Разработка методики количественного определения протеолитической активности стандартного образца панкреатина
- Авторы: Гегечкори В.И.1,2, Шатилина А.А.1,2, Щепочкина О.Ю.1,2, Раменская Г.В.1,2
-
Учреждения:
- Институт фармации им. А.П. Нелюбина
- ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет)
- Выпуск: Том 26, № 12 (2023)
- Страницы: 25-31
- Раздел: Фармацевтическая химия
- URL: https://journals.eco-vector.com/1560-9596/article/view/624880
- DOI: https://doi.org/10.29296/25877313-2023-12-03
- ID: 624880
Цитировать
Полный текст
Открытый доступ
Доступ предоставлен
Доступ платный или только для подписчиков
Аннотация
Актуальность. Панкреатин – полиферментный лекарственный препарат, обладающий липолитической, амилолитической и протеолитической активностью и назначаемый в качестве заместительной терапии экзокринной недостаточности поджелудочной железы. Современные требования к контролю качества лекарственных средств (ЛС) предполагают использование высокоспецифичных и высокочувствительных методов анализа с применением стандартных образцов (СО). Для аттестации СО панкреатина необходимо установить значение его каталитической активности. Анализ протеолитической активности панкреатина заключается в проведении реакции протеолиза и количественном определении продуктов реакции. Наиболее часто для этой цели применяются методы, в которых количественное содержание продуктов протеолиза определяют измерением оптической плотности раствора по тирозину. Однако значение протеолитической активности, установленное таким образом, носит условный характер, поскольку измеряемая оптическая плотность на самом деле соответствует смеси тирозина и триптофана. Абсолютным методом определения протеолитической активности считается анализ азота фрагментированных пептидов методом Кьельдаля.
Цель исследования – разработка и валидация методики количественного определения протеолитической активности СО панкреатина.
Материал и методы. Объектом исследования являлась фармацевтическая субстанция панкреатина. Протеолитическую активность в образцах субстанции панкреатина определяли после проведения ферментативной реакции путем количественного определения белкового азота методом Къельдаля.
Результаты. В результате проведенного испытания образцов субстанции панкреатина по разработанной методике количественного анализа протеолитической активности получены достоверные результаты, свидетельствующие о специфичности, линейности, правильности и прецизионности данной методики в рамках аналитической области 0,0000849–0,0005367 кат/г (от 80 до 120%).
Выводы. В рамках настоящего исследования предложена методика количественного определения протеолитической активности субстанции панкреатина и оценена приемлемость ее использования в контроле качества соответствующего СО.
Полный текст
Об авторах
В. И. Гегечкори
Институт фармации им. А.П. Нелюбина; ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет)
Автор, ответственный за переписку.
Email: vgegechkori@gmail.com
к.фарм.н., доцент кафедры фармацевтической и токсикологической химии им. А.П. Арзамасцева
Россия, Москва; МоскваА. А. Шатилина
Институт фармации им. А.П. Нелюбина; ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет)
Email: vgegechkori@gmail.com
аспирант, кафедра фармацевтической и токсикологической химии им. А.П. Арзамасцева
Россия, Москва; МоскваО. Ю. Щепочкина
Институт фармации им. А.П. Нелюбина; ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет)
Email: vgegechkori@gmail.com
к.фарм.н., доцент, доцент кафедры фармацевтической и токсикологической химии им. А.П. Арзамасцева
Россия, Москва; МоскваГ. В. Раменская
Институт фармации им. А.П. Нелюбина; ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет)
Email: vgegechkori@gmail.com
д.фарм.н., профессор, зав. кафедрой фармацевтической и токсикологической химии им. А.П. Арзамасцева
Россия, Москва; МоскваСписок литературы
- Машковский М.Д. Лекарственные средства. М.: Новая волна; 2020. 1216 с.
- Maev I.V., Kucheryavyy Yu.A., Gubergrits N.B., Bonnacker I., Shelest E.A., Janssen-van Solingen G.P., Domínguez-Muñoz J.E. Differences in In Vitro Properties of Pancreatin Prepa-rations for Pancreatic Exocrine Insufficiency as Marketed in Russia and CIS. Drugs in R&D. 2020; 20(4): 369–376. doi: 10.1007/s40268-020-00326-z.
- Щепочкина О.Ю., Гегечкори В.И., Прокофьева В.И. и др. Со-временные подходы к разработке стандартных образцов лекар-ственных средств. Химико-фармацевтический журнал. 2020; 54(7): 49–54. doi: 10.30906/0023-1134-2020-54-7-49-54.
- Фадейкина О.В., Волкова Р.А. Разработка порядка аттестации стандартных образцов биологических лекарственных средств. Химико-фармацевтический журнал. 2017; 51(8): 44–50. doi: 10.30906/0023-1134-2017-51-8-44-50.
- Волкова Р.А., Фадейкина О.В., Климов В.И. и др. Актуальные вопросы стандартных образцов в сфере обращения биологиче-ских лекарственных средств. БИОпрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2016; 16(4): 229–236.
- Государственная фармакопея Российской Федерации, издание XIV, том I, ОФС.1.1.0007.18 «Стандартные образцы». [Элек-тронное издание]. Режим доступа: https://femb.ru/re-cord/pharmacopea14. [Дата обращения 5 Марта, 2023].
- Narendra U.M., Ulhas K.P. Quantitative protease assay by substrate-agarose plate method. JMBFS. 2016; 6(2): 791–793. doi: 10.15414/jmbfs.2016.6.2.791-793.
- Anson M.L., Mirsky A.E. The estimation of trypsin with hemoglobin. J. Gen. Physiol. 1933; 17(2): 151–157. doi: 10.1085/jgp.17.2.151.
- Anson M.L. The estimation of pepsin, trypsin, papain, and cathepsin with hemoglobin. J. Gen. Physiol. 1938; 22(1): 79–89. doi: 10.1085/jgp.22.1.79.
- Серба Е.М., Оверченко М.Б., Игнатова Н.И. и др. Разработка национальных стандартов по методам определения активности ферментных препаратов. Пищевая промышленность. 2013; 7: 40–44.
- ГОСТ Р 53974-2010 Ферментные препараты для пищевой про-мышленности. Метод определения протеолитической активно-сти (с Изменением N 1) от 26 ноября 2010. [Электронное изда-ние]. Режим доступа: https://docs.cntd.ru/do-cument/1200084036 [Дата обращения 5 Марта, 2023].
- Государственная фармакопея Российской Федерации, издание XIV, том III, ФС.2.1.0195.18 «Трипсин». [Электронное изда-ние]. Режим доступа: https://femb.ru/re-cord/pharmacopea14. [Да-та обращения 5 Марта, 2023].
- Государственная фармакопея Российской Федерации XIV Из-дание, Том I, ОФС.1.1.0012.15. Валидация аналитических ме-тодик [Электронный издание]. Режим доступа: https://docs.rucml.ru/feml/pharma/v14/vol1/275/ [Дата обра-щения: 21 Марта, 2023].
- The United States Pharmacopeia 35 – National Formulary 30. Monograph: Pancreatin (e-book), 2011.
Дополнительные файлы
