Том 26, № 11 (2023)

Актуальность. Целевыми продуктами при комплексной переработке лекарственного растительного сырья могут быть как высокоактивные фармацевтические субстанции, так и вспомогательные вещества. Например, нафтохиноны используются как противомикробные, противогрибковые средства, а полисахариды – как наполнители, загустители, сорбенты. Сырьевыми источниками последних служат плоды, корнеплоды, отходы деревообрабатывающей промышленности. Разработка малоотходных технологий переработки лекарственного растительного сырья является актуальным направлением исследований.

Цель работы – на основании фитохимического исследования околоплодника ореха чёрного обосновать возможность его комплексной переработки с получением биологически активных и вспомогательных субстанций по малоотходной технологии.

Материал и методы. Объект исследования – околоплодники ореха чёрного (Juglans nigra L.) сем. ореховые (Juglandaceae), собранные в октябре 2021 года в г. Пятигорске на территории парка, высушенные и измельченные в порошок. Нафтохиноны обнаруживали методом тонкослойной хроматографии. Содержание суммы нафтохинонов в пересчёте на юглон определяли методом спектрофотометрии, суммы экстрактивных веществ, выделяемых хлороформом, полисахаридов – гравиметрии, средней молярной массы водорастворимых полисахаридов – вискозиметрии, поверхностную активность водорастворимых полисахаридов – сталагмометрически, коэффициент распределения полисахаридов в системе диэтиловый эфир – вода – кондуктометрии.

Результаты. Фитохимически обоснована возможность получения в одном технологическом процессе двух продуктов: 1) активной фармацевтической субстанции (выход 1,5%) для получения наружных форм (мазей, кремов), обладающих противогрибковой, противовирусной активностью, содержащей нафтохиноны (сумма юглона и его производных 12,41±0,3%); 2) вспомогательных веществ – полисахаридов (выход 8,8%), молекулы которых имеют нитевидную структуру, что объясняет их хорошую растворимость в воде, поверхностную активностью и свойства полиэлектролита.

Выводы. В результате фитохимического изучения околоплодника ореха чёрного (Juglans nigra L.) установлено, что в процессе комплексной переработки можно получить как субстанцию, содержащую полифенольные соединения, так и полисахариды, пригодные в качестве вспомогательных веществ.

Актуальность. Природные минеральные глины широко используются не только в технике, но и в медицине, косметологии, пищевой промышленности, благодаря своим уникальным свойствам. Высокая степень дисперсности, сорбционно-адгезивные свойства глинистых материалов, а также богатый минеральный состав определяют также их лечебное действие.

В зависимости от области и цели использования, глины подвергаются термической обработке, которая может привести к изменению их свойств.

Цель работы - изучение влияния различных режимов термообработки на сорбционные свойства глины для дальнейшего использования ее в фармацевтической практике.

Материал и методы. Объект исследования – глина кимериджская голубая порошкообразная Ундоровского месторождения Ульяновской области. Определение влажности глины проводили при помощи анализатора влажности AND MF–5 (Япония). Для полного удаления влаги из глины путем высокотемпературной обработки использовали электропечь SNOL 7.2/1100 (Литва). Влияние режима прокаливания глины на термическую устойчивость порошка глины и протекающих эндо- и экзотермических эффектов с потерей массы образцов исследовали на дериватографе Q-1500D (Венгрия).  Адсорбционную активность оценивали методом прямой спектрофотомерии на спектрофотометре СФ-56 «ЛОМО-Спектр» (Россия).

Результаты. Дифференциальный термогравиметрический анализ дериватограмм показал термическую устойчивость порошка глины в интервале температур от 20 °С до 900 °С с различными вариациями эндо- и экзотермических эффектов. На основании этих данных выбраны режимы термообработки и время экспозиции образцов. Эксперимент показал статистически значимое снижение асдсорбционной активности при увеличении температуры при различных вариациях времени экспозиции.

Выводы. Для сохранения адсорбционных свойств Ундоровской голубой глины при удалении влаги из нее нерационально применять высокотемпературную обработку. Наиболее оптимальными параметрами сушки глины являются: температура 80 °С, время экспозиции - 240 мин.

Актуальность. Окислительный стресс представляет собой дисбаланс между выработкой активных форм кислорода и способностью эндогенной антиоксидантной системой, а также является частью патогенеза ряда заболеваний. Антиоксиданты входят в комплексное лечение многих патологических состояний, поэтому поиск соединений с антиоксидантным действием является актуальным.

Цель исследования ‒ изучение антиоксидантной активности 2-арил-7,7-диметил-5-оксо-5,6,7,8-тетрагидрохинолин-4-кар-боновых кислот на модели окислительного стресса, индуцируемого пероксидом водорода на культуре клеток Escherichia coli, штамм «Эколюм».

