Применение терапевтического воздействия аргоновой плазмы в терапевтической косметологии


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Целью работы являлось изучение особенностей влияния аппарата «PlasmaJet» на кожу лица при возрастных изменениях кожи и Acnae vulgaris. Под наблюдением находились 20 человек. В первую группу входили 10 пациенток с возрастными изменениями кожи лица. Для пациентов этой группы на аппарате «PlasmaJet» было проведено 5 процедур комбинированного воздействия в режиме Pulse Mode, продолжительностью 30 минут с интервалом в 1 неделю. Для оценки эффективности процедур проводили фоторегистрацию, исследование функциональных параметров кожи лица (профилометрия, кутоме-трия, корнеометрия, уЗи - сканирование), гистологическое и иммуногистохимическое исследование образцов кожи до и после проведения всех процедур. Во вторую группу входили 10 пациентов с воспалительными заболеваниями кожи (акне), которым было проведено 3 процедуры комбинированного воздействия в режиме Pulse Mode, продолжительностью 30 минут. Интервалы между процедурами составляли 3-4 дня. Для оценки эффективности процедур проводили фоторегистрацию, исследование функциональных параметров кожи лица (пигментометрия, себуметрия) до и после проведения всех процедур, определенных программой испытаний. Полученные результаты сравнительной оценки эффективности воздействия процедур на кожу лица с использованием аппарата «PlasmaJet» в режиме Pulse Mode показали, что у пациентов с возрастными изменениями кожи отмечено увеличение показателей влажности, эластичности, а также сокращение размеров морщин. У пациентов с воспалительными заболеваниями кожи (акне) отмечена нормализация активности сальных желез кожи лица, снижение интенсивности эритемы и проявлений воспалительных заболеваний кожи, улучшение общего внешнего вида. Иммуногистохи-мические исследования показали стимулирующий эффект на клетки кожи лица пациентов, повышение синтетической способности кожи и активизация систем борьбы с повреждениями клеток кожи. Таким образом, использование аппарата «PlasmaJet» можно рекомендовать для пациентов с возрастными изменениями кожи для увеличения ее тургора, повышения влажности и выравнивания микрорельефа с целью омоложения кожи, а также для лечения пациентов с воспалительными заболеваниями кожи (акне).

