МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ДИНАМИКИ РЕГЕНЕРАЦИИ РОГОВИЦЫ ПРИ ЛЕЧЕНИИ ИНФИЦИРОВАННОЙ ТРАВМЫ РАЗЛИЧНЫМИ МЕТОДАМИ
- Авторы: Ярмамедов Д.М.1, Затолокина М.А1, Липатов В.А1, Медведева М.В1, Бежин А.И1
-
Учреждения:
- ФГБОУ ВО «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации
- Выпуск: Том 15, № 4 (2018)
- Страницы: 73-76
- Раздел: Статьи
- URL: https://journals.eco-vector.com/1994-9480/article/view/119317
- DOI: https://doi.org/10.19163/1994-9480-2018-4(68)-73-76
- ID: 119317
Цитировать
Полный текст
Аннотация
Ключевые слова
Полный текст
Ophthalmology, histology, cornea trauma, cornea regeneration, antibacterial therapy. В настоящее время большое количество травм роговицы происходит в бытовых условиях, вследствие различных факторов [1, 4]. Эрозии роговицы склонны к бактериальному обсеменению, что при отсутствии соответствующего лечения грозит образованием язв роговицы, бельм, перфораций роговицы и др. [5]. Современная антибактериальная терапия должна не только способствовать наиболее быстрой регенерации роговицы, препятствовать развитию осложнений, но и выпускаться в лекарственной форме, удобной для применения среди различных возрастных групп пациентов [3]. Одним из перспективных способов лечения инфицированных травматических поражений роговицы является использование антибактериальных полимерных мембран с иммуномодулирующим эффектом [2]. ЦЕЛЬ РАБОТЫ В сравнительном аспекте изучить темпы регенерации роговицы после инфицированного травмирования с использованием различных способов лечения. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ Исследование проводилось на 90 половозрелых кроликах породы шиншилла, из которых были сформированы три экспериментальные группы, в которые входили самцы весом 3000-3500 г. по 30 животных (30 пар глаз 60 глаз) в каждой группе. В контрольной группе лечение не проводилось, в группе сравнения - стандартная терапия, которая состоит в инсталлировании левофлоксацина 0,5%-го 4 раза в сутки, в экспериментальной группе лечение проводилось с использованием антибактериальных полимерных мембран с иммуномодулирующим эффектом на основе Натрий карбоксиме-тил-целлюлозы, в состав которых внесен левофлокса-цин и препарат «Полудан» (комплекс полиадениловой и полиуридиловой кислот 100 ЕД.). После двукратной инстилляции инокаина 0,4%-го у животных проводилась аппликация на роговицу диска фильтровальной бумаги диаметром 10 мм, пропитанного 20%-м раствором этилового спирта, на 15-20 с. Затем при помощи пипетки в область конъюнктивального мешка вносилась взвесь Выпуск 4 (68). 2018 73 ©SSTOpßS ©ôffiïff микроорганизмов в количестве 1 млн колоний Staphylococcus aureus АТСС 25923. Морфологическое исследование проводилось на следующих сроках: непосредственно после травмирования роговицы, через 1 ч, 1 сут., 2 сут., 3 сут., 5 сут., 7 сут. с момента введения животного в опыт. При морфологическом изучении проводилось измерение толщины роговицы и стромы роговицы. Исследована толщина многорядного наружного эпителия, эндотелия и десцеметовой мембраны. Подсчитано количество клеток и измерена площадь их ядер в базальном, шиповатом и плоском слоях наружного эпителия и эндотелии роговицы. Полученный биоматериал фиксировали в 10%-м нейтральном растворе формалина. По стандартной методике проводили срезы с различных участков переднего отдела каждого глазного яблока, которые окрашивали гематоксилин-эозином. Изучение микропрепаратов приводили с помощью светового лабораторного микроскопа Levenhuk D320L на увеличениях х 80 и х 320. Все исследования с лабораторными животными проводились в соответствии с конвенцией «О защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных целях», принятой Советом Европы (г. Страсбург, Франция 1986 г.), и директивой Совета 86/ 609/еес от 24.11.86. Статистическая обработка данных проводилась методом доверительных интервалов. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Уменьшение толщины роговицы было выявлено через 1 сут. после травмирования и инфицирования, при этом также снизилась толщина стромы. Значения в группах с лечением достоверно выше значений в контрольной группе (рис. 1). На вторые сутки выявлена динамика утолщения роговицы, схожая динамика выявлена в изменениях стромы. На третьи сутки эксперимента толщина роговицы в группе с лечением антибак териальными каплями составила - (305,29 ± 26,546) мкм, а в группе с лечением антибактериальными мембранами - (329,33 ± 28,637) мкм, что статистически достоверно отличается от контрольной группы без лечения, в которой показатель составил (285,71 ± 24,844) мкм. Таким образом, непосредственно после травмирования и инфицирования роговицы был выявлен отек, который сменился дистрофией роговицы на 1-е сутки наблюдения. Применение антибактериальных мембран способствует ускорению возращения толщины роговицы к показателям нормального глаза. Изменения в толщине роговицы вследствие травмирования и инфицирования раны происходят, главным образом, за счет изменения толщины стромы. Дальнейший процесс регенерации вне зависимости от способа лечения влияет на восстановление толщины стромы роговицы. Непосредственно после нанесения травмы и внесения 1 млрд Staphylococcus aureus выявлено увеличение толщины наружного эпителия на 14,45 % во всех экспериментальных группах по сравнению с нормальным эпителием. При исследовании через час было выявлено увеличение толщины наружного многослойного неороговевающего эпителия на 29,51 % во всех 3 группах. На 1-е сутки наблюдения было выявлено уменьшение толщины эпителия на 2,23 мкм в 1-й группе, на 1,95 мкм в группе с традиционным лечением и на 2,39 мкм в группе с лечением антибактериальными мембранами (рис. 2). Через 2-е суток после начала эксперимента сохраняется тенденция уменьшения толщины, так, в контрольной группе показатель уменьшился на 6,1 %, в группе с классическим лечением на 9,4 7%, а в группе с экспериментальным лечением на 11,83 %. На 3-и сутки наблюдения в контрольной группе толщина составила (24,38 ± 2,120) мкм, в группе с лечением антибактериальными каплями - (21,09 ± 1,834) мкм, а в группе с лечением антибактериальными мембранами была наиболее низкой - (20,37 ± 1,771) мкм. На 5-е сутки Рис. 1. Динамика изменения толщины роговицы при лечении инфицированной травмы роговицы с использованием различных способов лечения, мкм 74 Выпуск 4 (68). 2018 А Б Рис. 2. А - нормальное строение поверхностного эпителия роговицы кролика. Микрофото. Окраска гематоксилин-эозином. Ув. х 800. Хорошо визуализируются слои переднего эпителия: базальный, шиповатый и плоский, расположенные на базальной мембране. Строма роговицы образована соединительной тканью. Б - выраженная клеточная пролиферация в контрольной группе на 1-е сутки наблюдения. Микрофото. Окраска гематоксилин-эозином. Ув. х 800 наблюдения была зафиксирована нормализация параметра как в группе с экспериментальным лечением -(17,74 ± 1,542) мкм, так и в группе с традиционным лечением - (18,22 ± 1,584) мкм, в контрольной группе толщина наружного эпителия роговицы составила (21,87 ± 1,902) мкм. На 7-е сутки выявлена нормализация толщины наружного неороговевающего эпителия во всех экспериментальных группах. Было выявлено, что толщина эндотелия роговицы кролика в норме составляет (2,31 ± 0,200) мкм, при этом не выявлено статистически значимых отличий на всех сроках при различных способах лечения. Таким образом, эндотелий роговицы не подвергается воздействию при травматическом инфицированном поражении наружного эпителия и стромы роговицы. При исследовании толщины десцеметовой мембраны роговицы кролика было выявлено, что в глазах без какого-либо воздействия она составляет (2,19 ± 0,190) мкм, что достоверно не отличается от всех 3 экспериментальных групп. Было подсчитано количество клеток в базальном, шиповатом и плоском слоях наружного эпителия роговицы. Непосредственно после инфицированного травматического повреждения количество клеток в базальном, шиповатом, плоском слоях наружного эпителия роговицы во всех трех группах не имело статистически значимых отличий. Спустя 1 час наблюдения было выявлено увеличение количества клеток в базальном слое эпителия на 6,63 % в контрольной группе, аналогичная динамика была выявлена во 2-й и 3-й экспериментальных группах. Количество клеток в переходном слое поверхностного эпителия увеличилось на 9,07 % в контрольной группе. При этом количество клеток в плоском слое поверхностного эпителия осталось на прежнем уровне. Статистически значимых отличий выявлено не было. Через сутки от начала эксперимента количество клеток в базальном слое в поле зрения в контрольной группе составило 20,5 ± 1,225, в группе с лечением антибактериальными каплями - 20,53 ± 1,252, в группе с лечением антимикробными полимерными мембранами - 20,7 ± 1,264. В переходном слое также выявлено увеличение количества клеток. Наиболее выраженное увеличение наблюдалось в 3-й экспериментальной группе - 15 ± 0,587. Количество клеток в плоском слое наружного эпителия роговицы увечилось, показатель несколько выше, чем в других группах, был зафиксирован в группе с лечением антимикробными полимерными мембранами - 6,17 ± 0,950. На вторые сутки наблюдения также прослеживалась динамика увеличения количества клеток всех трех слоев поверхностного эпителия роговицы в 3 экспериментальных группах.