Pharmacological activity of extracts from plants of cosmos  bipinnatus cav.  species

Evgenia O. Kulichenko; Куличенко Евгения Олеговна; Olga A. Andreeva; Андреева Ольга Андреевна; Elena O. Sergeeva; Сергеева Елена Олеговна; Svetlana S. Sigareva; Сигарева Светлана Сергеевна; Alexander Yu. Terekhov; Терехов Александр Юрьевич; Eduard T. Oganesyan; Оганесян Эдуард Тоникович; Svetlana Yu. Sidorskaya; Сидорская Светлана Юрьевна

doi:10.19163/2307-9266-2022-10-1-82-92

Фармакологическая активность извлечений растений вида cosmos bipinnatus cav.

Авторы: Куличенко Е.О.¹, Андреева О.А.¹, Сергеева Е.О.¹, Сигарева С.С.¹, Терехов А.Ю.¹, Оганесян Э.Т.¹, Сидорская С.Ю.¹
Учреждения:
1. ФГБОУ ВО ВолгГМУ Минздрава России
Выпуск: Том 10, № 1 (2022)
Страницы: 82-92
Раздел: Статьи
URL: https://journals.eco-vector.com/2307-9266/article/view/111724
DOI: https://doi.org/10.19163/2307-9266-2022-10-1-82-92
ID: 111724

Цитировать

Полный текст

Аннотация
Полный текст
Об авторах
Список литературы
Дополнительные файлы
Статистика

Аннотация

Цель. Определить антиоксидантную, противовоспалительную и гиполипидемическую активности извлечений, полученных экстракцией спиртом этиловым 70% трех видов Космеи дваждыперистой.

Материалы и методы. Антиоксидантное действие изучалось in vitro с применением модели железо-индуцированного перекисного окисления липидов в системе лецитиновых липосом. Исследование противовоспалительной активности проводилось на 30-ти крысах-самцах линии «Wistar». В качестве препарата сравнения использовали диклофенак (перорально, доза 13 мг/кг в пересчете на массу взрослого человека). Вещества животным вводили в виде водной суспензии, стабилизированной Твин-80. Для моделирования воспалительного процесса создавали модель «ватной гранулемы». Гиполипидемическую активность исследуемых экстрактов исследовали на 36-ти белых крысах-самцах линии «Wistar». Для изучения гиполипидемической активности исследуемых извлечений применяли твиновую модель для создания гиперлипидемического состояния у крыс, в сыворотке подопытных животных определяли концентрацию общего холестерина и триглицеридов.

Результаты. Проведенные модельные эксперименты позволили сделать вывод о том, что спиртовые извлечения, полученные из высушенных соцветий космеи дваждыперистой сортов «Dazzler», «Rosea» и «Purity» обладают антиоксидантной, противовоспалительной и гиполипидемической видами активности. Установлено, что извлечения из космеи дваждыперистой сортов «Dazzler» и «Rosea» способствуют лучшему снижению накопления перекисных соединений по сравнению с извлечением, полученным из сорта «Purity». Анализ данных по противовоспалительной активности показывает, что все исследуемые объекты достоверно (р=0,05) снижают стадию экссудации по сравнению с контрольной группой животных на 50% (сорт «Purity»), 52% (сорт «Rosea») и 40% (сорт «Dazzler»).

Эксперимент по изучению гиполипидемической активности у контрольной группы животных выявил достоверное, по отношению к значениям интактной группы, увеличение уровня холестерола в сыворотке крови на 78%, а уровня триглицеридов (ТРГ) на 64%. Введение животным извлечений, полученных из космеи дваждыперистой сортов «Purity», «Rosea», «Dazzler», привел к снижению содержания холестерола в сыворотке крови на 44%, 47%, 50%, а триглицеридов на 52%, 52% и 57%, соответственно. Оба показателя достигли уровня нормы и достоверно не отличались от значений у здоровых (интактных) животных.

Заключение. Согласно проведенным исследованиям можно сделать вывод, что спиртовые извлечения, полученные из космеи дваждыперистой, обладают выраженным антиоксидантным, противовоспалительным и гиполипидемическим действиями.

Список сокращений: ДНК – дезоксирибонуклеиновая кислота; ДМСО – диметилсульфоксид; ТРГ – триглицериды; ТБК – тиобарбитуровая кислота; ПОЛ – перекисное окисление липидов.