Полный текст

Введение Последнее время, аппаратные методы терапевтической косметологии становятся все более популярными для решения различных эстетических и дерматологических проблем. Одним из инновационных методов является использование аргоновой плазмы, как в хирургической, так и терапевтической практике эстетической медицины. Использование аргоновой плазмы в хирургии: Бесконтактное воздействие высокочастотного тока на ткань практически полностью исключает вероятность прилипания к ней наконечника инструмента. Поток аргоновой плазмы позволяет осуществлять бескровное рассечение тканей и органов, обладает выраженным противовоспалительным, иммуностимулирующим, антимикробным, озонирующим и ранозаживляющим эффектом, что позволяет использовать его в различных областях медицины. Технология применяется в гинекологии, гастроэнтерологии, оториноларингологии, лапароскопии, хирургии открытых полостей и других областях хирургии. Из-за действия газовой струи и температурного воздействия происходит высыхание раны, ультрафиолетовое излучение и образующийся при получении аргоновой плазмы озон обеспечивают дополнительное обеззараживание раневой поверхности, исчезает отёк, в ряде случаев происходит исчезновение болей, резко увеличивается скорость заживления раны. Поэтому аргоновая плазма нашла применение в лечении трофических язв, пролежней, ожогов, длительно не заживающих ран. В качестве рабочего газа в медицине целесообразнее всего использовать именно аргон ввиду его инертных свойств, практически исключающих возможность каких-либо химических реакций. Аргоновая плазма оказывает на ткани организма коагулирующее воздействие, в связи с чем этот метод и получил название аргоноплазменной коагуляции. Лечебное терапевтическое воздействие плазмы на кожу человека стало возможно после разработки медицинской технологии PlasmaJet® (США). Одобренный американскими надзорными органами в области медицины (FDA и др.), аппарат «PlasmaJet® Derma» может эффективно применяться в косметологии и дермато логии для лечения заболеваний кожи, а также улучшения ее качества и омоложения. Генерируемая аппаратом PlasmaJet® Derma аргоновая плазма направляется на кожу бесконтактным способом. В основе работы «PlasmaJet® Derma» лежат три энергетических компонента: Световая энергия позволяет производить свет с минимальным ультрафиолетовым излучением. При этом не происходит разрушение клеток дермы и эпидермиса, и достигается стабильный результат фото-терапевтического воздействия - улучшения текстуры, тонуса и цвета кожи пациента. Интенсивное термическое воздействие вызывает нагревание глубинных слоев дермы до 40 оС всего за секунду воздействия. Плазменная технология доставляет тепловую энергию «проницательно», позволяя запустить механизмы неоколлагенеза, без каких-либо повреждений эпидермиса, что способствует быстрому восстановлению после процедуры. Кинетическая энергия плазмы - это постоянно движущиеся ионы, электроны, а также химических соединений, которые включаются в плазму из атмосферного воздуха. Например, пероксид водорода (H2O2) стимулирует процесс роста новых здоровых клеток и приостанавливает деление злокачественных. Моноксид азота (NO) обладает выраженным дезинфицирующим свойством. Было установлено, что плазма эффективна против грамположительных и грамотрицатель-ных бактерий, вирусов и грибковых инфекций. При этом неоспоримым преимуществом плазмы является ее всепроникающая способность. Реактивные источники энергии позволяют плазменному лучу проникать в труднодоступные места и мелкие отверстия, а также обрабатывать не идеально ровные поверхности, перепады которых могут составлять от нескольких микрометров до пары миллиметров. Мощное антисептическое свойство плазмы позволяет справляться с целым рядом заболеваний кожи, обусловленных наличием возбудителей: розацеа, акне, дерматитом, угревой сыпью, кератозом, папилломами, себореей. Однократная обработка плазмой позволяет значительно уменьшить количество патогенных бактерий на обрабатываемой поверхности. Технологии восстановительной медицины и медицинской реабилитации 21 Вестник восстановительной медицины № 2^2015 Процедуры при помощи аппарата «Plasma-Jet®Derma» могут проводиться пациентам независимо от возраста, цвета кожи, а также от времени года. Интенсивность и глубина воздействия плазменного луча регулируются в зависимости от поставленной задачи. Большой выбор настроек позволяет хирургу-косметологу индивидуализировать лечение и контролировать степень влияния на ткани и, следовательно, длительность восстановительного периода. Аппарат «PlasmaJet» состоит из консоли и рабочего модуля, которые вместе обеспечивают подвод газа аргона и контролируемой электроэнергии к наконечнику насадки. На конце наконечника аргон воспламеняется с помощью нескольких встроенных электродов до образования плазмы, которую также называют четвертым состоянием материи. Газ, нагретый до высокой