Лазерная корреляционная спектроскопия при диспансерном наблюдении детей и подростков

Полный текст

Введение Одной из ведущих задач современного здравоохранения Российской Федерации является сохранение и укрепление здоровья детей и подростков. В последние годы проблема оценки уровня здоровья детского населения и выявления потенциальных групп риска является наиболее актуальной в связи с особенностями социальной и экологической обстановки. Целевая диспансеризация детей дошкольного и школьного возраста в организованных коллективах остается основным и необходимым направлением при достижении поставленных задач по сохранению здоровья подрастающего поколения [10]. В настоящее время, особое внимание уделяется контролю по улучшению качества диспансерного наблюдения детского населения в рамках первичного звена здравоохранения, так как своевременная диагностика заболеваний на практике напрямую зависит от качества и регулярности проводимой диспансеризации детей и подростков. При изучении этиологии патологического процесса особое место уделяется выявлению групп риска. Формирование групп риска у детей осуществляется при учете наследственных факторов, оценке антенатального и неонатального периодов развития, условий жизни, экологической обстановки, профессиональных вредностей родителей. Особое внимание уделяется разработке и применению малоинвазивных методов обследования. В качестве дополнительного критерия при определении групп риска по развитию хронической патологии у детей и подростков представляет интерес использование результатов лазерной корреляционной спектроскопии (ЛКС). Ранее метод ЛКС был успешно применен для оценки тяжести заболевания и эффективности лечения при бронхиальной астме[8] , сахарном диабете[11] , гематологических[6] и ряде других заболеваний[5, 7, 9, 12]. Показана его эффективность и при массовых обследованиях детей [1, 3] и взрослых [2]. Материалы и методы Под наблюдением в окружном гематологическом кабинете ЮВАО Детской городской поликлиники №150 г. Москвы находились дети и подростки с диагнозами железодефицитная анемия (ЖДА), бронхиальная астма (БА), острое респираторное заболевание (ОРЗ). В клиническое исследование были включены 205 пациентов с уточненными вышеперечисленными диагнозами и контрольная группа условно здоровых детей и подростков в возрасте от 0 до 18 лет (Таб.1). «Место таблицы 1» Всем детям и подросткам, включенным в исследование, было проведено физикальное и клинико-лабораторное обследование, также исследование сыворотки крови методом ЛКС. Клинический анализ крови выполняли с помощью полуавтоматического гемолитического анализатора Swelab АС910ЕО+ на 18 параметров, с определением скорости оседания эритроцитов (СОЭ) и обязательным подсчетом лейкоцитарной формулы, ретикулоцитов и тромбоцитов. Биохимическое исследование сыворотки крови (БХАК) было проведено в следующем объеме: печеночные трансаминазы, ЩФ, ЛДГ, СЖ, общий белок, общий билирубин, глюкоза, мочевина, креатинин. Также, при динамическом наблюдении группы детей и подростков с клиническими признаками респираторной инфекции без идентификации возбудителя, в 26% случаев, заболеваемость ОРЗ и рецидивирующими инфекциям ЛОР-органов была отмечена более 9-12 раз в год. Критерием выбора группы часто-болеющих детей (ЧБД) послужила клиническая картина, выраженная длительной субфебрильной температурой тела, гепатоспленомегалией, лимфаденопатией преимущественно шейной группы лимфоузлов. В гемограмме: лейкопения, реактивные изменения крови, моноцитоз, ускоренная СОЭ. При динамическом наблюдении в ОАК в течение 3-6 месяцев было зарегистрировано снижение абсолютного количества нейтрофилов менее 1,5-1,0*109/л. В БХАК: повышение фракций ЛДГ, ЩФ, билирубинемия. Группа ЧБД: 5 мальчиков в возрасте от 3 до 7 лет, 3 девочки в возрасте от 0 до 3 лет, 1 девочка 5 лет, 5 девочек в возрасте от 7 до 14 лет и 1 девочка-подросток 17 лет, были обследованы на наличие оппортунистических инфекций (Эпштейн-Барр вирус, цитомегаловирус, микоплазменная и хламидийная инфекции), антинейтрофильных аутоантител (АНАТ) и иммунный статус. Изменение физиологического состояния организма приводит к изменению метаболических процессов, что в свою очередь ведет