VLIYaNIE FITOPREPARATOV NA GUMORAL'NYY IMMUNNYI OTVET

Full Text

Введение В настоящее время фитопрепараты, особенно экстракционные, занимают важное место в современном лекарственном арсенале. Они представляют собой комплекс биологически активных веществ, которые часто действуют несколько иначе, чем выделенные из смеси отдельные химически чистые вещества, и этим они принципиально отличаются от химико-фармацевтических препаратов. Лечебное действие фитопрепаратов обусловлено не каким-либо одним действующим веществом растений, а всем комплексом находящихся в них биологически активных веществ, а также макро- и микроэлементов, усиливающих, ослабляющих или видоизменяющих действие друг друга. Совокупность таких свойств, как активность этих веществ, представление в наиболее доступной и усвояемой форме, экологичность и невысокая стоимость дает основание называть фитопрепараты социальным медицинским продуктом. Высокая эффективность и малое количество побочных негативных эффектов нередко способствуют неоправданно широкому комплексному применению фитопрепаратов. Для обоснования рациональных рекомендаций по их сочетанному применению и во избежание вредных последствий полипрагмазии целесообразно проведение экспериментальных исследований эффектов средств растительного происхождения, в том числе, уже широко используемых в практике. Ранее нами было показано, что комплексное применение фитопрепаратов Метосепт Плюс и Витанорм Плюс активирует врожденный иммунитет, ускоряет восстановление дермы кожи и способствует раннему заживлению ран [1]. Целью настоящего исследования являлось изучение влияния комплексного и раздельного применения растительных препаратов метосепт плюс, витанорм плюс, максифам плюс и бактрум на гуморальный иммунный ответ в норме и при иммунодефицитном состоянии, вызванном дексаметазоном. Материалы и методы Животные. Исследования выполнены на самцах мышей линии СВА массой 18-20 г. Мышей содержали в стандартных условиях с контролируемыми режимами температуры (22o C) и освещения (в течение 12 ч), со свободным доступом к воде и пище. Препараты. В исследованиях использовали смесь препаратов Метосепт Плюс, Витанорм Плюс, Макси- фарм Плюс и Бактрум, которые исходно разрабатывались как противопаразитарные средства [2]. Состав Метосепт Плюс (регистрационное удостоверение 77.99.23.3.У.6252.6.05) и Витанорма Плюс (регистрационное удостоверение 77.99.23.3.У.6251.6.05К) был описан нами в опубликованных ранее работах [1, 3]. Препарат Максифам Плюс (регистрационное удостоверение № 77.99.23.3.У.2283.3.08) получен из водорослей Ламинарии Японики и разновидностей Спи- рулины, произрастающих в прибрежной зоне острова Сахалин. В их состав входят такие компоненты, как йод, бета-каротин, биотин, витамины А, Е, С, группы В, пантотеновая и фолиевая кислоты. При производстве максифама обработку сырья проводят в биофотореакторе, где сера замещается двухвалентными минералами: марганцем, цинком, селеном, хромом, переходящими в свои органические соединения, что усиливает антиоксидантные свойства препарата [2]. Препарат Бактрум (77.99.23.3.У.2284.3.08) содержит большое количество инулина представляющего собой пищевые волокна, получаемые из корня топинамбура сорта «Экстра», альгинат кальция, витамин Е. По химической структуре Бактрум представляет комбинацию полимеров фруктозы - фруктозо-олиго-сахаридов [2]. Схема эксперимента. Суточную дозу препаратов (по 1-ой капсуле или таблетке каждого) смешивали и рассчитывали терапевтическую дозу на 1 кг веса (0,7 мг/мышь). Терапевтическую, семикратно уменьшенную (0,1 мг/ мышь) и десятикратно увеличенную (7мг/мышь) дозы разводили в 0,1 мл дистиллированной воды и ежедневно вводили мышам пипеткой перорально в течение 14 суток. Животные контрольных групп препараты не получали. Животные подопытных групп получали смесь препаратов в дозах 0,1мг/мышь, 0,7 мг/мышь и 7 мг/мышь, либо раздельно Метосепт Плюс, витанорм Плюс, Максифам Плюс или Бактрум в дозе 0,7 мг/мышь. через 14 дней после приема препаратов внутрибрюшинно (в/б) всем животным вводили 5% суспензию эритроцитов барана (0,5 мл 0.9%-ного раствора NaCl, рН 7.2), используемых в качестве тимус-зависимого чужеродного антигена. одной из контрольных и подопытных групп животных на 4-ый день после иммунизации эритроцитами барана в/б вводили глюкокортикоид дексаметазон (2 мкг/мышь в 0,1 мл 0.9%-ного NaCl), создавая тем самым иммуно- дефицитное состояние. дексаметазон является классическим иммунодепрессантом. Его введение вызывает подавление антителообразования и пролиферации лимфоцитов, а также запуск каскада реакций, программирующих процессы апоптоза [4, 5]. На 5-ый день после иммунизации эритроцитами барана всех мышей забивали, извлекали селезенку и оценивали в ней количество антителообразующих клеток (Аок) к эритроцитам барана [6]. каждая группа была представлена 10 животными. статистическую обработку проводили с помощью непараметрического критерия вилкоксона. Результаты представлены в виде среднего + стандартная