температуры, ионизируются на атомы и молекулы, возникающая в результате этого тонкая струя плазмы или пульсирующий поток плазмы (насадка для косметологии и дерматологии) направляются на ткань бесконтактным способом. Плазмо-токовое воздействие на поверхность кожи осуществляется сканирующими движениями плазменного факела при малой выходной мощности высокочастотного тока, при этом термической травматизации биотканей не наступает. Этот вид плазмо-токового воздействия получил название «режим стимуляции». При терапевтическом воздействии на биологические ткани длину воздушно-плазменного потока от места истечения до области воздействия можно выбрать в пределах от 10 до 20 см, объемный расход установить в пределах от 0,5 до 1,0 л/мин, при этом в области воздействия диаметр пучка воздушной плазмы поддерживать в пределах примерно от 10 до 20 мм, а среднемассовую температуру воздушно-плазменного потока - от 40 до 70 °С. При таком выборе теплофизических и геометрических параметров воздушно-плазменного потока обеспечивается максимальная эффективность терапевтического воздействия на биологические ткани при достаточно комфортном состоянии пациента. При терапевтическом воздействии на биологические ткани длину h воздушно-плазменного пучка 1 от места истечения до области воздействия следует устанавливать в пределах примерно от 10 до 20 см. Уменьшение длины h воздушно-плазменного потока ниже 10 см приводит к возрастанию теплового потока в области воздействия (на раневой поверхности) и к чрезмерному ожогу биологический ткани 3; увеличение длины h более 20 см приводит к практическому исчезновению лечебного действия. Выход за пределы диапазона от 0,5 до 1,0 л/мин по объемному расходу потока приводит к изменению оптимального химического состава воздействующей плазмы и снижению ее лечебной эффективности. Диапазон изменения диаметра d пучка 1 воздушной плазмы от 10 до 20 мм является наилучшим с точки зрения визуального контроля за состоянием биологической ткани, подвергающейся лечебному воздействию. Снижение температуры воздушно-плазменного потока ниже 40 ^ не приводит к необходимому подсушиванию раневой поверхности, а повышение ее более 70 ^ ведет к появлению болевых ощущений у пациента. Плазма, состоящая из ионизированных атомов, заключает в себе сразу три типа энергии: световую, тепловую и кинетическую. Такой мощный выброс осуществляется благодаря постоянному движению положительных ионов и отрицательных электронов, отделяющихся от атомов газа при воздействии на него постоянным током. Одинаковое количество перемещающихся ионов и электронов делает плазменный луч нейтральным и абсолютно безвредным для организма человека. В ходе процедуры c применением плазмы стимулируются процессы регенерации и репарации, оказывается мощный противовоспалительный, антибактериальный эффект. В результате такого воздействия возможно комплексное лечение, омоложение, лифтинг кожи. Материалы и методы Под нашим наблюдением находилось 20 человек. Все пациенты до начала клинических испытаний и после их завершения проходили обследование у врача-косметолога. Участники испытаний были поделены на две группы (по 10 человек в каждой группе). В первую группу входили 10 пациенток с возрастными изменениями кожи лица. Средний возраст составил 54,4+4,6 года. Для пациентов этой группы на аппарате «PlasmaJet» было проведено 5 процедур комбинированного воздействия в режиме Pulse Mode, продолжительностью 30 минут. Интервалы между процедурами составляли 1 неделю. Для оценки эффективности процедур проводили фоторегистрацию, исследование функциональных параметров кожи лица (профиломе-трия, кутометрия, корнеометрия, УЗИ - сканирование), гистологическое и иммуногистохимическое исследование образцов кожи участников клинических испытаний до и после проведения всех процедур, определенных программой испытаний. Во вторую группу входили 10 пациентов с воспалительными заболеваниями кожи (акне). Средний возраст 24,4+3,2 года. Для пациентов этой группы на аппарате «PlasmaJet» было проведено 3 процедуры комбинированного воздействия в режиме Pulse Mode, продолжительностью 30 минут. Интервалы между процедурами составляли 3-4 дня. Для оценки эффективности процедур проводили фоторегистрацию, исследование функциональных параметров кожи лица (пигментоме-трия, себуметрия), участников клинических испытаний до и после проведения всех процедур, определенных программой испытаний. Изучение клинической эффективности изделия медицинской техники проводили с использованием аппарата многофункционального «PlasmaJet» (производства компании «Plasma Surgical Ltd.», 127 Milton Park, Suite 14, Abingdon, Oxfordshire OX14 4SA, Great Britain), предназначенного для разделения, коагуляции и абляции тканей с использованием энергии плазменного потока, а также для лечения незаживающих ран, акне, экземы, псориаза, дерматитов в дерматологии и для абдоминопластики, вапоризации образований, омоложения