Разработка и валидация методики анализа ритонавира и лопинавира в комбинированной лекарственной форме методом высокоэффективной жидкостной хроматографии

Введение. Качественный и количественный анализ фармацевтических субстанций с применением реверсивно-фазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии на базе отечественных аппаратных средств представляет собой важный этап утверждения лекарственных препаратов. Препарат «Калидавир» широко применяется в терапии вируса иммунодефицита человека. Разработанная методика предполагает значительные преимущества в сравнении с зарубежными методиками, подразумевающими использование импортного оборудования и стандартов из США, рекомендованных нормативной документацией.

Цель исследования – разработка и проведение процедур валидации для количественного анализа ритонавира и лопинавира
в комбинированном препарате «Калидавир».

Материал и методы. Оптимизированные параметры хроматографических операций включали в себя размер колонки
(75×2 мм), выбор полимерного сорбента ProntoSil 120-5C AQ, а также бинарную мобильную фазу, состоящую из 0,1% раствора трифторуксусной кислоты в водной среде и метаноле соответственно, с настройкой скорости потока 150 мкл/мин и температурой колонки 35 ^oC. Применён изократический режим элюирования, обеспечивающий непрерывное поступление элюента и правильность аналитического вывода. Дополнительно установлен объём инжекции 2 мкл и проведено определение абсорбции на четырёх длинах волн в диапазоне от 200 до 240 нм.

Результаты. Времена удерживания ритонавира и лопинавира составили 7,2 и 11,9 мин соответственно. Линейность наблюдалась в диапазоне с 0,025 мг/мл для ритонавира и 0,1 мг/мл для лопинавира и доходила до 0,5 мг/мл для обоих веществ, с хорошим значением коэффициента корреляции (более 0,999). Относительные ошибки по разработанным методикам количественного определения не превышали 0,85% для лопинавира и 0,96% для ритонавира.

Выводы. Разработаны и утверждены методики качественного и количественного определения лопинавира и ритонавира в комбинированной таблетированной лекарственной форме «Калидавир» методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием отечественного оборудования, которые позволили получить достаточно надёжные и воспроизводимые результаты.