Ключевые слова

Cоsmos bipinnatus Cav., Космея дваждыперистая, гиполипидемическая активность, холестерин, триацилглицериды, противовоспалительная активность, антиоксидантная активность, ТБК-активные продукт

Полный текст

ВВЕДЕНИЕ

Поиск природных биологически активных соединений является актуальной и трудоемкой задачей. Синтетические лекарственные средства являются фармакологически эффективными, но будучи препаратами широкого спектра действия, зачастую обладают множеством серьезных побочных эффектов. Препараты на основе природных соединений проявляют меньше нежелательных свойств и более эффективны при профилактическом приеме. Использование растений в качестве источника лекарственных средств очень перспективно с точки зрения создания суммарных субстанций, характеризующихся низкой токсичностью и предназначенных для длительного применения при лечении различных заболеваний [1–5].

Родина Космеи дваждыперистой (Cosmos bipinnatus Cav.) – Мексика; в России используется как декоративная культура (растение высотой до 1,5 метров). В зависимости от сорта может иметь белые (сорт «Purity»), розовые (сорт «Rosea») или фиолетовые (сорт «Dazzler) цветки. Цветёт с конца мая и до глубокой осени и очень устойчива к резким изменениям температуры, не подвержена различным инфекциям (рис. 1) [6].

Рисунок 1 – Внешний вид космеи дважды перистой (Cosmos bipinnatus Cav.) разных сортов

Примечание: данные фотографии являются объектами авторского права.

В народной медицине Южной Америки растения рода Cosmos Cav. используют в качестве противомалярийного средства [7]. Африканцы используют их для лечения головной боли и расстройств желудка, а также против постельных клопов и вшей, что указывает на инсектицидные свойства данного растения. В восточной традиционной медицине (Япония, Китай) космея дваждыперистая использовалась в качестве заменителя лотоса, как тонизирующее и бодрящее средство [8].

В традиционной медицине Китая и Мексики это растение используют в качестве гепатопротектора и средства для лечения головной боли, желтухи, прерывистой малярийной лихорадки, спленомегалии, метеоризма [9]. Отмечено также использование растений рода Cosmos как противовоспалительного и противогрибкового средств; описана его эффективность при лечении артрита, язвы желудка и сахарного диабета [10]. Имеются данные о способности водно-спиртовых экстрактов космеи дваждыперистой действовать как антиоксидант и защищать ДНК от повреждения и окисления. Различные извлечения из соцветий растений рода Cosmos оказывают цитотоксические действие против клеточных линий желудочной и колоректальной аденокарциномы, оказывают антидиабетическую активность in vitro [9].

Химический состав всех частей растения, главным образом, представлен полифенолами и компонентами эфирного масла. Так, в траве космеи установили наличие халконов (бутеин, оканин, ланцеолетин) [11], фенолокислот (хлорогеновая и кофейная кислоты), антоцианов (космоцианин), флавоноидов (космозиин, лютеолинглюкуронид, трифолин, изокверцитрин, нелюмбозид) [12], танинов [13], эфирных масел: монотерпенов и сесквитерпенов (E)-β-Оцимен, гермакрен D, сабинин, α-кадинол, α-фарнезин и терпинен-4-ол, β-элемен, β-кариофиллен, гермакрену D и бициклогермакрен [8, 11].

В трубчатых цветках Cosmos bipinnatus Cav. обнаружены следуюшие тритерпеновые спирты: гелианол, тараксерол, β-амирин, циклоартенол, α-амирин, лупеол, 24-метиленециклоартанол. Тритерпеновый состав язычковых цветков растения немного отличается: гелианол, даммарадиенол, β-амирин, тирукалла-7,24-диенол, α-амирин, лупеол, 24-метиленециклоартанол, ψ-тараксастерол, тараксастерол [15] (рис. 2).

Рисунок 2 – Химический состав Cosmos bipinnatus Cav. и прогнозируемая фармакологическая активность основных классов химических веществ

К сожалению, в литературе очень ограничена научная информация, подтверждающая лекарственный потенциал космеи дваждыперистой. Настоящее исследование посвящено изучению биологической активности извлечений из трех сортов данного растения, полученных экстракцией спиртом этиловым 70%.