кожи в косметологии. На аппарате «PlasmaJet» проводили процедуры комбинированного воздействия в режиме Pulse Mode на кожу лица пациентов, принимавших участие в клинических испытаниях. Параметры энергии на экране: шаг 7, расстояние до ткани 50-100 мм, поток газа из инструмента 4 литра в минуту, сила тока 20 А, мощность 1400 Вт, время работы плазмы 35 мл/сек., время задержки до следующего включения 300 мл/сек., длина периода в целом 335 мл/сек., продолжительность процедуры 30 минут. Для оценки эффективности процедур, проводимых с использованием аппарата «PlasmaJet», проводили фоторегистрацию, исследование функциональных параметров, гистологическое и иммуногистохимическое исследование кожи лица участников клиниче 22 Технологии восстановительной медицины и медицинской реабилитации Вестник восстановительной медицины № 2^2015 ских испытаний до и после проведения всех процедур, определенных программой испытаний. Определение параметров профилометрии, кутоме-трии, корнеометрии, себуметрии кожи лица выполняли на аппарате «SOFT PLUS CPU» ^ALLEGARI S.PA.). Профилометрию (исследование морщин и микроструктур, 3 D рельеф) проводили путем анализа изображений кожи, полученных напрямую с помощью цифровой микрокамеры с высокой разрешающей способностью (Lens X100 насадка X12 с вертикальной подсветкой). Кутометрию (определение эластичности) проводили с использованием вакуумного датчика эластичности путем измерения деформации кожи (уровень эластичности). Корнеометрию (определение влажности) проводили с использованием датчика влажности путем измерения содержания воды в коже емкостным методом. Себуметрию (определение активности сальных желез) проводили с использованием датчика жирности путем считывания результата со специальной абсорбирующей ленты методом фотометрии. Пигментометрию (определение содержания меланина) проводили с использованием датчика измерения меланина для определения однородности пигментации фотометрическим методом. УЗИ-сканирование кожи проводили при помощи цифровой системы ультразвуковой визуализации (DUB) (Taberna Pro Medicum GmbH) с ультразвуковым датчиком с частотой 22 МГц (номинальная частота: 22 МГц; центральная частота: 22 МГц; фокусировка: l до15 мм; мощность: 35 Вт/см2; ширина шага: 33 μιτι; область сканирования: 12,8 мм; время сканирования: приблизительно 0,4 сек). Иммуногистохимические Исследования (ИГХ) - это метод выявления точной локализации того или иного клеточного или тканевого компонента (антигена) благодаря связыванию его с мечеными антителами. Метод позволяет выявлять точную локализацию того или иного клеточного или тканевого компонента (антигена) с помощью иммунологических и гистохимических реакций. Существуют два варианта иммуногистохимиче-ских реакций. Прямой метод предполагает использование меченых антител против изучаемого антигена. Непрямой метод предполагает использование двух различных антител. Первичные антитела реагируют с антигенами ткани. Связанные с меткой вторичные антитела специфически взаимодействуют с первичными, которые для вторичных антител являются антигеном. В последнее десятилетие ИГХ анализ обрёл широкое применение в каждодневной диагностической практике, перестал быть методом сугубо научных исследований. Моноклональные антитела - антитела, вырабатываемые идентичными иммунными клетками, происходящими из одной и той же клетки-предшественника. Современные биотехнологии позволяют получить моноклональные антитела, специфически связывающие самые различные вещества. Моноклональные антитела используются в частности при иммунофенотипи-ровании - методе определения типа клеток путем изучения молекул, присутствующих на их поверхности. При этом антитела несут флуоресцентную метку, а значит, «меченые» и «немеченые» клетки можно легко различить с использованием специальных приборов. Для иммуногистохимического исследования в наших исследованиях использовали следующие первичные моноклональные антитела: PCNA, p53, Procollagen type I, Sirt-1. Белок Р53 контролирует специфические виды апоп-тоза, вызванные сильными повреждениями ДНК или нарушением регуляции клеточного цикла. Белок р53, является ключевым фактором, регулирующим апоптоти-ческий процесс, замедляя в нормальных клетках митотическую активность [1]. На уровне транскрипции фактор р53 регулирует экспрессию генов, участвующих в блокаде клеточного цикла, а также взаимодействует либо с комплексами, определяющими синтез и репарацию ДНК, либо с белками, модулирующими апоптоз. Если повреждение ликвидировать не удается, то р53 запускает апоптоз [2, 3]. Ядерный антиген пролиферирующих клеток (Proliferating Cell Nuclear Antigen - PCNA) является гомотри-мером, который формирует кольцеобразную структуру, которая может двигаться по ДНК подобно карабину, скользящему по веревке (sliding clampPCNA участвует не только в пролиферации клеток, но и в репарации ДНК после ее повреждения, что делает данный