к изменению состава биологических жидкостей. Определение субфракционного состава нативных биологических жидкостей дает точное представление о процентном соотношении составляющих их биосубстратов и позволяет получить интегральные показатели, отражающие динамическое состояние изучаемой системы [4, 13] Исследование сыворотки крови методом ЛКС проводили с помощью прибора ЛКС-03-«ИНТОКС». Метод основан на изменении спектральных характеристик монохроматического когерентного излучения гелий-неонового лазера в результате светорассеяния при прохождении через дисперсную систему (плазма, сыворотка крови, моча). Взаимодействие лазера со светорассеивающими частицами, находящимися в броуновском движении, расширяет спектр рассеянного света, причем изменение его частоты происходит пропорционально скорости движения частиц, которая, в свою очередь зависит от их размера [4, 12]. Результат измерения был представлен ЛК-гистограммой, где выделено три информативные зоны: I зона – 0-16 нм, II зона – 17-90 нм, III зона – более 91 нм. Процентный вклад в светорассеяние частиц, входящих в эти интервалы был суммирован. Результаты и их обсуждение Современный уровень развития лабораторной диагностики позволяет не только получить конкретные результаты для каждого индивидуума, но и совместно использовать принципиально различные методы для более точного определения функционального состояния отдельных систем организма. Такой подход к диагностике предполагает не механическое накопление показателей, а исследование их взаимных влияний, сочетаний, связи с клиническими симптомами и корреляции с другими показателями. В настоящей работе представлены данные, полученные при совместном использовании стандартного протокола клинико-лабораторного обследования детей и подростков при диспансерном обследовании и ЛКС. Представляется актуальной использование дополнительного скринингового метода, который в перспективе может стать вспомогательным при мониторинговом обследовании детей в организованных коллективах, с формированием групп риска по развитию хронических заболеваний, определением объема необходимых диагностических исследований и направленности дальнейшей медицинской помощи. Предсказательная эффективность при ранней диагностики связана не только с ранним опознаванием инициирующего патологию процесса или "маркера патологии", но и с возможной оценкой регуляторных процессов и установлением сложившегося под их воздействием уровня функционального соотношения, который и определит тот или иной вариант устойчивости организма к развитию патологии [4]. Целью настоящей работы было оценить возможность применения метода ЛКС при диспансерном наблюдении детей и подростков. Данные полученные при обследовании детей с диагнозом БА позволили построить суммарную ЛК-гистограмму. В 49% случаев данные представлены в виде трехстолбцовой гистограммы с очевидным преобладанием частиц размером от 17 до 90 нм (Рис.1). «Место рисунка 1» Кроме того, была определена четкая зависимость между преобладанием макромолекулярных частиц и клинической тяжестью состояния пациента с БА. Так при легкой форме БА макромолекулярные частицы сыворотки крови группируются в два четко обозначенных комплекса размерами от 0 до 16 нм и от 17 до 90 нм. При среднетяжелом течении заболевания наблюдалось появление частиц размером более 91 нм. Макромолекулярный состав сыворотки больных БА пополнялся прямо пропорционально тяжести течения патологического процесса. В группе детей и подростков с диагнозом ЖДА, неотягощенной сопутствующими заболеваниями. (n=25) (во всех случаях диагностирована анемия I-III степени, сидеропения) в 72% случаев на гистограммах преобладала III зона, отражающая наличие крупных молекулярных частиц размером более 91 нм (Рис.2). «Место Рисунка 2» Наличие острого или хронического инфекционного процесса вносит свои особенности в распределение частиц. По результатам исследования сыворотки крови методом ЛКС группы пациентов с инфекционным процессом (n=57), ЛГ-гистограммы со значительным превалированием одной из них встречались с близкими частотами (Рис.3). «Место Рисунка 3» При исследовании сыворотки крови ЧБД в количестве 15 человек, с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) и