БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ СТЕРОИДНЫХ ГЛИКОЗИДОВ, ВЫДЕЛЕННЫХ ИЗ ЛУКОВИЦ ALLIUM CYRILLII TEN. (ALLIACEAE)

Аннотация

Изучена биологическая активность стероидных гликозидов, выделенных из луковиц Allium сyrillii Ten . Показано, что они не обладают бактерицидными свойствами, но проявляют высокую фунгицидную и рострегулирующую активность.

Полный текст

Стероидные гликозиды являются обширным классом природных соединений из группы сапонинов, которые в последнее время привлекают все больше внимания исследователей благодаря широкому спектру биологической активности и экологической безопасности [1, 2]. Кроме того, стимуляция роста и фитоиммунитета растений стероидными гликозидами позволяет рассматривать эти вещества как природные адаптогены [3]. Перспективными в плане поиска сапониноносных видов являются растения рода Allium, произрастающие в Крыму, тем более что в литературе данные о стероидных гликозидах большинства крымских луков отсутствуют. Именно поэтому изучение химической структуры и биологической активности стероидных гликозидов представителей семейства Alliaceae является актуальным. Целью настоящей работы является изучение бактерицидной, фунгицидной и рострегулирующей активности двух индивидуальных стероидных гликозидов ряда спиростана Acb1 и Acb2, а также суммы сапонинов Acb, выделенных из луковиц Allium cyrillii, для возможности их дальнейшего практического использования. Первичная оценка антимикробной активности проведена с помощью метода диффузии вещества в агар [4] при концентрациях вещества 0,5 и 0,1 %. Анализ полученных результатов свидетельствует о том, что в исследуемых пределах 29 Фармация и фармакология. № 6 (7), 2014 концентраций зон угнетения роста микроорганизмов не наблюдалось. В результате экспериментов установлено, что тестовые культуры бактерий Escherichia coli и Staphylococcus aureus оказались нечувствительными к действию как суммы, так и индивидуальных стероидных гликозидов в диапазоне концентраций 0,9-500 мкг/см3. В то же время, установлена минимальная бактериостатическая концентрация (800 мкг/см3) для суммы сапонинов по отношению к грам-положительной бактерии Mycobacterium luteum. Таблица 1 - Фунгицидная активность соединений методом диффузии веществ в агар № Код Концентрация, Диаметр зон угнетения роста п/п вещества % микроорганизмов, мм C. tenuis A. niger 1. Acb1 0,5 18 0 0,1 15 0 2. Acb2 0,5 16 0 0,1 14 0 3. Acb 0,5 13 0 0,1 10 0 При использовании метода диффузии вещества в агар определены зоны угнетения роста дрожжевой культуры Candida tenuis: 14-18 мм для соединений Acb1 и Acb2 и для 10-13 мм - для Acb (табл. 1). На основании полученных данных, приведенных в таблице 2, установлено, что соединения Acb1, Acb2 и Acb обладают фунгистатическими свойствами относительно C. tenuis в концентрации 0,9; 7,8; 7,8 мкг/см3, соответственно. Таблица 2 - Установление минимальной фунгицидной и минимальной фунгистатической концентрации соединений методом серийных разбавлений Код Культуры Концентрация соединения, мкг/см3 грибов 500 250 125 62,5 31,2 15,6 7,8 3,9 1,9 0,9 0 (К) Acb C. tenuis - - - - - - - ± ± ± + 1 A. niger + + + + + + + + + + + Acb C. tenuis - - - - - - ± + + + + 2 A. niger + + + + + + + + + + + Acb C. tenuis - ± ± ± ± ± ± + + + + A. niger ± ± ± ± + + + + + + + Примечание: + рост культуры микроорганизма; ± угнетение роста микроорганизма; - отсутствие роста микроорганизма Кроме того, выявлено, что оба индивидуальных соединения обладают высокой фунгицидной активностью по отношению к данной дрожжевой культуре. Так, для гликозида Acb1 минимальная фунгицидная концентрация составляет 7,8, а для Acb2 - 15,6 мкг/см3. Минимальная фунгицидная концентрация для Acb составляет 500 мкг/см3. Тестовая культура плесневого гриба A. niger оказалась резистентной к действию индивидуальных гликозидов в диапазоне концентраций 0,9-500 мкг/см3, в то время как сумма сапонинов Acb проявляла по отношению к A. niger фунгистатический эффект (минимальная фунгистатическая концентрация составляет 62,5 мкг/см3). В результате исследований потенциальной рострегулирующей активности веществ [5] установлено, что в зависимости от концентрации они проявляют как ростстимулирующий, так и ингибирующий эффект (табл. 3). Так, в концентрации 10 и 100 мг/дм3 соединение Acb1 достаточно сильно ингибирует рост корня кресс-салата (на 45 и 65% соответственно), а также проявляет существенный ингибирующий эффект по 30 Фармация и фармакология. № 6 (7), 2014 отношению к стеблю, а в концентрации 1 мг/дм3 - на 21% стимулирует рост стебля этого растения. Кроме того, данное соединение в концентрации 100 мг/дм3 на 45 % по сравнению с контролем угнетает всхожесть тест-растения. Сумма Acb ингибирует рост корня кресс-салата, а вещество Acb2 стимулирует рост стебля растения во всех изученных концентрациях, оказывая на всхожесть несущественное влияние. Таблица 3 - Количественные показатели рострегулирующей активности суммы стероидных гликозидов Линейные размеры частей кресс- № Код Концентрация салата и всхожесть, % к контролю п/п вещества соединения, мг/дм3 корень стебель всхожесть 1. Контроль Растворитель (ДМСО) 100,0 ± 2,0 100,0 ± 1,7 100,0 ± 2,3 2. 100 89,2 ± 1,6 112,8 ± 2,0 108,5 ± 2,3 Acb 10 78 ,5 ± 2,2 100,6 ± 1,7 92,6 ± 2,1 1 67,3 ± 1,9 100,4 ± 2,1 85,2 ± 2,1 3. 100 78,1 ± 1,5 110,6 ± 2,1 96,6 ± 2,4 Acb2 10 100,5 ± 1,9 113,3 ± 1,6 104,3 ± 2,7 1 100,4 ± 2,1 113,2 ± 2,1 105,3 ± 2,5 4. 100 34,5 ± 1,6 60,3 ± 2,0 55,6 ± 2,3 Acb1 10 55,3 ± 2,1 65,4 ± 1,9 88,4 ± 2,6 1 90,5 ± 1,9 120,9 ± 2,1 93,2 ± 2,3 * Статистически вероятные результаты относительно контроля при р ≤ 0,05; объем исследуемой выборки n > 25. Таким образом, в результате исследований установлено, что стероидные гликозиды, выделенные из луковиц A. сyrillii, практически не обладают бактерицидными свойствами в исследованых концентрациях, но проявляют высокую фунгицидную активность и характеризуются рострегулирующими эффектами с избирательным действием.