ЦЕЛЬ. Определение антиоксидантной, противовоспалительной и гиполипидемической активности спиртовых экстрактов трех сортов космеи дваждыперистой (Cosmos bipinnatus Cav.).

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Объекты исследования

Для исследования биологической активности были выбраны извлечения, полученные из соцветий трёх сортов космеи дваждыперистой (Cosmos bipinnatus Cav.): «Purity», «Rosea», «Dazzler».

Получение активных субстанций

Сырье собирали в сентябре 2018 года в Ботаническом саду Пятигорского медико-фармацевтического института – филиала ФГБОУ ВО ВолгГМУ Минздрава России. Сырье высушивали в условиях теневой сушки. Активные субстанции получали путем исчерпывающей трехкратной экстракции 300 граммов сырья спиртом этиловым 70% в колбе с обратным холодильником на кипящей водяной бане. Каждая экстракция длилась 30 минут. Извлечения объединяли, затем фильтровали и после кратковременного кипячения фильтрат сгущали в вакуумном роторно-испарительном аппарате до состояния густого экстракта, после чего остаток сушили в сушильном шкафу при 40–50°С до постоянной массы (рис. 3) [16, 17].

Рисунок 3 – Схема получения активных субстанций из сырья космеи дваждыперистой

Экспериментальные животные

Противовоспалительную и гиполипидемическую активность определяли на крысах-самцах линии «Wistar», полученных из питомника «Рапполово» (г. Санкт-Петербург) и содержащихся в виварии ПМФИ – филиала ФГБОУ ВО «ВолгГМУ» Минздрава России. Вес подопытных животных на момент эксперимента был 250–280 г. Все проводимые манипуляции над животными соответствовали «Правилам Европейской конвенции по защите позвоночных животных» (Страсбург, 1986 г.).

В течение эксперимента в виварии поддерживали оптимальные условия: температура воздуха – 22±2°С, относительная влажность воздуха – 65±5%. Животных размещали в макролоновых клетках (Т3), которые оборудованы углублением для корма и стальными решетками. Для подстилок в клетки насыпали древесные опилки любых нехвойных пород. Животных кормили в соответствии со стандартным пищевым рационом и обеспечивали свободным доступом к корму. Вода водопроводная подавалась в стандартных поилках1.

Препараты сравнения

При испытаниях на антиоксидантную активность, препаратом сравнения служил кверцетин с доказанной активностью. Кверцетин фирмы «Merck» (Германия) в пробу сравнения вводили в концентрации 10 мкг/мл, предварительно растворяя в диметилсульфоксиде ч.д.а. (ДМСО) («Вектон», Россия).

В качестве препарата сравнения при исследовании противовоспалительной активности использовали диклофенак (таблетки, покрытые кишечнорастворимой оболочкой, 50 мг, производитель ООО «Хемофарм», Россия, г. Обнинск, серия 0291017). Препарат сравнения брали в количестве 13 мг/кг в пересчете на массу взрослого человека: доза была рассчитана с учетом межвидового коэффициента пересчета доз2. Вещество вводили в виде водной суспензии, стабилизированной Твин-80 (Ferak Berlin, Германия).

В испытаниях на гиполипидемическую активность в качестве препарата сравнения использовали симвастатин (таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 20 мг, производитель ООО «Озон», Россия, Самарская область, г. Жигулевск, серия 090618), препарат вводили в дозе 1,7 мг/кг, доза была рассчитана с учетом межвидового коэффициента пересчета доз3.

Статистическая обработка

Для оценки достоверности результатов проведенных исследований использовался t-критерий Стьюдента. Критический уровень значимости (р) при проверке статистических гипотез в данном случае принимали, равным 0,05. Объем выборки n=6 в каждой группе животных4.

При проведении эксперимента по исследованию противовоспалительной активности полученные данные обрабатывали статистически и представляли в виде: М±m, где: М – выборочное среднее, m – ошибка среднего.

Дизайн эксперимента

Дизайн исследования представлен на рисунке 4.

