие градуировочные зависимости с коэффициентом линейности не менее r = = 0,999 для количественного определения ДНК и РНК в объеме гидролизатов, что позволило определить количество нуклеиновых кислот в навеске биомассы Chlorella vulgaris.
Ключевые слова
Полный текст
Об авторах
Б. О Роик
Курская государственная сельскохозяйственная академия им. И.И. Иванова
Email: bogdan.biochem.roik@mail.ru
аспирант, кафедра физиологии и химии им. проф. А.А. Сысоева
М. М Наумов
Курская государственная сельскохозяйственная академия им. И.И. Иванова
Email: naumovmm@rambler.ru
д.в.н., профессор, кафедра физиологии и химии им. проф. А.А. Сысоева
Список литературы
- Bock C., Krienitz L., Proschold T. Taxonomic reassessment of the genus Chlorella (Trebouxiophyceae) using molecular signatures (barcodes), including description of seven new species. Fottea. 2011; 11 (2):293-312.
- Darienko T., Gustavs L., Mudimu O., et al. Chloroidium, a common terrestrial coccoid green alga previously assigned to Chlorella (Trebouxiophyceae, Chlorophyta). Eur. J. Phycol. 2010; 45:79-95.
- Роик Б.О., Наумов Н.М., Лукьянов В.А., Наумов М.М. Биохимические показатели и аминокислотный состав кормовой добавки «Альгавет». Материалы Междунар. научно-практич. конф. «Интеграция науки и сельскохозяйственного производства». Ч.1. Курск: КГСХА, 2017. С. 294-296.
- Хлорелла - суперводоросль с полезными свойствами для здоровья. [Электронный ресурс]. Дата обращения: 21.09.2019. URL: http://fitfan.ru/nutrition/10258-khlorella-11-super-svojjstv.html.
- Huss V.A.R., Scharpf T.K., Kessler E. Deoxyribonucleic-acid reassociation in the taxonomy of the genus Chlorella. V. Chlorella vulgaris, C. luteoviridis, C. minutissima, and C. zofingiensis. Arch. Microbiol. 1989; 152:512-514.
- Федянина Л.Н., Беседнова Н.Н., Эпштейн Л.М. и др. Лекарственные препараты и биологически активные добавки к пище на основе нуклеиновых кислот различного происхождения. Тихоокеанский медицинский журнал. 2007; 4:9-12.
- Каплина Э.Н. Деринат - природный иммуномодулятор для детей и взрослых. М.: Научная книга, 2005.
- Пашук Л.К., Апрышко Г.Н., Трещалина Е.М. Препараты ДНК как потенциальные терапевтические средства. Химико-фармацевтический журнал. 1995; 6:61-64.
- Серебряная Н.Б., Новик А.А. ДНК как иммуностимулятор (обзор литературы). Медицинская иммунология. 2001; 3(1):27-34.
- Каплина Э.Н. Использование препарата Деринат в различных областях медицины. Материалы 1-й Всеросс. конф. «Использование препарата деринат в различных областях медицины». М., 2000. С. 47.
- Воронин С., Гуменюк А., Ханис А., Фёдоров Ю. Натрия нуклеинат - эффективный иммуномодулятор. Животноводство России. Секция Ветеринария. 2015; 7: 21.
- Нуклеиновые кислоты, влияние на иммунитет. [Электронный ресурс]. Дата обращения: 21.09.2019. - URL: http://www.blackpantera.ru/useful/health/dictionary/19413.