антиген условно специфичным к клеточному циклу, так как восстановление ДНК может осуществляться в фазе покоя [4, 5]. Sirtuin 1 относится к сиртуинам - семейству эволю-ционно консервативных НАД-зависимых белков, обладающих деацетилазной или АДФ-рибозилтрансферазной активностью. Название семейству дано в честь одного из представителей - дрожжевого белка SIR2. SIRT1 является человеческим гомологом белка SIR2, ключевым регулятором защиты и выживания клетки в ответ на стресс, вовлечен в различные биологические функции, включая развитие клеток, обмена веществ, супрессию генов, репарацию ДНК, переход от одного этапа клеточного цикла к другому, апоптоза, формирование гетерохроматина и особенно продлению жизни [7, 8]. Подобный механизм может наблюдаться и в клетках кожи. Сиртуин-1 замедляет процессы старения кожи и гибели клеток. Проколлаген. Коллаген - основной структурный белок межклеточного матрикса. Он составляет от 25 до 33% общего количества белка в организме, т.е. 6% массы тела. В дерме фибриллы коллагена ориентированы таким образом, что формируют сеть, особенно хорошо развитую в участках кожи, которые испытывают сильное давление (кожа подошв, локтей, ладоней), а в заживающей ране они агрегированы весьма хаотично. Липептидные цепи коллагена синтезируются на полирибосомах, связанных с мембранами ЭР, в виде более длинных, чем зрелые цепи, предшественников - препро- α -цепей. По своему аминокислотному составу проколлагены отличаются от коллагена главным образом содержанием тирозина, фенилаланина, гистидина, пролина и оксипролина. В возрастной кожи, коллаген характеризуется утолщенными фибриллами, организованными в веревочные структуры, пучки, чего нет в более молодой коже. Соотношение разных типов коллагена в коже человека, также изменяется с возрастом. В молодой коже, коллаген I типа составляет 80%, коллаген III типа составляет около 15% от общего коллагена кожи. C возрастом увеличивается содержание проколлагена III в крови, что свидетельствует о процессах деградации соединительной ткани [9-12]. Таким образом, пропептид проколлагена 1 типа может быть использован как маркер биосинтез коллагена I типа, как основного показателя обновления дермы. Для иммуногистохимического исследования образцы кожи были получены в фиксирующем растворе Технологии восстановительной медицины и медицинской реабилитации 23 Вестник восстановительной медицины № 2^2015 (10% нейтральный забуференный формалин) с названием кожа правая и левая. Проводка препаратов проводилась с помощью проводочной станции Leica, заливка в парафиновые блоки осуществлялась на автоматической заливочной станции. Все срезы были окрашены гематоксилином и эозином. Для иммуногистохимиче-ского исследования использовали следующие первичные моноклональные антитела: Антитела Фирма Разведение PCNA Dako, USA 1:100 p53 Dako, USA 1:50 Procollagen type I Lifespan biosciences 1:100 Sirt-1 Abcam, UK 1:100 Окрашивание препаратов проводилось по стандартному протоколу: 1. Разогрев стекол с парафиновыми срезами в термостате (+56°С) 30 мин; 2. Депарафинизация и регидратация в серии жидкостей (по 3-10 мин) в последовательности: ксилол I (10 мин), ксилол II (5 мин), этанол 100 % (5 мин), этанол 96 % I (5 мин), этанол 96 % II (5 мин), этанол 75 % (3 мин); 3. Промывка дистиллированной водой 5 мин; 4. Демаскировка антигенов: контейнер со стеклами инкубировали в цитратном буфере (pH 6,0) в течение 20 мин при высоком давлении и температуре (95-98 оС); 5. Промывка дистиллированной водой 1 мин; 6. Блокада эндогенной пероксидазы (контейнер со стеклами помещали в 3%-ный водный раствор пероксида водорода на 15 мин); 7. Промывка в 2 сменах дистиллированной воды по 5 мин; 8. Промывка в Wash-буфере (CINTEC) 10 мин; 9. Инкубация с нормальной неиммунной сывороткой в течение 30 мин при комнатной температуре (наносили 50-100 мкл нормальной блокирующей сыворотки и помещали во влажную камеру); 10. Инкубация с первыми (специфичными) антителами (со стекол стряхивали нормальную сыворотку и наносили по 30 мкл первичных (специфичных) антител. Стекла переносили во влажную камеру и проводили инкубацию в течение 45 мин при комнатной температуре, а затем 15 мин при +37 оС в термостате); 11. Промывка в Wash-буфере 10 мин; 12. Инкубация с вторичными биотинилированными антителами в течение 30 мин при комнатной температуре; 13. Промывка в Wash-буфере 10 мин; 14. Выявление пероксидазы хрена диаминобензиди-ном (раствор готовили по инструкции, прилагающейся к набору). Появление реакции контролировали под микроскопом. 15. Промывка в 2 сменах дистиллированной воды по 5 мин; 16. Окрашивание гематоксилином Майера 4 мин при комнатной температуре с последующей промывкой в горячей проточной воде; 17. Промывка дистиллированной водой 5 мин; 18. Дегидратация в серии жидкостей в следующей последовательности по 5 мин: этанол 70 %, эта нол 96% I, этанол 96% II; по 10 мин: изопропиловый спирт, ксилол I, ксилол II (15 мин). 