Рисунок 4 – Дизайн эксперимента

Антоксидантная активность

Данный вид активности изучался in vitro с применением модели железо-индуцированного перекисного окисления липидов (ПОЛ) в системе лецитиновых (фосфотидилхолиновых) липосом (рис. 4). Липосомы получали из лецитина (БАД МосЛецитин, производитель НИИ биомедицинской химии РАМН (Россия) при концентрации липидов 40 мг/мл по методике, описанной в работах И.П. Кодониди и соавт. [20]; M. Atas и соавт. [21]. Для определения эффективности антиоксидантного действия изучали степень ингибирования интенсивности перекисного окисления липидов лецитиновых липосом в опытных образцах по отношению к контрольным. Об интенсивности ПОЛ липосом судили по накоплению ТБК-активных продуктов за 15 мин инкубации. Реакцию проводили на водяной бане при 37°С с непрерывным барботированием. В опытные образцы вносили исследуемые экстракты в виде растворов в ДМСО. В контрольные пробы добавляли только растворитель. Интенсивность поглощения ТБК-активных продуктов измеряли на СФ-102 (НПО Аквилон, Россия) при 532 нм. Процент торможения ПОЛ рассчитывали по отношению к контрольной пробе по формуле:

$A O A = \frac{∆ Д_{k} - ∆ Д_{о п}}{∆ Д_{к}} \cdot 100 %, ∆ Д_{к} = Д_{к} - Д_{к}^{0}; ∆ Д_{о п} = Д_{о п} - {Д^{0}}_{о п},$ ,(1)

где: АОА – антиоксидантная активность, %; $Д_{к}^{0}$ и $Д_{о п}^{0}$ – оптическая плотность до инкубации; Д_к и Д_оп – оптическая плотность после 15 мин инкубации.

Противовоспалительная активность

Для постановки эксперимента использовали водные суспензии спиртовых извлечений разных сортов космеи дваждыперистой. Для увеличения стабильности суспензии, высушенные извлечения предварительно растирали с каплей Твина-80 (рис. 4).

Исследование противовоспалительной активности проводилось на 30-ти крысах-самцах линии «Wistar». Известно, что механизм действия диклофенака связан со снижением скорости синтеза простагландинов, играющих одну из ведущих ролей в развитии воспалительных процессов [22].

Белых крыс вводили в хлоралгидратный наркоз в дозе 350 мг/кг, затем в области спины выстригали шерсть и брили предполагаемое место последующего разреза. На подготовленном месте с соблюдением правил асептики ножницами производили разрез кожи и подкожной клетчатки длиной около 1 сантиметра. Затем в подкожной клетчатке пинцетом через разрез формировали полость, в которую помещали ватный, предварительно простерилизованный шарик массой до 15 мг. После проведенных манипуляций на рану накладывали два-три шва. Животных пробуждали и оставляли в стандартных условиях на неделю. Через 7 суток у усыпленных хлоралгидратом крыс извлекали шарики вместе с наросшей вокруг гранулярной тканью. Затем шарики взвешивали и высушивали до постоянной массы при 60°С. Разница массы шарика до и после высушивания говорила о величине экссудативной фазы воспаления, разница между массой высушенного шарика и его исходной массой (до 15 мг) говорила о величине пролиферативной фазы.

Экссудацию рассчитывали по формуле:

m₃ = m₁ – m₂, (2)

где: m₃ – экссудация, г; m₁ – масса ватного шарика сразу после извлечения из животного, г; m₂ – масса ватного шарика после высушивания, г.

Пролиферацию рассчитывали по формуле:

m₄ = m₂ – 0,015, (3)

где: m₄ – пролиферация, г; m₂ – масса ватного шарика после высушивания, г; 0,015 – исходная масса ватного шарика, г.

Суспензию исследуемых извлечений вводили в дозе 300 мг/кг. Испытуемые извлечения и препарат сравнения вводили в равных объемах при помощи зондов в желудок в течение 7-ми дней. Контрольной группе животных таким же образом вводили физиологический раствор5.

Гиполипидемическая активность

Гиполипидемическую активность исследуемых экстрактов исследовали на 36-ти белых крысах-самцах линии «Wistar». Животных брали массой 250–180 граммов. Экспериментальные животные находились в таких же условиях, что и в предыдущем эксперименте. Разделение животных проводили на 6 групп: 1 – интактные; 2 – контрольные; 3, 4, 5 – опытные, 6 – группа сравнения. Интакные животные содержались в одинаковых условиях с остальными группами. Контрольная группа животных получала дистиллированную воду в объеме, эквивалентном исследуемым суспензиям. Животным из опытных групп вводили извлечения, полученные из разных сортов космеи дваждыперистой (Cosmos bipinnatus Cav.): 3-я группа получала извлечение из соцветий космеи дваждыперистой сорта «Purity», 4-я группа получала извлечение из соцветий космеи дваждыперистой сорта «Rosea», 5-я группа получала извлечение из соцветий космеи дваждыперистой сорта «Dazzler». Шестая группа животных получала препарат сравнения (рис. 4).

