VALUE OF ANNEXIN V IN PATIENTS WITH OBLITERATING ATHEROSCLEROSIS OF LOWER EXTREMITIES IN DIFFERENT TYPES OF SURGICAL INTERVENTIONS

全文:

Одной из нерешенных проблем ангиохирургии являются рестенотические окклюзии. Несмотря на успехи в диагностике и лечении окклюзирующих поражений аорты и магистральных артерий нижних конечностей, остается актуальным поиск маркеров особенностей течения раннего послеоперационного периода и прогнозирования стенотических окклюзий. В настоящее время в литературе активно исследуется участие программированной клеточной гибели в патогенезе послеоперационных осложнений [1, 4]. Большое внимание уделяется изучению биологической активности белков, относящихся к семейству аннексинов. По современным данным, аннексин V не выделяется из нормальных клеток. Доказано, что источником аннексина V являются апоптотические и разрушенные клетки, в том числе кардиомиоциты и эндотелиоциты [3, 5]. Имеющиеся в литературе данные свидетельствуют о значительном увеличении плазменной концентрации аннексина V при атеротромбозе, особенно при остром инфаркте миокарда [5, 6]. В работах Л. В. Васиной [1] показано повышение в крови больных острым коронарным синдромом, особенно с подъемом сегмента ST, аннексина V и антител к ан-нексину V. Автором была установлена прямая корреляция содержания аннексина V и уровня антител к аннекси-ну V с факторами, повреждающими эндотелий: антителами к окисленным липопротеинам низкой плотности и липопро-теином (а), что свидетельствует о возможной роли эндотелия как источника аннексина V. В связи с этим, выявление маркера апоптоза аннексина V у пациентов облитери-рующим атеросклерозом в предоперационном и послеоперационном периоде является актуальным. ЦЕЛЬ РАБОТЫ Изучение содержания аннексина V у пациентов об-литерирующим атеросклерозом артерий нижних конечностей до хирургического вмешательства, в раннем послеоперационном периоде при различных способах реконструкции, а также при развитии стенотических окклюзий. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ В исследование включены 60 пациентов, мужчин, средний возраст (59,7 ± 16,3) лет, страдающих облите-рирующим атеросклерозом артерий нижних конечностей, со II Б - III степенью хронической артериальной недостаточности нижних конечностей по классификации R. Fontaine-А. В. Покровского, находившихся на лечении в клинике хирургических болезней ФПО Курского государственного медицинского университета (Россия, г. Курск) на базе Областной клинической больницы г. Курска. По характеру выполненного хирургического вмешательства больные распределены на три подгруппы: аорто-бедренное шунтирование (n = 21), бедренно-подколенное шунтирование (n = 22) и рентге-нэдоваскулярная ангиопластика и стентирование подвздошных артерий (n = 17). Содержание аннексина V исследовано у 20 пациентов, включенных в исследование, с возникшими сте-нотическими окклюзиями сосудистых анастомозов: у 13 пациентов после проведения аорто-бедренной реконструкции и у 17 - после выполнения бедренно-подколенного шунтирования. Группа сопоставления была отобрана из 20 добровольцев, в возрасте (25,6 ± 0,6) лет, не предъявлявших жалоб при собеседовании и не имевших в анам- Выпуск 2 (50). 2014 69 ЩШгорСз [ЩсмеТКЩ незе каких-либо заболеваний и признанных практически здоровыми. При объективном, инструментальном обследовании, исследовании биохимических анализов крови у них не было выявлено отклонений от нормы. Аннексин V в плазме крови определяли иммуно-ферментным методом, используя тест-системы . Исследование аннексина V выполняли до операции, через 5 дней после хирургического вмешательства. В группе сопоставления анализ выполняли однократно. Кровь для исследования забирали натощак в утренние часы из локтевой вены после получения письменного информированного согласия каждого пациента. В группе исследования для диагностики местной концентрации аннексина V в пораженной конечности определяли содержание последнего в плазме крови, взятой из подкожной вены тыла стопы [7]. Статистический анализ результатов исследования производили с помощью компьютерной программы статистической обработки данных путем вычисления средних арифметических (М) и средних ошибок средних (m). Оценка достоверности различия средних значений производили с помощью параметрического f-критерия Стьюдента. Различия между группами считались статистически значимыми при уровне значимости р < 0,05. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Сравнительные анализы полученных данных о содержании аннексина V у больных облитерирующим атеросклерозом в предоперационном периоде и у здоровых людей представлены в табл.1. Из представленных в таблице данных видно, что у всех обследованных больных содержание аннексина V в сыворотке крови было существенно повышено (в 5,3 раза, р < 0,05) по сравнению с группой здоровых пациентов. Для изучения влияния варианта оперативного вмешательства на уровень аннексина V группы больных проанализированы по отдельности в зависимости от характера реконструктивной операции. Результаты исследования аннексина V при различных методах оперативного лечения представлены в табл. 2. Таблица 1 Уровень аннексина V у больных облитерирующим атеросклерозом нижних конечностей до операции и у здоровых людей в сопоставимой группе Показатель Больные облитерирующим атеросклерозом до операции (n = 60) Группа сопоставления (n = 20) Аннексин V, нг/мл 1,54 ± 0,37* 0,29 ± 0,02 *р < 0,05 относительно группы здоровых людей. Особенно высоким содержание аннексина V отмечалось в группе больных, которым выполнялось аортобедренное шунтирование, что может быть связано с распространенным характером поражения артериального русла. Повышение концентрации аннексина V в местном кровотоке до оперативного вмешательства до (1,62 ± 0,23) нг/мл, возможно, связано с разрушением бляшки или ее эрозией [9]. Установлены изменения активности аннексина V в крови после операции по сравнению с исходными данными. После выполнения бедренно-подколенного шунтирования достоверно значимые изменения отмечены как в системном, так и в местном кровотоке (р < 0,05). Содержание аннексина V превышало исходные величины в 1,79 раза в системном кровотоке (р < 0,05), статистически значимое повышение концентрации в 3,94 раза отмечено в оперированной конечности (р < 0,05). После проведения ангиопластики со стентированием послеоперационное значение концентрации аннексина V в системном кровотоке возрастало на 48,2 % (р > 0,05). В то же время концентрация аннексина V в подкожной вене тыла стопы пораженной конечности превышала исходные значения на 55,5 % и составила (1,26 ± 0,2) нг/мл (р < 0,05). Такое увеличение уровня аннексина V в послеоперационном перио- Таблица2 Результаты исследования аннексина V при различных методах оперативного лечения Показатель Аннексин V, нг/мл Аннексин V, нг/мл Вид оперативного вмешательства до операции после операции системный кровоток местный кровоток системный кровоток местный кровоток Бедренно-подколенное шунтирование (n = 22) 0,77 ± 0,12 0,69 ± 0,10 1,38 ± 0,12* 2,72 ± 0,66* Ангиопластика стентирование (n = 17) 0,86 ± 0,11 0,56 ± 0,13 1,66 ± 0,39 1,26 ± 0,20* Аорто-бедренное шунтирование (n = 21) 2,86 ± 0,97 1,62 ± 0,23 2,48 ± 0,34 2,15 ± 0,23 *р < 0,05 относительно до операционного уровня. 70 Выпуск 2 (50). 2014 де по всей видимости обусловлено синдромом реперфузии вследствие поступления активных форм кислорода, повреждающих клеточные мембраны [2, 8]. Похожая, однако, менее выраженная динамика наблюдалось и после проведения аорто-бедренного шунтирования, концентрация аннексина V сохранялась достаточно высокой в послеоперационном периоде в системном и местном кровотоке, составляя (2,48 ± 0,34) нг/мл и (2,15 ± 0,23) нг/мл соответственно (р > 0,05). По современным представлениям, ламинарный поток является одним из мощных эндогенных антиате-росклеротических факторов и защищает эндотелиальные клетки от апоптоза [11]. Заслуживает внимания тот факт, что увеличение напряжения сдвига может привести к ослаблению и потере контактов эндотелиальных клеток с базальной мембраной и инициировать программируемую гибель клеток [4, 10]. Вполне корректно предположить, что увеличение количества аннексина V в местном кровотоке после реконструктивных вмешательств связано с влиянием гемодинамических факторов на сосудистую стенку. У 20 пациентов (33,3 %) было отмечено возникновение стеноза сосудистых анастомозов. Осложненное течение послеоперационного периода у обследованных нами пациентов сопровождалось значительным увеличением содержания аннексина V в системном кровотоке. При этом его концентрация в местном кровотоке оставалась низкой. Так, при окклюзии бедренно-подколенного шунта составляла (6,05 ± 0,54) нг/мл в системном кровотоке и (0,58 ± 0,07) нг/мл в местном. При окклюзии дистального анастомоза аорто-бедренного шунта его значения составили (12,65 ± 5,42) нг/мл и (4,52 ± 1,55) нг/мл соответственно. Полагаем, что подобная динамика снижения аннексина V в местном кровотоке, по всей видимости, может быть обусловлена выраженным атеросклеротическим процессом, пролиферацией неоинтимы, приводящей к окклюзии зоны анастомоза и отсутствием эндотелиального слоя, утратившего способность выделять субстанции. Определение количественных изменений продукции аннексина V в системном и местном кровотоке может быть использовано в мониторинге при оперативном вмешательстве на аорте и магистральных артериях нижних конечностей для оценки темпов развития стенотических окклюзий. ЗАКЛЮЧЕНИЕ 1. У больных облитерирующим атеросклерозом артерий нижних конечностей наблюдается значитель ное изменение функционального состояния эндотелия, проявляющееся в повышении содержания аннексина V. 2. На фоне хирургической коррекции в ранние сроки после операции отмечается статистически значимое увеличение аннексина V в местном кровотоке пораженной конечности после выполнения бедренноподколенного шунтирования и ангиопластики со стентированием. 3. Нарастание концентраций аннексина V в сыворотке крови является неблагоприятным фактором, свидетельствующим о прогрессировании заболевания. Достоверное повышение аннексина V позволяет рекомендовать этот показатель в качестве дополнительных критериев для диагностики стенотической окклюзий. ЛИТЕРАТУРА

作者简介

V. Lazarenko

E. Bobrovskaya

Email: ea-bobrovskaya@yandex.ru

E. Putintseva

J. Bogdanova

参考

补充文件