методом полимеразной цепной реакции (ПЦР), в 28,6% случаев были выявлены оппортунистические инфекции. Персистирование ЭБВ было определено у девочки 10 лет. У мальчиков 4-х и 6-ти лет было выявлено латентное течение ЭБВ инфекции. Персистирование ЦМВ инфекции было зарегистрировано у мальчика 5 лет. У девочки-подростка выявлено латентное течение ЦМВ инфекции. Факт активного течения микоплазменной инфекции был подтвержден у девочки 7 лет. Патологии клеточного и гуморального иммунитета выявлено не было, АНАТ отсутствовали во всей группе обследуемых. Данные исследования сыворотки крови пациентов с оппортунистическими инфекциями (n=6) методом ЛКС были представлены в виде гистограмм (Рис.4). «Место Рисунка 4» Таким образом, при развитии инфекционного процесса, причиной которого является воздействие вируса, в ЛК-спектрах было выявлено значимое увеличение количества мелкодисперсных частиц (0 – 16 нм). Суммарная гистограмма контрольной группы пациентов представлена на рисунке 5. «Место Рисунка 5» По результатам обследования контрольной группы условно здоровых детей и подростков, у 23,3% на момент диспансеризации было выявлено наличие ОРЗ без идентификации возбудителя. Рассматривая возрастные характеристики, отмечено, что клиническая картина ОРЗ чаще встречалась в группе подростков (33,4%) и детей в возрасте от 3 до 7 лет (30,8%). Минимальное количество детей с ОРЗ было выявлено в группе от 7 до 14 лет (18,2%). Максимальное количество пациентов с латентным дефицитом железа отмечено в подростковой группе (33,4%). Данные исследования сыворотки крови для каждого пациента диспансерной группы методом ЛКС, были представлены в виде гистограмм Превалирование мелкодисперсных частиц размером от 0 до 16 нм было отмечено на гистограммах у 41,7%. Увеличение II зоны ЛК-спектра, а именно, преобладание частиц размером от 17 до 90 нм, было выявлено на гистограммах лишь у 6 человек (10,0%). На гистограммах 48,3% пациентов преобладала III зона ЛК-спектра, отражающая макромолекулярный состав сыворотки крови, характерный для ЖДА. Сходство ЛКгистограмм пациентов этой группы с ЛК-гистограммами пациентов с ЖДА требует дополнительного исследования содержания железа. Можно предложить следующий алгоритм проведения диспансерного осмотра: педиатр проводит физикальный осмотр детей диспансерной группы. Если педиатр не обнаруживает признаков ОРЗ, то забирается кровь на ЛКС. Если на ЛК-гистограммах преобладает 3 зона, назначается дополнительное исследование на содержание железа Назначение ЛКС исследования при наличии ОРЗ, вероятно, целесообразно для разграничения вирусных и бактериальных инфекций и последующего соответствующего ПЦР-анализа. В результате проведенных наблюдений рассмотрено комплексное использование данных стандартных клинико-лабораторных исследований и данных исследования сыворотки крови методом ЛКС. Применив новый алгоритм обработки данных, отмечено, что результаты исследования сыворотки крови методом ЛКС не зависят от возраста и пола пациента в 100% случаев. Принимая во внимание соотношение между вкладами частиц в светорассеяние, появилась возможность выделить характерные для каждой исследованной патологии группы и определить степень влияния сопутствующих заболеваний на спектральные показатели. На основании полученных данных были сформулированы критерии определения групп риска, подтвержденные в ходе традиционных клинических исследований. Высокая пропускная способность прибора ЛКС-03-«ИНТОКС», отсутствие необходимости в расходных реактивах и простота выполнения измерений обусловливают целесообразность его применения в ходе диспансерных обследований. Учитывая выявленные изменения в метаболизме конкретного ребенка, возможно своевременно проводить индивидуальные профилактические мероприятия и оценить объем необходимой диагностической помощи.

Об авторах

С. А Румянцев

Заместитель директора по научной и учебной работе, д.м.н.

Мария Федоровна Уткина

Email: mfutkina@yandex.ru
врач

Елена Николаевна Архипова

Email: a@gmail.com
исполняющая обязанности старшего научного сотрудника

Ирина Борисовна Алчинова

Email: alchinovairina@yandex.ru
старший научный сотрудник

Список литературы

Дополнительные файлы