Для изучения гиполипидемической активности исследуемых извлечений применяли твиновую модель для создания гиперлипидемического состояния у крыс: однократное внутрибрюшинное введение Твина-80 в количестве 250 мг на 100 г массы тела животного [8]. Извлечения вводили в дозе 300 мг/кг перорально, ежедневно (в течение недели) при помощи зондов в желудок животным. Цель введения суспензии в течение недели – насыщение биологически активными соединениями органов и тканей животных, которые связаны с обменом липидов. На 7-й день после начала запаивания, животным внутрибрюшинно вводили Твин-80, а через 12 часов после введения осуществляли забой путем декапитации животных. За 12 часов перед эвтаназией животных лишали пищи.

Показатели холестерина и триацилглицеридов определяли на автоматическом биохимическом анализаторе BS-380 (Mindray, Китай).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Антиоксидантная активность

Исследование растительных экстрактов на антиоксидантную активность в моделях на целостных многоклеточных микроорганизмах позволяет оценить только интенсивность влияния веществ на свободно-радикальные процессы и активность звеньев антиоксидантной системы организма, но при этом не всегда удается выяснить механизм их антиоксидантного действия. Опыты in vitrо зачастую дают четкое понимание антиоксидантного действия исследуемых веществ или их совокупности [10, 26].

Метод железо-индуцированного перекисного окисления основывается на способности окислителей, которые содержатся в исследуемых извлечениях, тормозить образование продуктов ПОЛ. Их содержание определяется по способности образовывать с тиобарбитуровой кислотой окрашенные комплексные соединения.

В данном опыте за величину антиоксидантной активности принимали степень ингибирования перекисного окисления липидов лецитиновых липосом вводимыми в реакцию извлечениями. Полученные результаты сравнивали с результатами контрольных проб. В опытные пробирки вносили исследуемые экстракты: 70%-ные извлечения, полученные из космеи дваждыперистой (Cosmos bipinnatus Cav.) трех сортов («Purity», «Rosea», «Dazzler») в концентрации 200 мкг/мл. В контрольные пробы добавляли только растворитель ДМСО. Исходя из полученных результатов, рассчитывали процент снижения перекисного окисления липидов по отношению к контрольной пробе.

В таблице 1 представлены данные о влиянии биологически активных соединений исследуемых извлечений на накопление комплексов продуктов перекисного окисления липидов с тиобарбитуровой кислотой (ТБК-активных продуктов) в конечной концентрации 200 мкг/мл. Данная концентрация была выбрана как наиболее эффективная.

Таблица 1 – Влияние суммы биологически активных веществ спиртовых извлечений из космеи дваждыперистой разных сортов на антиоксидантную активность

Конечная концентрация исследуемых экстрактов, мкг/мл

% снижения ПОЛ, n=3

Сорт «Purity», n=3

Сорт «Rosea», n=3

Сорт «Dazzler», n=3

Кверцетин, n=3

(концентрация 10 мкг/мл)

200

–24,3±1,29

–52,4±2,36

–54,3±3,23

–71±4,24

Примечание: n – количество проб для каждой концентрации

Из таблицы 1 следует, что спиртовые извлечения, полученные из космеи дваждыперистой сортов «Dazzler» и «Rosea», способствуют лучшему снижению накопления перекисных соединений по сравнению с таковыми, полученными из космеи дваждыперистой сорта «Purity». Так, в концентрации 200 мкг/мл спиртовые извлечения, полученные из космеи дваждыперистой сортов «Dazzler» и «Rosea», снижали содержание малонового диальдегида на 54% и 52% соответственно, а спиртовое извлечение, полученное из космеи дваждыперистой сорта «Purity» – всего на 24%. При наращивании дозы исследуемых объектов до 500 мкг/мл значительного снижения перекисного окисления липидов не наступало. Кверцетин в концентрации 10 мкг/мл способствовал подавлению ПОЛ на 71% по сравнению с контролем – ДМСО.

