ТРИТЕРПЕНОВЫЕ ГЛИКОЗИДЫ ТРАВЫ SOLIDAGO CAUCASICA KEM.-NATH

Полный текст

Золотарник кавказский (Solidago caucasica Kem.-Nath.) - многолетнее травянистое растение из сем. астровые (Asteraceae) с мелкими желтыми цветками, собранными в колосовидное соцветие. Растение является неизученным эндемом Кавказа, в то время как препараты из других видов рода Solidago успешно применяются в мировой практике для лечения и профилактики мочекаменной болезни, простатита и других заболеваний [5]. Ранее было установлено, что в траве золотарника кавказского содержатся фенольные соединения: флавоноиды (рутин, виценин, геспередин), кумарины (умбеллиферон, эскулетин, дигидрокумарин), фенолкарбоновые кислоты (кофейная, галловая, цикориевая и хлорогеновая) [6]; органические кислоты (лимонная, яблочная, янтарная) [7]; аминокислоты (аспарагиновая кислота, треонин, серин, глутаминовая кислота, глицин, аланин, валин, метионин, лейцин, изолейцин, тирозин, фенилаланин, гистидин, лизин, аргинин) [4]; углеводы [8]; 5 макроэлементов и 16 микроэлементов [4]. Целью данного исследования являлось изучение тритерпеновых гликозидов надземной части золотарника кавказского. Объект исследования - высушенная и измельченная трава золотарника кавказского, собранная в начале цветения в урочище Джилы-Су Кабардино-Балкарской Республики в августе 2012 г. Изучение тритерпеновых гликозидов (далее - гликозидов) травы золотарника кавказского проводилось по методике проф. Э.Т. Оганесяна, исследовавшего механизм реакции взаимодействия тритерпеноидов с серной кислотой и разработавшего способ их количественного определения в растениях [3]. УФ спектрофотометрическое определение гликозидов при взаимодействии с серной кислотой применяется в анализе корневищ аралии маньчжурской [2]. Около 100,0 г (точная навеска) сырья заливали бензолом «до зеркала» и настаивали в течение суток, периодически перемешивая. Затем бензол сливали, и сырье вновь обрабатывали бензолом (кратность операции 3). Далее сырье высушивали, и в аппарате Сокслета проводили многократную экстракцию хлороформом до обесцвечивания получаемого извлечения, после чего сырье высушивали и экстрагировали в аппарате Сокслета метанолом. Метанол отгоняли до 1/20 от первоначального объема, и из оставшегося сгущенного извлечения гликозиды осаждали десятикратным объемом эфира. Надосадочную жидкость сливали, осадок затирали стеклянной палочкой в присутствии эфира, после чего фильтровали и сушили в эксикаторе над серной кислотой концентрированной, а затем взвешивали. Расчет проводили по формуле (1): , (1) где m - масса суммы гликозидов, г; a - навеска сырья, г; W - потеря в массе при высушивании сырья, %. Далее проводили гидролиз гликозидов по методике [1]. По окончании гидролиза реакционную смесь охлаждали, разбавляли водой и агликоны экстрагировали эфиром. Эфирный экстракт промывали водой до нейтральной реакции и обезвоживали над натрия сульфатом. Эфир отгоняли, агликоны сушили на воздухе. К 0,0004 г полученных агликонов прибавляли 10 мл серной кислоты концентрированной и термостатировали при 70 °С в течение 1 часа. Спектрофотометрическое определение проводили в диапазоне длин волн 200-400 нм. Максимум светопоглощения наблюдался при 314 нм, что соответствует максимуму поглощения олеаноловой кислоты. Следующим этапом работы было спектрофотометрическое определение содержания суммы гликозидов в пересчете на агликон - олеаноловую кислоту. Аналитическую пробу травы золотарника кавказского измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 1 мм. Около 2,5 г (точная навеска) сырья заливали 50 мл бензола и настаивали в течение суток. Извлечение фильтровали, бензол сливали, сырье высушивали на воздухе до удаления запаха бензола. Затем прибавляли 50 мл