Материал и методы. 2-Арил-7,7-диметил-5-оксо-5,6,7,8-тетрагидрохинолин-4-карбоновые кислоты получены в результате взаимодействия 4-ароил-2,4-диоксобутановых кислот с 3-амино-5,5-диметилциклогекс-2-еноном. Оценку антиоксидантной активности синтезированных соединений проводили косвенным методом изменения флуоресценции культуры клеток E. coli, штамм «Эколюм», с использованием модели окислительного стресса, индуцируемого пероксидом водорода.

Результаты. Среди 2-арил-7,7-диметил-5-оксо-5,6,7,8-тетрагидрохинолин-4-карбоновых кислот обнаружены соединения, обладающие антиоксидантной активностью, превышающей эталон сравнения – тролокс.

Выводы. Исследование антиоксидантной активности 9 соединений ряда 2-арил-7,7-диметил-5-оксо-5,6,7,8-тетрагидрохинолин-4-карбоновых кислот с использованием культуры клеток E. coli в качестве биосенсора.

Актуальность. Малые молекулы растительного происхождения в настоящее время рассматриваются как привлекательная альтернатива кормовым антибиотикам при разведении сельскохозяйственных животных и птицы. Ранее введение в схемы кормления цыплят-бройлеров флавоноида кверцетина, фенольного альдегида ванилина и лактона о-оксикоричной кислоты умбиллиферона (7-гидроксикумарина) позволило модулировать их кишечный микробиом, подавить системное воспаление и повысить продуктивность, интегрально оцененную индексом EPEF.

Цель исследования – оценить присутствие кверцетина, ванилина и умбиллиферона в пост-забойной готовой продукции (мышцах и печени) цыплят-бройлеров, получавших названные малые молекулы в качестве добавок к основному рациону кормления.

Материал и методы. Методика определения свободных и связанных (после гидролиза с использованием глюкуронидазы/арилсульфатазы) кверцетина, ванилина и умбиллиферона включала в себя жидкостную экстракцию ацетонитрилом с добавлением муравьиной кислоты, дальнейшее упаривание органического экстракта, перерастворение в деионизованной воде и очистку на картриджах с HLB-сорбентом. Полученные образцы использовали для ВЭЖХ-МС анализа с помощью хромато-масс-спектрометра LCMS-8050 (Shimadzu Corporation, Япония) с установленным программным обеспечением LabSolutions.

Результаты. Анализ биологических образцов от цыплят-бройлеров, выкармливаемых с добавлением кверцетина, не показал присутствия названного соединения в обнаруживаемом диапазоне концентраций, что может оцениваться как результат полного эффективного метаболизма кверцетина с участием кишечной микрофлоры и систем инактивации ксенобиотиков птицы, исключающего накопление кверцетина и продуктов его глюкуронидирования в готовой продукции.

Анализ ванилина показал наличие данного соединения во всех исследуемых пробах, независимо от присутствия или отсутствия ванилина в схемах кормления. Полученный результат не может быть однозначно интерпретирован и предположительно определяется наличием ванилина или химически сходных с ним перекрестно-реагирующих субстанций в ингредиентах, входящих в основной рацион кормления.

Умбиллиферон с концентрациями 17 нг/г (свободный) и 125 нг/г (сумма свободного и связанного) обнаружен в одиночном образце печени цыпленка-бройлера, схема кормления которого предусматривала использование данного соединения в максимальной дозировке (3,0 мг на 1 кг корма).

Выводы. Полученные данные свидетельствуют о низкой вероятности накопления кверцетина, ванилина, умбиллиферона и продуктов их глюкуронидирования в мышцах и печени цыплят-бройлеров. Результат проведенного исследования свидетельствует о безопасности кормового использования названных малых молекул растительного происхождения, исключающей их дальнейшую миграцию по пищевым цепям.

Актуальность. МТТ-тест является одним из наиболее распространённых методов определения цитотоксического действия экстрактов растений и их индивидуальных соединений. Несмотря на обширное применение этого метода, остаётся неясным, разрушают ли кристаллы МТТ-формазана плазматическую мембрану клеток при восстановлении МТТ в МТТ-формазан; происходит ли потеря формазанового продукта в случае разрушения клеток в процессе проведения исследования цитотоксического действия методом МТТ.

Цель исследования – изучение преобразования МТТ в МТТ-формазан в клетках HeLa методами микроскопии и спектрофотометрии, а также определение возможности потери формазанового продукта при исследовании цитотоксического действия природных и синтетических соединений методом МТТ.

Материал и методы. Клетки HeLa высевали на покровные стекла в бюксах, инкубировали с раствором МТТ (в конечных концентрациях 0,1 и 0,5 мг/мл), изучали при помощи световой микроскопии через 30, 60, 120 и 240 мин после добавления МТТ. При исследовании методом спектрофотометрии, в 96-луночный планшет вносили клетки (5×10⁴ к/лунку), добавляли раствор МТТ и инкубировали в течение 30, 60, 120 и 240 мин, регистрировали спектры поглощения МТТ и МТТ-формазана при помощи планшетного спектрофотометра.