Итак, проведенные модельные эксперименты показали, что исследуемые извлечения обладают антиоксидантным действием. Механизм действия антиоксидантов напрямую зависит от среды, в которой находится субстрат окисления и сам антиоксидант. Механизм действия антиоксидантов в данном опыте, возможно, реализуется путем связывания образующихся свободных липидных радикалов антиоксидантами или образования ими хелатных комплексов с ионами двухвалентного железа [10, 26].

Результаты по изучению антиоксидантной активности показывают, что извлечения, полученные из космеи дваждыперистой трех сортов, проявляют явный антиоксидантный эффект. Активность по отношению к свободным радикалам и способность образовывать с железом хелатные комплексы лежит в основе блокировки индуцирующей способности железа по отношению к свободным радикалам. Наибольшей антирадикальной и антиоксидантной активностью обладают спиртовые извлечения из космеи дваждыперистой (Cosmos bipinnatus Cav.) сортов «Rosea» и «Dazzler». Вероятно, такая особенность обусловлена более богатым полифенольным составом извлечений. Венчики растений этих сортов окрашены в яркие цвета (розовый и фиолетовый), что говорит о возможном высоком содержании антоцианов, известных своей высокой антиоксидатной активностью.

Противовоспалительная активность

Из экспериментальных данных, полученных при исследовании противовоспалительной активности, следует что спиртовые извлечения из космеи дваждыперистой (Cosmos bipinnatus Cav.) сортов «Purity», «Rosea», «Dazzler» снижали стадию экссудации на 50%, 52% и 40% соответственно, достоверно по отношению к контрольной группе животных. Эти показатели сравнивали у опытных групп и контрольной, получавшей диклофенак; в результате достоверных отличий между ними не выявлено. По ограничению экссудации спиртовое извлечение из космеи дваждыперистой сорта «Purity» достоверно не отличается по действию спиртового извлечения из космеи дваждыперистой сорта «Rosea». Извлечение из космеи дваждыперистой сорта «Dazzler» незначительно уступает в снижении данного показателя. Результаты эксперимента представлены в таблице 2.

Таблица 2 – Результаты определения противовоспалительной активности исследуемых извлечений космеи дваждыперистой (Cosmos bipinnatus Cav.) в сравнении с диклофенаком

Объект	Экссудация, мг	Пролиферация, мг
Контроль	210,0 ± 7,1	33,0 ± 2,9
Диклофенак , 13 мг/кг	117,7 ± 8,9* РК<0,005 – 44%	30,0 ± 1,7* РК>0,1 РД>0,1
70%-ное спиртовое извлечение из космеи дваждыперистой сорта «Purity», доза 300 мг/кг	105,3±26,1* РК<0,001 – 50% РД>0,1	65,0±9,0*^ РК<0,001 + 97% РД<0,001 + 117%
70%-ное спиртовое извлечение из космеи дваждыперистой сорта «Rosea», доза 300 мг/кг	101,8±28,3* РК<0,001 – 52% РД>0,1	59,0±4,1 *^ РК<0,001 + 79% РД<0,001 + 97%
70%-ное спиртовое извлечение из космеи дваждыперистой сорта «Dazzler», доза 300 мг/кг	125,7±4,7* РК<0,001 – 40% РД>0,1	69,0±4,1 *^ РК<0,001 +109% РД<0,001 + 130%

Примечание: РК – уровень достоверной разницы по отношению к контрольным значениям; РД – уровень достоверной разницы по отношению к значениям диклофенака; * – достоверно по отношению к контролю; ^ – достоверно по отношению к диклофенаку.

В процессе обсуждения полученных результатов установлено, что все исследуемые вещества достоверно повышали пролиферативную фазу воспаления в сравнении с контрольной группой животных. Лидером по данному показателю стало спиртовое извлечение из космеи дваждыперистой сорта «Dazzler».

Установлено, что на фоне хронического пролиферативного воспаления (модель «ватной гранулемы») исследуемые вещества, в терапевтической и эффективной дозах 300 мг/кг, обладают достоверной пролиферативной и противоэкссудативной активностью, которую можно сопоставить с препаратом сравнения.