хлороформа и нагревали на кипящей водяной бане с обратным холодильником в течение 1 ч. Извлечение фильтровали, хлороформ сливали, сырье высушивали на воздухе до удаления запаха хлороформа. Далее сырье трехкратно экстрагировали метанолом порциями по 50 мл на кипящей водяной бане с обратным холодильником в течение 1 ч. Метанол отгоняли, и далее проводили гидролиз гликозидов по методике [8]. Смесь охлаждали, разбавляли водой в 5 раз, и агликоны экстрагировали эфиром. Эфир отгоняли, остаток сушили на воздухе. К полученному остатку прибавляли 10 мл кислоты серной концентрированной и термостатировали при 70 °С в течение 1 ч (раствор А). 1 мл раствора А помещали в мерную колбу на 100 мл и доводили кислотой серной концентрированной до метки (раствор Б). Спектрофотометрическое определение проводили в диапазоне длин волн 200-400 нм (рисунок 1). Приготовление раствора стандартного образца олеаноловой кислоты: к 0,0004 г олеаноловой кислоты прибавляли 10 мл кислоты серной концентрированной (точный объем) и термостатировали при 70 °С в течение 1 часа. К 2 мл полученного раствора прибавляли 2 мл серной кислоты концентрированной и проводили спектрофотометрическое определение в диапазоне длин волн 200-400 нм (рисунок 2). Расчет содержания суммы тритерпеновых гликозидов в траве золотарника кавказского в пересчете на олеаноловую кислоту проводили по формуле (2): (2) где A - оптическая плотность испытуемого раствора; A0 - оптическая плотность раствора стандартного образца олеаноловой кислоты; m - масса травы золотарника кавказского, г; m0 - масса стандартного образца олеаноловой кислоты, г; W - потеря в массе при высушивании сырья, %. Рисунок 1 - УФ спектр раствора агликонов тритерпеновых гликозидов травы золотарника кавказского в кислоте серной концентрированной Рисунок 2 - УФ спектр раствора стандартного образца олеаноловой кислоты в кислоте серной концентрированной Количественное содержание суммы тритерпеновых гликозидов травы золотарника кавказского, найденное гравиметрически, составляет 0,93% в пересчете на абсолютно сухое сырье. Установлено, что гликозиды З. кавказского являются производными олеаноловой кислоты. Полученные данные количественного определения гликозидов методом спектрофотометрии в пересчете на олеаноловую кислоту представлены в табл. 1. Таблица 1 - Содержание тритерпеновых гликозидов в пересчете на олеаноловую кислоту в траве золотарника кавказского Навеска сырья, г Оптическая плотность Содержание гликозидов, % Метрологические характеристики 2,9335 0,8415 1,02 = 1,01 S = 0,0274 = 0,0112 = 0,03 ε = ± 2,70% 2,9057 0,8580 1,05 3,1325 0,8635 0,98 2,9128 0,8519 1,04 3,1752 0,8702 0,97 3,1125 0,8641 0,99 Таким образом, содержание суммы гликозидов в траве золотарника кавказского в пересчете на олеаноловую кислоту, определенное методом УФ спектрофотометрии, составляет 1,01 ± 0,03%. Выводы В результате проведенного исследования было впервые установлено, что количественное содержание суммы тритерпеновых гликозидов в надземной части золотарника кавказского, определенное гравиметрически, составляет 0,93%. Установлено, что тритерпеновые гликозиды золотарника кавказского являются производными олеаноловой кислоты. В связи с этим УФ спектрофотометрическое определение суммы тритерпеновых гликозидов проводили в пересчете на олеаноловую кислоту, оно составляет 1,01 ± 0,03%.

Об авторах

В. В Федотова

Пятигорский медико-фармацевтический институт - филиал ГБОУ ВПО ВолгГМУ Минздрава России

Email: bergenya@yandex.ru

Э. Т Оганесян

Пятигорский медико-фармацевтический институт - филиал ГБОУ ВПО ВолгГМУ Минздрава России

В. А Челомбитько

Пятигорский медико-фармацевтический институт - филиал ГБОУ ВПО ВолгГМУ Минздрава России

Список литературы

Дополнительные файлы