Иммуногистохимическое обоснование возможности использования электрохимического метода с применением нанотехнологических биосенсоров для оценки активности щелочной фосфатазы в ткани колоректальной карциномы
- Авторы: Белкин А.Н.1, Фрейнд Г.Г.1, Кочетов А.Г.2
-
Учреждения:
- ФГБОУ ВО «Пермский государственный медицинский университет им. акад. Е.А. Вагнера» Минздрава РФ
- АНО ДПО «Институт лабораторной медицины»
- Выпуск: Том 22, № 3 (2024)
- Страницы: 34-39
- Раздел: Обзоры
- URL: https://journals.eco-vector.com/1728-2918/article/view/633667
- DOI: https://doi.org/10.29296/24999490-2024-03-05
- ID: 633667
Цитировать
Полный текст
Открытый доступ
Доступ предоставлен
Доступ платный или только для подписчиков
Аннотация
Введение. Щелочная фосфатаза (ЩФ) – фермент из класса гидролаз, широко представленный в тканях и органах человека. Кишечная ЩФ – одна из изоформ фермента, которая экспрессируется в слизистой оболочке на всем протяжении кишечника и является маркером дифференцировки кишечного эпителия. Известно, что продукты химической реакции между кишечной ЩФ и специфическим субстратом – 1-нафтилфосфатом обладают электрохимической активностью. Это позволяет оценить активность фермента в биологических тканях с помощью электрохимического метода с применением нанотехнологических биосенсоров.
Цель исследования: оценить диагностическую значимость электрохимического метода оценки активности ЩФ путем сопоставления с результатами гистологического и иммуногистохимического (ИГХ) исследований при колоректальной карциноме (КРК).
Материал и методы. Проведено параллельное электрохимическое и морфологическое (гистологическое и ИГХ с антителами к кишечной ЩФ) исследование материала КРК и слизистой оболочки толстой кишки вне опухоли 78 пациентов.
Результаты. У 70 пациентов сила тока, полученная при электрохимическом исследовании биоптатов опухолей, была значительно ниже (49,2 нА (95% ДИ 41,3–88,9), чем в биоптатах слизистой оболочки кишки вне опухоли (119,7нА (95% ДИ 96,8–167,1), p<0,05). Гистологически ткань опухоли была представлена аденокарциномой различной степени дифференцировки. При ИГХ исследовании установлено, что экспрессия кишечной ЩФ отсутствовала в клетках карциномы, в то время как в эпителии слизистой оболочки толстой кишки вне новообразования отмечалась выраженная диффузная мембранная экспрессия фермента. У 8 пациентов отсутствовала ассоциация результатов электрохимического и морфологического исследований ввиду присутствия в материале тканей, не являющихся опухолью. При ИГХ исследовании было выявлено, что кишечная ЩФ может экспрессироваться в иммунных клетках и нейронах подслизистых нервных сплетений.
Заключение. Сопоставление результатов электрохимического, гистологического и ИГХ исследований свидетельствует о том, что электрохимический метод обладает высокой диагностической ценностью и может применяться при проведении скрининга КРК.
Полный текст
Об авторах
Антон Николаевич Белкин
ФГБОУ ВО «Пермский государственный медицинский университет им. акад. Е.А. Вагнера» Минздрава РФ
Автор, ответственный за переписку.
Email: belkinanton87@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-8646-0483
старший преподаватель кафедры патологической анатомии с секционным курсом
Россия, 614000, Пермь, ул. Петропавловская, 26Генриетта Герхардовна Фрейнд
ФГБОУ ВО «Пермский государственный медицинский университет им. акад. Е.А. Вагнера» Минздрава РФ
Email: gfreynd@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-2861-4878
заведующая кафедрой патологической анатомии с секционным курсом, доктор медицинских наук, профессор
Россия, 614000, Пермь, ул. Петропавловская, 26Анатолий Глебович Кочетов
АНО ДПО «Институт лабораторной медицины»
Email: kochetov.lab@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0003-3632-291X
ректор Института, профессор
Россия, 117042, Москва, Ленинградский проспект, 80Г, офис 911АСписок литературы
- Rawla P., Sunkara T., Barsouk A. Epidemiology of colorectal cancer: incidence, mortality, survival, and risk factors. Prz Gastroenterol. 2019; 14 (2): 89–103. doi: 10.5114/pg.2018.81072
- National Cancer Institute. Surveillance, epidemiology, and end results program (SEER). http://seer.cancer.gov
- Muginova S.V., Zhavoronkova A.M., Polyakov A.E., Shekhovtsova T.N. Application of alkaline phosphatases from different sources in pharmaceutical and clinical analysis for the determination of their cofactors; zinc and magnesium ions. Anal Sci. 2007; 23: 357–63. doi: 10.2116/analsci.23.357
- Metwalli O.M., Mourand F.E. Studies on organ-specific alkaline phosphatases in relation to their diagnostic value. Z Ernahrung Swiss. 1980; 19: 154–8. doi: 10.1007/BF02018779
- Molnár К., Vannay А., Szebeni В., Fanni Bánki N., Sziksz E., Cseh Á., Győrffy H., László Lakatos P., Papp M., Arató A., Veres G. Intestinal alkaline phosphatase in the colonic mucosa of children with inflammatory bowel disease World J. Gastroenterol. 2012; 18: 3254–9. doi: 10.3748/wjg.v18.i25.3254
- Narisawa S., Huang L., Iwasaki A., Hasegawa H., Alpers D.H., Millán J.L. Accelerated fat absorption in intestinal alkaline phosphatase knockout mice. Mol. Cell. Biol. 2003; 23: 7525–30. doi: 10.1128/MCB.23.21.7525-7530.2003
- Tuin A., Poelstra K., de Jager-Krikken A., Bok L., Raaben W., Velders M. P., Dijkstra G. Role of alkaline phosphatase in colitis in man and rats. Gut. 2009; 58 (3): 379–87. doi: 10.1136/gut.2007.128868
- Akiba Y., Mizumori M., Guth P.H., Engel E., Kaunitz J.D. Duodenal brush border intestinal alkaline phosphatase activity affects bicarbonate secretion in rats. Am J Physiol Gastrointest Liver Physiol. 2007; 293 (6): 1223–33. doi: 10.1152/ajpgi.00313.2007
- Estaki M., DeCoffe D., Gibson D.L. Interplay between intestinal alkaline phosphatase, diet, gut microbes and immunity. World J. Gastroenterol. 2014; 20 (42): 15650–6. doi: 10.3748/wjg.v20.i42.15650
- Chen K.T., Malo M.S., Moss A.K., Zeller S., Johnson P., Ebrahimi F., Mostafa G., Alam S.N., Ramasamy S., Warren H.S., Hohmann E.L., Hodin R.A. Identification of specific targets for the gut mucosal defense factor intestinal alkaline phosphatase. Am. J. Physiol Gastrointest Liver Physiol. 2010; 299 (2): 467–75. doi: 10.1152/ajpgi.00364.2009
- Moss D.W. Alkaline phosphatase isoenzymes. Clin Chem. 1982; 28 (10): 2007–16.
