Отправить статью по E-mail Создание удвоенных гаплоидов Oryza sativa L. с геном устойчивости риса к пирикуляриозу Pi-b на российском Дальнем Востоке
- Авторы: Илюшко М.В.1, Гученко С.С.1
-
Учреждения:
- Федеральный научный центр агробиотехнологий Дальнего Востока им. А. К. Чайки
- Выпуск: № 2 (2025)
- Страницы: 27-31
- Раздел: Растениеводство, защита и биотехнология растений
- URL: https://journals.eco-vector.com/2500-2627/article/view/684083
- DOI: https://doi.org/10.31857/S2500262725020058
- EDN: https://elibrary.ru/DEHYIN
- ID: 684083
Цитировать
Полный текст
Аннотация
Исследование проводили с целью получения удвоенных гаплоидов с геном Pi-b для селекции риса. В результате гибридизации между дальневосточными сортами и образцом Oxy 2x (носитель гена Pi-b) создано 13 гибридов F1 в шести гибридных комбинациях: Садко×Oxy 2x, Луговой×Oxy 2x, Дарий 23×Oxy 2x, Алмаз×Oxy 2x, удвоенный гаплоид (Дон 4237×Долинный)×Oxy 2x, Ханкайский 429×Oxy 2x. Для перевода в константное гомозиготное состояние исходных растений доноров F2 применяли технологию андрогенеза in vitro. Предварительно отобраны 35 гибридных растений, несущих аллель устойчивости гена Pi-b. В культуру in vitro ввели 10246 пыльников риса. Каллусообразование наблюдали у 25 из 35 гибридов F2. Самое высокое калусообразование отмечали у гибридных растений Луговой×Oxy 2x – 9,33 % и Ханкайский 429×Oxy 2x – 27,50 %, в среднем по всей выборке оно было низким – 2,45 %, что нехарактерно для дальневосточных генотипов. Регенерацию наблюдали на каллусах 7 гибридов риса 4 гибридных комбинаций: Дарий 23×Oxy 2x, Садко×Oxy 2x, Ханкайский 429×Oxy 2x и Луговой×Oxy 2x. По результатам ПЦР-анализа из 63 удвоенных гаплоидов отобрано 33 растения с аллелем устойчивости гена Pi-b. На вегетационной площадке посеяли 44 линии удвоенных гаплоидов, из которых 3 не взошли. Коллекционный образец Oxy 2x, обладающий прочным креплением зерновки на оси метелки, вступая во взаимодействие с локусами других сортов, ответственных за этот признак, дает осыпающийся в разной степени фенотип в гомозиготном состоянии у удвоенных гаплоидов: 11 линий со средней степенью осыпаемости и 30 сильноосыпающихся линий. В целом общий выход исходного селекционного материала для последующих отборов в полевых условиях весьма ограничен и бесперспективен из-за осыпаемости зерновки.
Ключевые слова
Полный текст
Дальневосточная зона рисосеяния характеризуется значительной фитопатологической напряженностью вследствие влажного муссонного климата, способствующего распространению возбудителей заболеваний Oryza sativa L. [1]. Pyricularia oryzae Cav. относят к числу наиболее вредоносных патогенов риса во всем мире [2, 3]. На Дальнем Востоке России отмечают обширный расовый состав пирикулярии [1, 4]. Этому способствовала исторически сложившаяся ситуация: первые сорта риса на территорию Приморского края завезли из Кореи и Японии, на них впервые болезнь была выявлена в 1926 г. Позднее она распространилась и на другие сорта. Закрепившиеся расы патогена на современном этапе рисосеяния стали пополняться из несортовых китайских посевов культуры [5], нарушая сложившийся на территории региона состав P. oryzae.
Последние сорта риса дальневосточной селекции, внесенные в государственный реестр селекционных достижений, обладают средней и высокой степенью устойчивости к пирикуляриозу. В их генотипе идентифицированы гены Pi-ta2 и Pi-z, ответственные за резистентность к пирикуляриозу, в моногенном состоянии [6]. На сегодняшний день в регионе наблюдают снижение устойчивости сортов O. sativa к патогену. Селекция риса не успевает за постоянно расширяющимся расовым составом P. oryzae [1]. Таким образом, необходимы новые высокоустойчивые к пирикуляриозу сорта культуры.
В мире известно более ста генов устойчивости к P. oryzae [3, 7, 8]. К наиболее эффективным генам для дальневосточной зоны рисосеяния относят Pi-b [9]. Он также актуален для селекции в сопредельных провинциях Китая [10, 11], откуда поступают семена для несортовых посевов культуры. Кроме того, пирамидирование генов устойчивости с участием Pi-b позволяет создавать иммунные селекционные линии и сорта в разных странах [12, 13, 14]. Интрогрессия Pi-b в дальневосточные сорта может повысить устойчивость риса и способствовать ее длительному сохранению.