ошибка. Результаты и обсуждение Влияние смеси Метосепта Плюс, Витанорма Плюс, Максифама Плюс и Бактрума на количество антителообразующих клеток. оценка количества Аок в селезенке мышей на пике иммунного ответа к эритроцитам барана (5-ый день после иммунизации) показала, что комплексное применение этих препаратов оказывает супрес- сирующий эффект на гуморальный иммунный ответ во всех использованных дозах (рис. 1). При нормальном развитии иммунного ответа к эритроцитам барана под действием препаратов в дозах 0,1 мг/мышь и 0,7 мг/мышь количество Аок в иммунокомпетент- ном органе селезенке уменьшалось в 2 раза, а в дозе 7 мг/мышь их количество уменьшалось в 4 раза. в модели иммунодефицитного состояния, индуцированного введением мышам дексаметазона за день до оценки количества Аок (на 4-ый день после иммунизации эритроцитами барана), препараты вызывали еще большее подавление иммунного ответа (рис. 1). как видно из рисунка, количество Аок к эритроцитам барана в селезенке животных контрольной группы, не принимавших препараты, составляло в среднем 23000, а после введения дексаметазона их количество уменьшалось в 2 раза. После приема смеси препаратов количество Аок уменьшалось почти в 4 раза во всех использованных дозах по сравнению с контрольной группой животных, получавших только дексаметазон. Влияние раздельного применения Метосепта Плюс, Витанорма Плюс, Максифама Плюс и Бактрума на количество антителообразующих клеток. При нормальном развитии иммунного ответа к эритроцитам барана препараты Бактрум и Метосепт Плюс (0,7 мг/ мышь) оказывали супрессирующий эффект (рис. 2). После их приема количество Аок в селезенке уменьшалось на 20-30%, а под действием Витанорма Плюс их количество практически не менялось. В модели иммунодефицита, вызванного дексаме- тазоном, Витанорм Плюс и Бактрум подавляли антите- лообразование также на 20-30%, а Метасепт Плюс не оказывал супрессирующий эффект. Из смеси препаратов Максифам Плюс обладал стимулирующей активностью. После его приема в дозе 0, 7 мг/мышь количество Аок увеличивалось в 2-2,5 раза, как в норме, так и при иммунодефиците, соответственно (рис. 2). Согласно литературным данным, стимуляция гуморального иммунного ответа наблюдалась также после приема геля, полученного из бурых морских водорослей (Ламинария Ангустата) путем сложного низкотемпературного гидролиза [7]. Наряду с антителогенезом, гель из морских водорослей оказывает стимулирующее действие на фагоцитарную активность макрофагов и цито- токсическую активность естественных клеток-киллеров. Таким образом, несмотря на стимулирующую активность препарата максифам и слабую супрессиру- ющую активность бактрума, Метосепта Плюс и Витанорма Плюс при их раздельном применении, в смеси 30000 0.1 0.7 7.0 Контроль (без препаратов) Смесь препаратов, мг/мышь Рис. 1. Эффект комплексного применения фитопрепаратов на гуморальный иммунный ответ. ЭБ - эритроциты барана, тимус-зависимый антиген (5% суспензия); ЭБ + декс - дексаметазон (2мкг/мышь), введенный на 4-ый день после иммунизации эритроцитами барана; Аок - количество антителообразующих клеток к эритроцитам барана оценивали на 5-ый день после иммунизации; смесь препаратов метосепт, витанорм, максифам и бактрум. * p <0.05 по сравнению с контрольной группой животных, иммунизированных эритроцитами барана; ** p <0.05 по сравнению с контрольной группой животных, которым вводили дексаметазон. ЭБ - эритроциты барана; ЭБ + декс - дексаметазон, введенный на 4-ый день после иммунизации эритроцитами барана; Аок - количество антителообразующих клеток к эритроцитам барана. Препараты вводили в дозе 0,7мг/мышь. * p <0.05 по сравнению с контрольной группой животных, иммунизированных эритроцитами барана; ** p <0.05 по сравнению с контрольной группой животных, которым вводили дексаметазон. они оказывают достоверный супрессирующий эффект, который выражается в уменьшении количества АОК, способных синтезировать антитела против эритроцитов барана. Полученные данные подтверждают положение, что препараты растительного происхождения при их комплексном использовании оказывают взаимное влияние друг на друга. Они могут включаться в регуляцию синтеза антител, что важно при развитии реакций, сопровождающихся повышенным уровнем антител, в частности, при аллергических заболеваниях [8], аутоиммунных и воспалительных процессах, для подавления иммунного ответа при проведении иммуносупрессии, лейкемиях. В то же время Максифам Плюс, обладающий стимулирующей активностью, может оказаться полезным при дефиците В-системы иммунитета в качестве иммунокорригирующего средства. Заключение Комплексное применение растительных препаратов Метосепт Плюс, Витанорм Плюс, Максифам Плюс и Бактрум вызывает подавление гуморального иммунного ответа. Из исследованных препаратов Максифам Плюс способен активировать адаптивный иммунитет.

About the authors

V. I Aksenova

M. M Sharipova

M. S Zvol'skaya

S. N Voronova

Aleksey Mikhaylovich Vasilenko

Email: vasilenko-a-m@mail.ru

References

Supplementary files