19. Заключение в синтетическую среду (Novomount Permanent Slide, Novocastra) . 20. Для негативного контроля производилась иммуно-гистохимическая реакция без использования первичных антител. Для оценки результатов иммуногистохимического окрашивания проводили морфометрическое исследование с использованием системы компьютерного анализа микроскопических изображений, состоящей из микроскопа Olympus BX40, цифровой камеры Olympus, персонального компьютера на базе Intel Pentium 4 и программного обеспечения «Vidеotest Morphology 5.2». В каждом случае анализировали 5 полей зрения при увеличении 200х. Проводилось измерение двух параметров - оптической плотности и площади экспрессии. Оптическая плотность выражалась в у.е. Площадь экспрессии рассчитывалась как отношение площади, занимаемой иммунопозитивными клетками, к общей площади клеток в поле зрения и выражали в процентах для маркеров с цитоплазматическим окрашиванием и как отношение площади, занимаемой иммунопозитивными ядрами к общей площади ядер в поле зрения для маркеров с ядерной экспрессией. Фоторегистрация пациентов выполнялась фотоаппаратом NIKON AF-S с фокусным расстоянием 28-70 мм. В качестве источника света использовались два галогеновых светильника мощностью 500 Вт и 250 Вт с цветовой температурой 2850 К0 . Установочные данные для съемки: режим съемки А (приоритет диафрагмы), чувствительность 200 ISO. Основная задача при фоторегистрации сводилась к тому, чтобы получить изображение одного и того же пациента до проведения процедур и после их завершения в одном масштабе, в одной и той же позе (поворот головы, её наклон и т д.), чтобы изображение по цвету и яркости не отличались (или отличались минимально) друг от друга. Статистическую обработку полученных данных проводили методом дисперсионного анализа путём определения средних величин и стандартного отклонения с использованием компьютерной программы «БИОСТАТ». Результаты и их обсуждение Результаты измерения значений влажности и эластичности у пациентов первой группы до начала клинических испытаний показали сниженные значения показателей влажности рогового слоя кожи и эластичности. Сравнительные результаты измерения значений влажности и эластичности у пациентов первой группы до начала клинических испытаний показали сниженные значения показателей влажности рогового слоя кожи и эластичности. Результаты измерения значений влажности и эластичности у пациентов первой группы после проведения клинических испытаний показали увеличение на 49% значений показателей влажности рогового слоя эпидермиса и на 14% показателей эластичности (Таблица 1). Сравнительные результаты исследования морщин и микроструктур кожи у пациентов первой группы после проведения клинических испытаний показали сокращение длины морщин на 14%, ширины на 24%, глубины на 22%. Результаты УЗИ сканирования кожи у пациентов первой группы после проведения клинических испытаний не выявило существенных изменений в показателях акустической плотности. 24 Технологии восстановительной медицины и медицинской реабилитации Вестник восстановительной медицины № 2^2015 Таблица 1. Изменения показателей влажности и эластичности кожи у пациентов 1 группы в процессе лечения Таблица 2. Сравнительные результаты исследования морщин и микроструктур кожи участников первой группы, до начала клинических испытаний и после окончания Технологии восстановительной медицины и медицинской реабилитации 25 Вестник восстановительной медицины № 2^2015 Сравнительные результаты измерений активности сальных желез у пациентов второй группы после проведения клинических испытаний показали нормализацию показателей жирности кожи. Результаты гистологического и иммуногистохимического исследований В обоих срезах представлена кожа с тонким роговым слоем. Эпидермис: кожный лоскут покрыт многослойным плоским эпителием с сохранением всех слоев, очаговой гиперпигментацией базального слоя. Дерма: слой нормальной толщины. В сосочковом слое определяется умеренное количество потовых желез, волосяные фолликулы и единичные сальные железы. Периваскулярно отмечается умеренная мононуклеарная инфильтрация. Коллагеновые и эластические волокна обычного строения без отека, умеренное число фибробластов веретенообразной формы. Результаты иммуногистохимического исследования В исследованиях образцов кожи век человека изучалось воздействие процедур с использованием аппарата «PlasmaJet» на синтез маркеров PCNA, p53, сир-туина 1, проколлагена. При изучении воздействия процедур на синтез маркера пролиферации PCNA в клетках кожи не было установлено стимулирующего действия и не наблюдалось увеличения экспрессии маркера PCNA (рис. 2.) При проведении процедур с использованием аппарата «PlasmaJet» наблюдалось достоверное снижение экспрессии маркера апоптоза р53 в 1,7 раз по сравнению с контролем (рис. 3). Результаты исследования показали, что в после воздействия плазмой экспрессия маркера к сиртуину 1 достоверно увеличивалась. Риерсительная площадь иммунопозитивных ядер в группе контроля составляет 15,74±3,12, тогда как при введении препарата составляла 24,68±3,62% (рис. 4). Исследуемое вещество оказывает выраженный эффект на синтетическую активность фибробластов, показано что под воздействием процедур с использованием аппарата «PlasmaJet» значение оптической плотности экспрессии проколлагена 1 типа составляла 0,285±0,03 у.