На 5-е сутки наблюдения количество клеток во всех трех слоях нормализовалось в экспериментальной группе с лечением антимикробными мембранами, в остальных экспериментальных группах количество клеток было повышенным. На 7-е сутки эксперимента показателей нормы достигла экспериментальная группа с лечением по стандартной методике. При анализе площади ядер клеток эндотелия роговицы было выявлено, что статистически значимые отличия отсутствуют во всех 3 экспериментальных группах на всех сроках по сравнению с нормальным глазом. ЗАКЛЮЧЕНИЕ Использование антибактериальных полимерных мембран при применении их после инфицированной травмы роговицы позволяет добиться наиболее быстрого восстановления (на 5-е сутки) морфологических параметров роговицы до нормальных значений. При использовании Выпуск 4 (68). 2018 75 стандартной схемы антибактериальной терапии полное восстановление роговицы наступает на 7-е сутки. В экспериментальной группе без применения антибактериального лечения процесс склонен к самоограничению, но полная регенерация эпителия не наступает. ЛИТЕРАТУРАОб авторах
Дмитрий Муталифович Ярмамедов
ФГБОУ ВО «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Email: d-yarmamedov@yandex.ru
ассистент кафедры офтальмологии
М. А Затолокина
ФГБОУ ВО «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерациикафедра гистологии, эмбриологии, цитологии
В. А Липатов
ФГБОУ ВО «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации
М. В Медведева
ФГБОУ ВО «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерациикафедра офтальмологии
А. И Бежин
ФГБОУ ВО «Курский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерациикафедра оперативной хирургии и топографической анатомии
Список литературы
- Баранов В.И., Медведева М.В., Липатов В.А., Новикова А.А., Ярмамедов Д.М. Современные аспекты в лечении инфекционных заболеваний переднего отрезка глаза (обзор литературы) // Электронный научный журнал «Innova». - 2016. - № 2 (3). - С. 60-63.
- Фокин В.П., Солодкова Е.Г., Балалин С.В., Загребин В.Л. Насыщение роговицы рибофлавином при проведении кросслинкинга роговичного коллагена // Вестник Волгоградского государственного медицинского университета. - 2017. - № 1 (61). - С. 87-91.
- Chang V.S., Dhaliwal D.K., Raju L., Kowalski R.P Antibiotic resistance in the treatment of staphylococcus aureus keratitis: a 20-Year Review // Cornea. - 2015. -№ 34 (6). - P 698-703. doi: 10.1097/IC0.0000000000000431.
- Chen C.J., Huang Y.C. New epidemiology of Staphylococcus aureus infection in Asia // Clinical Microbiology and Infection. - 2014. - № 20 (7). - P. 605-623. doi: 10.1111/1469-0691.12705.
- Deguchi H., Kitazawa K., Kayukawa K. et al. The trend of resistance to antibiotics for ocular infection of Staphylococcus aureus, coagulase-negative staphylococci, and Corynebacterium compared with 10-years previous: A retrospective observational study // PLOS ONE. - 2018. -№ 13 (9). doi: 10.1371/journal.pone.0203705.
- Flaxman S.R., Bourne R.R.A., Resnikoff S. et al. Global causes of blindness and distance vision impairment 19902020: a systematic review and meta-analysis // The Lancet Global Health. - 2017. - № 5 (12). - P. 1221-1234. doi: 10.1016/S2214-109X(17)30393-5.
- Hiramatsu K., Ito T., Tsubakishita S. et al. Genomic Basis for Methicillin Resistance in Staphylococcus aureus // Infection & Chemotherapy. - 2013. - № 45 (2). - P. 117-36. doi: 10.3947/ic.2013.45.2.117.
- Vos T., Abajobir A.A., Abate K.H. et al. Global, regional, and national incidence, prevalence, and years lived with disability for 328 diseases and injuries for 195 countries, 1990-2016: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2016 // Lancet. - 2017. - № 390 (10100). -P. 1211-1259. doi: 10.1016/S0140-6736(17)32154-2.
Дополнительные файлы
![](/img/style/loading.gif)