ИЗМЕНЕНИЕ АГРЕГАЦИОННЫХ СВОЙСТВ ЭРИТРОЦИТОВ ПОд ВОЗдЕЙСТВИЕМ ПЕНТОКСИФИЛЛИНА И СОЕдИНЕНИЯ СУМ-55 ПРИ СТИМУЛЯЦИИ ВХОдА КАЛьЦИЯ В КЛЕТКУ

Аннотация

Полный текст

Цель работы: изучение влияния соединения СУМ-55 и пентоксифилллина на параметры агрегации при изменении концентрации кальция в эритроцитах Материалs и методы исследования: в качестве потенциального корректора синдрома повышенной вязкости крови исследовано соединение СУМ-55 (1,3-диметил-7-(2-гидрокси-3-пиперидинопропил-1)-8-фениламиноксантина гидрохлорид, Патент РФ №2344137) и препарат с гемореологической активностью пентоксифиллин («Аventis», Германия). Эксперименты были выполнены на 50 белых нелинейных крысах самцах, массой 270-300 г. Забор крови производился из брюшной аорты под легким эфирным наркозом. В каждой серии суспензию отмытых эритроцитов делили и инкубировали в течение 15 мин при 370С с соединениями в конечной концентрации 1х10-4 моль/л. Связывание кальция в среде осуществляли с помощью хелатора Са2+ - ЭГТА (1 мМ) (Sigma, США). Повышение концентрации Са2+ в клетке достигалось путем инкубации клеток с кальциевым ионофором А 23187 (3,0 мкМ) (Sigma, США). Степень агрегации эритроцитов определяли с помощью полуавтоматического агрегометра типа МА1 (Myrenne, Германия). Статистическая обработка результатов проводилась с использованием табличного редактора Microsoft Excel и пакета прикладных программ «Statistika 6.0» Результаты: на первом этапе с целью исключения возможного хелатирующего действия соединения СУМ - 55 оценивали его влияние на параметры агрегации эритроцитов в сравнение с ЭГТА. Связывание кальция в среде с помощью хелатора Са2+ - ЭГТА (1 мМ) сопровождалось снижением степени агрегации (р>0.05). Соединение СУМ-55 и пентоксифиллин в комплексе с ЭГТА приводили к незначительному повышению агрегации эритроцитов по сравнению с пробами инкубированными только с ЭГТА, однако полученные данные не являлись статистически достоверными. Для подтверждения полученных данных дополнительно исследовалась агрегация эритроцитов методом световой микроскопии, с последующей видеорегистацией изображения. ЭГТА, соединение СУМ-55 и пентоксифиллин не изменяли показатель агрегации эритроцитов (ПА). Повышение уровня Са2+ в эритроцитах в результате инкубации клеток с кальциевым ионофором А 23187 (3,0 мкМ) существенно стимулировало агрегацию клеток. Так при скорости сдвига 600 с-1 степень агрегации в двух интервалах времени увеличивалась более чем в 5 раза. При низкой скорости - 3 с-1 также в двух временных интервалах данный показатель увеличивался на 90% и практически в 3 раза соответственно (р<0.05). Соединение СУМ-55 при скорости сдвига 600 с-1 снижало степень агрегации эритроцитов, по сравнению с пробами проинкубированными только с ионофором, на 71% (p<0,05) и 61% (М5 и М10), а препарат сравнения на 33% (p<0,05) и 40% (М5 и М10). При уменьшении скорости сдвига до 3 с-1 влияние соединения СУМ-55 на показатель агрегации эритроцитов незначительно уменьшилось и составило 63%, 60% (p<0,05) соответственно временным интервалам - 5 и 10 секунд. Пентоксифиллин снижал степень агрегации эритроцитов на 40% и 46% (М15 и М110) (p>0,05). Выводы: пентоксифиллин и соединение СУМ-55 влияют на регуляцию процессов агрегации эритроцитов действуя на сложные внутриклеточные каскады реакций, обусловленные участием ионизированного кальция, который может активировать различные киназы и фосфатазы, приводя к фосфорилированию или дефосфорилированию ключевых белков мембранного цитоскелета. И полученные данные подтверждаются отсутствием хелатирующей способности пентоксифиллина и соединения СУМ-55.