- Wilkers J.M., Gamer A., Peters T.J. Studies on the localization and properties of rat duodenal HCO3-ATPase with special relation to alkaline phosphatase. Biochim Biophys Acta. 1987; 924 (1): 159–66. doi: 10.1016/0304-4165(87)90083-3
- Singh S.B., Lin H.C. Role of Intestinal alkaline phosphatase in innate immunity. Biomolecules. 2021; 11 (12): 1784. doi: 10.3390/biom11121784
- Hinnebusch B.F., Siddique A., Henderson J.W., Malo M.S., Zhang W., Athaide C.P., Abedrapo M.A., Chen X., Yang W.V., Hodin R.A. Enterocyte differentiation marker intestinal alkaline phosphatase is a target gene of the gut-enriched Kruppel-like factor. Am. J. Physiol Gastrointest Liver Physiol. 2004; 286 (1): 23–30. doi: 10.1152/ajpgi.00203.2003
- Barnard J.A., Warwick G. Butyrate rapidly induces growth inhibition and differentiation in HT-29 cells. Cell Growth Differ. 1993; 4 (6): 495–501.
- Kabat E. A., Furth J. A histochemical study of distribution of alkaline phosphatase in various normal and neoplastic tissues. Am. J. Pathol. 1941; 17 (3): 303–18.
- Li M., Jiang F., Xue L., Peng C., Shi Z., Zhang Z., Li J., Pan Y., Wang X., Feng C., Qiao D., Chen Z., Luo Q., Chen X. Recent Progress in Biosensors for Detection of Tumor Biomarkers. Molecules. 2022; 27 (21): 7327. doi: 10.3390/molecules27217327
- Верник С., Белкин А.Н., Фрейнд Г.Г., Кацнельсон М.Д., Шахам-Диаманд Й., Лицын С.Н., Четвертных В.А. Морфологическое обоснование возможности использования электрохимических биосенсоров в диагностике колоректального рака. Пермский медицинский журнал. 2012; 5: 5–7. [Vernik S., Belkin A.N., Freynd G.G., Katsnelson M.D., Shaham-Diamand Y., Litsyn S.N., Chetvertnykh V.A. Morphological substantiation of the possibility of using electrochemical biosensors in the diagnosis of colorectal cancer. Perm Medical Journal. 2012; 5: 5–7 (in Russian)].
- Шелудько В.С. Девяткова Г.И. Теоретические основы медицинской статистики (статистические методы обработки и анализа материалов научно-исследовательских работ): методические рекомендации, 3-е изд., исправленное и дополненное. Пермь: ФГБОУ ВО «ПГМУ имени академика Е.А. Вагнера» Минздрава России; 2016; 80. [Sheludko V.S. Devyatkova G.I. Theoretical foundations of medical statistics (statistical methods of processing and analysis of research materials): methodological recommendations, 3rd ed., corrected and expanded. Perm: Federal State Budgetary Educational Institution of Higher Education “Perm State Medical University named after Academician E.A. Wagner» of the Russian Ministry of Health; 2016; 80 (in Russian)].
- Ланг Т.А., Сесик М. Описание статистики в медицине. Руководство для авторов, редакторов и рецензентов. М.: Практическая медицина, 2011; 480. [Lang T.A., Sesik M. Description of statistics in medicine. A guide for authors, editors and reviewers. M.: Practical Medicine, 2011; 480 (in Russian)].
- Song Z.M., Brookes S.J., Costa M. Characterization of alkaline phosphatase-reactive neurons in the guinea-pig small intestine. Neuroscience. 1994; 63 (40): 1153–67. doi: 10.1016/0306-4522(94)90580-0
- Stewart C. Leukocyte alkaline phosphatase in myeloid maturation. Pathol. 1974; 6 (3): 287–93. doi: 10.3109/00313027409068999
- Kumar V., Abbas A., Aster J. Robbins basic pathology 9th edition. Saunders, 2012; 928.
Дополнительные файлы