Результаты. Исследование методом микроскопии показало две фазы в преобразовании МТТ клетками в МТТ-формазан – образование гранул и образование кристаллов МТТ-формазана. Максимальное соотношение кристаллов к гранулам МТТ-формазана, а также практически полное разрушение клеток наблюдали на 240-й мин инкубации методом световой микроскопии. Однако при исследовании методом спектрофотометрии, после разрушения клеток диметилсульфоксидом, значения оптической плотности раствора МТТ-формазана через 120 мин инкубации и через 240 мин инкубации были практически одинаковыми. Следовательно, преобразование МТТ-формазана из гранул в кристаллы не влияет на результаты определения оптической плотности, несмотря на разрушение клеток. Культуральная среда без клеток не восстанавливает МТТ в МТТ-формазан. В супернатанте от клеток без их разрушения также не наблюдалось значительного количества МТТ-формазана.

Выводы. Кристаллы МТТ-формазана не растворяются в культуральной среде и растворяются в диметилсульфоксиде. В связи с этим разрушение клеток не приводит к потере формазанового продукта при восстановлении МТТ в формазан и не влияет на результаты определения цитотоксического действия.

Актуальность. Хорошо известно о роли дефицита фактора роста нервов в патогенезе болезни Альцгеймера. Применение полноразмерного нейротрофина в клинике ограничено его низкой биодоступностью и риском развития побочных эффектов. В НИИ фармакологии имени В.В. Закусова создан димерный дипептидный миметик 4-й петли NGF соединение ГК-2 (бис-(N-моносукцинил-L-глутамил-L-лизина)), селективно активирующий специфические TrkA рецепторы и обладающий нейропротекторными и нейрорегенеративными свойствами. При этом ГК-2 лишен основных побочных эффектов NGF – не вызывает гиперальгезию и потерю веса.

Цель исследования – изучение влияния ГК-2 на память крыс в условиях скополаминовой модели болезни Альцгеймера.

Материал и методы. Болезнь Альцгеймера моделировали введением крысам скополамина, внутрибрюшинно в дозе 2 мг/кг в течение 32 дней. Параллельно со скополамином животным вводили внутрибрюшинно ГК-2 в дозах 0,5 и 1 мг/кг. После окончания введения соединений проводили тест распознавания нового объекта для регистрации краткосрочной и долговременной памяти.

Результаты. У крыс, получавших скополамин, выявлено статистически значимое ухудшение долговременной памяти. Дипептид ГК-2 в дозе 1 мг/кг полностью противодействовал развитию этого нарушения.

Вывод. Дипептидный миметик фактора роста нервов ГК-2 перспективен для дальнейшего изучения в качестве потенциального лекарственного средства для лечения болезни Альцгеймера.

Болезнь Альцгеймера (БА) является наиболее распространенной формой деменции, которая поражает преимущественно пожилых людей и чаще всего начинается с едва заметного ухудшения памяти с последующим прогрессирующим нарушением поведенческих и когнитивных функций. Несмотря на то, что основными патологическими признаками БА считаются внеклеточные отложения бета-амилоида в виде амилоидных бляшек и внутриклеточное накопление гиперфосфорилированного тау-белка в виде нейрофибриллярных клубков, в последнее время пристальное внимание уделяется и другим важнейшим процессам на клеточном и молекулярном уровнях, сопровождающим развитие заболевания. В современных исследованиях нейродегенеративных заболеваний все больший интерес вызывает роль митохондрий. Гипотеза митохондриального каскада предполагает, что дисфункция митохондрий играет ключевую роль в прогрессировании нейродегенеративных процессов. Недавние исследования показывают, что клетки имеют способность обмениваться митохондриями между собой. Этот процесс, известный как горизонтальный перенос митохондрий, позволяет клеткам обмениваться как здоровыми, так и поврежденными или дисфункциональными митохондриями, перемещая их из одной клетки в другую для дальнейшего восстановления или деградации, что в целом поднимает вопрос о возможности использования в рамках терапии нейродегенеративных заболеваний митохондриальной трансплантации.

Рассмотрены два аспекта: горизонтальный перенос митохондрий и митохондриальная трансплантация. Горизонтальный перенос митохондрий открывает новые горизонты в понимании клеточной коммуникации и взаимодействиях. Способы горизонтального переноса митохондрий представлены и описаны в деталях. Кроме того, показана актуальность и новаторский характер митохондриальной трансплантации, процедуры, при которой здоровые митохондрии передаются в клетки или органы с дисфункциональными митохондриями. Обсуждены различные методы митохондриальной трансплантации и их потенциальное применение в медицине. Представленная информация о новых исследованиях и перспективах в области митохондриальной биологии и терапии расширяет понимание функции и роли митохондрий в живых организмах.