е., тогда как в контрольном образце 0,251± 0,05 у.е., то есть была статистически достоверно выше. По показателю площади экспрессии статистически достоверных различий выявлено не было. В результате проведенных гистологических и иммуногистохимических исследований было показано, что проведение процедур с использованием аппарата «PlasmaJet» было выявлено наличие стимулирующего эффекта на клетки кожи лица пациентов, повышение синтетической способности кожи и активизация систем борьбы с повреждениями клеток кожи. А Рис. 1. Образцы кожи, окраска гематоксилином-эозином, увеличение х100. А - правый, Б - левый. Рис. 2. Влияние процедур с использованием аппарата «PlasmaJet» на про-лиферативную активность клеток кожи 26 Технологии восстановительной медицины и медицинской реабилитации Вестник восстановительной медицины № 2^2015 До испытаний ^ Ί». Ä Î, " ' і * м ' ψ 7гь і-*1 *' ^ ...» * ■ . V V ' * ϊ. * - · ,<4ι < ч'+іі V, V : · J После испытаний Рис. 3. Влияние процедур с использованием аппарата «PlasmaJet» на программируемую клеточную гибель клеток кожи • / Л- V'· - ,ъ- ‘îr· V, ■ Г* 'J 4а* h Кг V* / т ·■<■· ·. . Λ' <*· * /У-':/ До испытаний После испытаний Рис. 4. Влияние процедур с использованием аппарата «PlasmaJet» на экспрессию фактора сиртуина 1 в коже Технологии восстановительной медицины и медицинской реабилитации 27 Вестник восстановительной медицины № 2^2015 Оптичечкая плотность экспрессии маркера проколлагена До испытаний После испытаний Рис. 5. Влияние процедур с использованием аппарата «PlasmaJet» на экспрессию маркера проколлагена в коже Результаты и их обсуждение У пациенток 1 группы (возрастные изменения кожи) после прохождения курса лечения отмечалось улучшение тона кожи, увеличение ее тонуса, уменьшение поверхностной сети морщин и некоторый эффект лифтинга кожи (Фото 1, 2, 3). У пациентов 2 группы (Acnae vulgaris) отмечалось снижение жирности поверхности кожи, уменьшение гиперемии и явлений воспаления, отсутствие появления новых элементов акне (Фото 4, 5). Таким образом результаты клинических испытаний показали омолаживающий эффект процедур с использованием аппарата «PlasmaJet» на пациентах с возрастными изменениями кожи лица и лечебный эффект на пациентах с воспалительными заболеваниями кожи, вызываемыми изменениями в пило-себационных структурах (акне). Заключение Полученные результаты сравнительной оценки эффективности воздействия процедур на кожу лица с использованием аппарата «PlasmaJet» в режиме Pulse Mode показали, что у пациентов с возрастными изменениями кожи отмечено увеличение показателей влажности, эластичности, а также сокращение размеров морщин. У пациентов с воспалительными заболеваниями кожи (акне) отмечена нормализация активности сальных желез кожи лица и пигментоо-бразования, снижение интенсивности проявлений Фото 1. Пациентка 1 группы (возрастные изменения кожи) воспалительных заболеваний кожи (акне), улучшение общего внешнего вида. Иммуногистохимические исследования показали стимулирующий эффект на клетки кожи лица пациентов, повышение синтетической способности кожи и активизация систем борьбы с повреждениями клеток кожи. Ни в одном случае проведения процедур с использованием аппарата «PlasmaJet» не было отмечено осложнений или побочных реакций. 28 Технологии восстановительной медицины и медицинской реабилитации Вестник восстановительной медицины № 2^2015 Фото 2. Пациентка 1 группы (возрастные изменения кожи) Фото 3. Пациент 2 группы (Acnae vulgaris) Фото 4. Пациент 2 группы (Acnae vulgaris) Таблица 3. Сравнительные результаты определения активности сальныхжелез кожи участников второй группы, до начала клинических испытаний и после окончания Процедуры с использованием аппарата «PlasmaJet» можно рекомендовать для пациентов с возрастными изменениями кожи для увеличения ее тургора, повышения влажности и выравнивания микрорельефа с целью омоложения кожи. Процедуры с использованием прибора «PlasmaJet» могут быть рекомендованы в дерматологии для лечения пациентов с воспалительными заболеваниями кожи (акне). Полученные результаты могут быть использованы врачами дерматокосметологами в своей работе. № п/п Активность сальных желез До испытаний (уе) После испытаний (уе) 1 24 14 2 29 13 3 33 13 4 26 18 5 31 17 6 22 16 7 29 18 8 30 16 9 33 13 10 29 18 Среднее 28,60 15,60 отклонение 2,76 1,88 ошибка 1,15 0,69 Медиана 29,00 16,00 Минимум 22,00 13,00 Максимум 33,00 18,00 Фото 5. Пациент 2 группы (Acnae vulgaris)
×