В эксперименте по исследованию противовоспалительной активности исследуемых извлечений установлено, что спиртовые извлечения в дозе 200 мкг/мл проявляют отчетливую противовоспалительную активность, вызывают уменьшение экссудации в воспалительном очаге, который вызван флогогенными агентами. Лидером по противовоспалительной активности является спиртовое извлечение из космеи дваждыперистой сорта «Dazzler». Возможно, противовоспалительный эффект исследуемых извлечений обусловлен их способностью снижать степень высвобождения естественных медиаторов воспаления организма из тучных клеток и базофилов.

Гиполипидемическая активность

По данным ВОЗ6 в настоящее время сердечно-сосудистые заболевания стоят в первой тройке причин смертности населения земного шара. Одной из причин возникновения и осложнения течения сердечно-сосудистых заболеваний является нарушение обмена липидов, сопровождающееся атеросклерозом. Во всем мире наблюдается тенденция омоложения сердечно-сосудистых заболеваний.

Современные протоколы лечения нарушений обмена липидов обычно основаны на медикаментозном лечении и предотвращении развития атеросклероза. Обычно препараты для коррекции обмена липидов являются синтетическими соединениями. В настоящее время применяется три основные группы гиполипидемических средств: статины, фибраты, секвестранты жирных кислот. Применение этих групп препаратов обычно приводит к проявлению ряда побочных эффектов: миопатии, астения, анорексия и др. [26].

В работах последних лет часто освещается гиполипидемическое действие растений и разнообразных растительных суммарных препаратов. Доказывается достаточно высокая эффективность таких препаратов сопряженная с низкой токсичностью [24].

Для характеристики степени влияния соединений на липидный профиль крови животных принято определять концентрацию общего холестерина, триацилглицеридов, липопротеидов низкой плотности и липопротеидов высокой плотности. В описанном исследовании в сыворотке крови определяли содержание общего холестерина и триглицеридов (ТРГ).

Введение Твина-80 однократно внутрибрюшинно опытным животным сопровождается выраженной гиперлипидемией. Установлено увеличение общего холестерина сыворотки крови на 78%, а тригрицеридов на 64%. Концентрация общего холестерина и триглицеридов в сыворотке крови интактных животных соответствовала норме (табл. 3).

Таблица 3 – Влияние спиртовых извлечений из космеи дваждыперистой (Cosmos bipinnatus Cav.) разных сортов на показатели липидного обмена в крови на фоне твиновой гиперлипидемии

Группы животных и количество	Показатели
n=6	Холестерин сыворотки крови, ммоль/л	Триглицериды сыворотки крови, ммоль/л
Интактная группа животных	1,8±0,35	1,4±0,28
Контрольная группа животных	3,2±0,28 РИ<0,001;+78%	2,3±0,06 РИ<0,001;+64%
Опытная группа, получавшая 70%-ное спиртовое извлечение космеи дваждыперистой (Cosmos bipinnatus Cav.) сорта «Purity»	1,8±0,25 РК<0,001; –44% РИ>0,01	1,1±0,34 РК<0,001; –52% РИ>0,01
Опытная группа, получавшая 70%-ное спиртовое извлечение космеи дваждыперистой (Cosmos bipinnatus Cav.) сорта «Rosea»	1,7±0,19 РК<0,001; –47% РИ>0,01	1,1±0,30 РК<0,001; –52% РИ>0,01
Опытная группа, получавшая 70%-ное спиртовое извлечение космеи дваждыперистой (Cosmos bipinnatus Cav.) сорта «Dazzler»	1,6±0,35 РК<0,001; –50% РИ>0,01	1.0±0,36 РК<0,001; –57% РИ>0,01
Группа сравнения, получавшая симвастатин	2,0±0,50 РК<0,001; –38% РИ>0,01	1.2±0,22 РК<0,001; –48% РИ>0,01

Примечание: РИ – уровень достоверной разницы по отношению к интактным значениям; РК – уровень достоверной разницы по отношению к контрольным значениям; n – количество животных в группе.