Об авторах

А. И Труханов

ЗАО «Клиника активного долглетия «Институт красоты на Арбате»

И. К Жукова

ЗАО «Клиника активного долглетия «Институт красоты на Арбате»

А. А Толкачева

ЗАО «Клиника активного долглетия «Институт красоты на Арбате»

Елена В. Щукина

ЗАО «Клиника активного долглетия «Институт красоты на Арбате»

Email: 89032886269@mail.ru

И. М Кветной

ЗАО «Клиника активного долглетия «Институт красоты на Арбате»

Список литературы

  1. Yu J., Zhang L. The transcriptional targets of p53 in apoptosis control / J. Yu, L. Zhang // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 2005. - Vol. 331. - Р. 851-858.
  2. Harris S. L. The p53 pathway : positive and negative feedback loops / S. L. Harris, A. J. Levine // Oncogene. - 2005. - Vol. 24. - Р. 2899-2908.
  3. Schuler M. Transcription, apoptosis and p53 : Catch-22 / M. Schuler, D. R. Green // Trends Genet. - 2005. - Vol. 21. - Р. 182-187.
  4. Krishna T.S., Kong X.P., Gary S., Burgers P.M., Kuriyan J. //Cell. 1994. V. 79. P. 1233-1243.
  5. Kawahira K Immunohistochemical staining of proliferating cell nuclear antigen (PCNA) in malignant and nonmalignant skin diseases Archives for Dermatological Research 01/1999; 291 (7-8): 413-8.
  6. Chua KF, Mostoslavsky R, Lombard DB et al. Mammalian SIRT1 limits replicative life span in response to chronic genotoxic stress //Cell Metab. 2005 Jul; 2 (1): 67-76.
  7. Imbert I, Dal Farra C, Domloge N Sirtuins: a breakthrough in anti-aging research //Cosmetics and Toiletries, 2008 January; 123 (1): 69-74.
  8. Chen J, Zhou Y Mueller-Steiner S, Chen LF, Kwon H, Yi S, Mucke L, Gan L. SIRT1 protects against microglia-dependent amyloid-beta toxicity through inhibiting NF-kappaB //J Biol Chem 280: 40364-40374.
  9. Kalluri R., Zeisberg M. Fibroblasts in cancer. Nature Publishing Group 2006; 6: 392-401.
  10. Green H, Rheinwald JG, Sun TT. Properties of an epithelial cell type in culture: the epidermal keratinocyte and its dependence on products of the fibroblast. Prog ClinBiol Res. 1977; 17: 493-500.
  11. Кишкун А. А. Биологический возраст и старение: возможности определения и пути коррекции. М. ГЭОТАР-Медиа, 2008 - 973 с.
  12. Lavu S, Olivier Boss, Peter J. Elliott & Philip D. Lambert Sirtuins - novel therapeutic targets to treat age-associated diseases //Nature Reviews Drug Discovery 7, 841-853.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML

© Труханов А.И., Жукова И.К., Толкачева А.А., Щукина Е.В., Кветной И.М., 2015

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.

Данный сайт использует cookie-файлы

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.

О куки-файлах