Введение суспензии животным производили в дозе 300 мг/кг. Введение суспензии в такой дозе привело к снижению холестерина в сыворотке крови на 44%, 47%, 50%, при приеме животными извлечений, полученных из космеи дваждыперистой (Cosmos bipinnatus Cav.) сортов «Purity», «Rosea», «Dazzler» соответственно. Также из исследования можно сделать вывод о полной нормализации концентрации холестерина в крови по сравнению со значениями у здоровых (интактных) животных. Уровень триглицеридов крови также снижался на 52%, 52% и 57% в случае применения соответствующих извлечений, полученных из космеи дваждыперистой сортов «Purity», «Rosea», «Dazzler» соответственно и достигло уровня нормы. Значения данных показателей были сопоставимы со значениями препарата сравнения.

При проведении эксперимента по изучению гиполипидемической активности исследуемых извлечений установлено, что введение экстрактов в течение недели перорально животным приводило к достоверному снижению концентрации свободного холестерина в крови и уровня триглицеридов. Степень снижения концентрации холестерина и триглицеридов в сыворотке крови у всех извлечений находится примерно на одном уровне и превышает гиполипидемический эффект препарата сравнения. Наиболее интенсивно концентрацию общего холестерина сыворотки крови снижало 70%-ное спиртовое извлечение космеи дваждыперистой сорта «Dazzler», а триглицеридов – 70%-ные спиртовые извлечения космеи дваждыперистой сорта «Purity» и «Rosea».

Известно, что некоторые тритерпеновые спирты (например, гелианол), содержащиеся в растениях рода Cosmos, обладают противовоспалительной активностью. [15].

Бутеин – халкон, входящий в состав растений рода Cosmos, является мощным антиоксидантом в отношении липидов и липопротеинов низкой плотности (ЛПНП), а также обладает противовоспалительной активностью, способен ингибировать ароматазу и циклооксигеназу [18, 19].

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Согласно проведенным исследованиям можно сделать вывод, что спиртовые извлечения, полученные из космеи дваждыперистой (Cosmos bipinnatus Cav.), обладают выраженными антиоксидантным, противовоспалительным и гиполипидемическим действиями.

Проявление описанных выше видов биологической активности можно связать с химическим составом космеи дваждыперистой. В литературных источниках и наших собственных исследованиях, проведенных ранее, показано, что химический состав космеи дваждыперистой включает полифенолы (катехины, антоцианы, флавоноиды), органические кислоты, аминокислоты и полисахариды. Проявление антиоксидантных, противовоспалительных и гиполипидемических свойств 70%-ных спиртовых извлечений из космеи дваждыперистой можно связать с наличием в них описанных классов биологически активных соединений.

Проведенное исследование и данные, полученные в ходе него, позволяют рекомендовать космею дваждыперистую трех сортов («Purity», «Rosea», «Dazzler») как перспективный источник биологически активных соединений с широким спектром активности.

ФИНАНСОВАЯ ПОДДЕРЖКА

Данное исследование не имело финансовой поддержки от сторонних организаций.

КОНФЛИКТ ИНТЕРЕСОВ

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. Все иллюстрации, рисунки и фотографии выполнены авторским коллективом и носят оригинальных характер, а также не нарушают ничьих авторских прав.

ВКЛАД АВТОРОВ

Е.О. Куличенко – сбор растительного материала для эксперимента, проведение эксперимента и сбор данных, анализ и интерпретация полученных данных, статистическая обработка полученных результатов, анализ литературы, написание рукописи; О.А. Андреева – сбор растительного материала для эксперимента; Е.О. Сергеева – участие в проведении эксперимента и сбор данных, участие в написании рукописи; С.С. Сигарева –участие в проведении эксперимента; А.Ю. Терехов – участие в планировании исследования и разработке концепции и дизайна исследования; Э.Т. Оганесян – планирование исследования, участие в разработке концепции и дизайна исследования, проверка критически важного интеллектуального содержания, окончательное утверждение для публикации рукописи; С.Ю. Сидорская – статистическая обработка полученных результатов.

1 Directive 2010/63 / EU of the European Parliament and of the Council on the protection of animals used for scientific purposes, September 22, 2010.

2 Миронова А.Н. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. – М.: Гриф и К, 2013. – 944 с.

3 Там же.

4 Гланц С. Медико-биологическая статистика. – М.: Практика, 1998. – 459 с.

5 Меньшиков В.В. Лабораторные методы исследования в клинике. – М.: Медицина, 1987. – 365 с.

6 Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ). 10 ведущих причин смерти в мире. – [Электронный ресурс]. – Режим доступа: https://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/the-top-10-causes-of-death.