На Дальнем Востоке России O. sativa культивируют в пределах ареала с минимально допустимой суммой эффективных температур. Для выращивания риса на этой территории необходимы скороспелые сорта с периодом вегетации до 110 дней. Однако большинство образцов, используемых в качестве доноров различных генов устойчивости, позднеспелые [12, 14, 15]. Это затрудняет как гибридизацию, так и отбор форм для селекции. Все растения коллекционного образца Oxy 2x (США) несут аллель устойчивости гена Pi-b [16]. Кроме того, он полиморфен по гену Pi-ta. По результатам 6 лет изучения этот образец слабо поражают дальневосточные расы пирикулярии [9]. На Дальнем Востоке при использовании рассадной технологии выращивания растений в защищенном грунте с последующей пересадкой в условия вегетационной площадки он созревает за 120…125 дней, а также уступает районированным сортам по продуктивности растения (1,0 г) и массе 1000 зерен (21,3 г). Oxy 2x представляется перспективным для использования в селекции на устойчивость к пирикуляриозу.
Андрогенез in vitro широко применяют в селекции O. sativa с шестидесятых годов прошлого столетия. Это позволяет в течение одного поколения перевести гетерозиготные гибридные растения в гомозиготные удвоенные гаплоиды (DH), что упрощает отбор по фенотипу лучших растений без риска расщепления в последующих поколениях [17, 18, 19]. Маркер-ориентированная селекция растений (MAS) способствовала усилению работ в андрогенезе in vitro, так как отбор удвоенных гаплоидов проводят по целевым генам интереса с использованием молекулярных маркеров [17, 20, 21].
Цель исследования – создать удвоенные гаплоиды риса O. sativa с геном Pi-b из гибридов с участием образца Oxy 2x.
Методика. В результате гибридизации между дальневосточными сортами и образцом Oxy 2x создано 13 гибридов шести гибридных комбинаций: четыре растения Садко×Oxy 2x – С×О(1), С×О(2), С×О(3), С×О(4); шесть растений Луговой×Oxy 2x – Л×О(1), Л×О(2), Л×О(3), Л×О(4), Л×О(5), Л×О(6); по одному растению комбинаций Дарий 23×Oxy 2x – Д23×О; Алмаз×Oxy 2x – А×О; удвоенный гаплоид (Дон 4237×Долинный)×Oxy 2x – DH×О; Ханкайский 429×Oxy 2x – Х429×О. Андрогенетические ответы in vitro гибридов F1 отсутствовали [9], поэтому была предпринята попытка получить удвоенные гаплоиды из гибридов F2.
Для проведения исследований по 3…5 семян каждого гибрида F1 в 2023 г. выращивали в климатической камере при температуре 21 °C, влажности – 60 %, режиме освещения – до 15000 лкс, продолжительности дня – 16 ч. В фазе 3…4 листьев гибридных растений была проведена идентификация генов устойчивости Pi-b и Pi-ta методом ПЦР анализа. ДНК выделяли из свежих листьев методом высаливания [22], ПЦР анализ и визуализацию результатов осуществляли по действующей методике [12].
Для культивирования in vitro отбирали гибриды с аллелем устойчивости Pi-b (гетерозиготы и гомозиготы). Кроме того, в десяти растениях трех гибридных комбинаций (С×О, Л×О и DH×О) было подтверждено наличие аллелей устойчивости гена Pi-ta (гетерозиготы и гомозиготы). Каждому растению присвоен двузначный номер (табл. 1). Всего для инокуляции пыльников in vitro отобрали 35 гибридных растений F2. Их пыльники, каллусы и регенеранты культивировали по методике, опубликованной ранее [16]. Все полученные растения-регенеранты разделили по морфологическим признакам на четыре группы: гаплоиды – Н (стерильные растения с очень мелкими цветками); удвоенные гаплоиды – DH (растения с семенами); растения без семян – Ae (сформировали цветки нормального или большего размера, но не образовывали семена на двух и более метелках); растения, погибшие на ранних этапах роста и развития – d. Под линией понимали все растения, полученные с каллусов одного пыльника.
Табл. 1. Андрогенетические ответы in vitro гибридов F2 Oryza sativa L., полученных с участием образца Oxy 2x
Гибридная комбинация, номер растения | Число пыльников, шт. | Каллусообразование, % | Число регенерантов, шт. | Число регенерантов разных групп, шт.* | |||||
общее | на пыльник | на каллус | H | DH | Ae | d | |||
Д23×О 2-1 | 418 | 0,24 | 0 | – | – | – | – | – | – |
Д23×О 2-2 | 96 | 0 | – | – | – | – | – | – | – |
Д23×О 2-3 | 414 | 5,56 | 59 | 0,14 | 2,57 | 16 | 1 | 30 | 12 |
С×О(1) 10-1 | 166 | 0 | – | – | – | – | – | – | – |
С×О(1) 10-2 | 640 | 2,81 | 75 | 0,12 | 4,17 | 25 | 17 | 6 | 27 |
С×О(1) 10-3 | 266 | 1,50 | 0 | – | – | – | – | – | – |
С×О(2) 1-1 | 616 | 0 | – | – | – | – | – | – | – |
С×О(2) 1-3 | 178 | 3,93 | 0 | – | – | – | – | – | – |
С×О(3) 4-1 | 320 | 0 | – | – | – | – | – | – | – |
С×О(3) 4-2 | 346 | 2,60 | 23 | 0,07 | 2,56 | 18 | 3 | 2 | 0 |
С×О(3) 4-3 | 414 | 4,11 | 0 | – | – | – | – | – | – |
С×О(4) 7-3 | 314 | 0 | – | – | – | – | – | – | – |
А×О 8-1 | 312 | 2,24 | 0 | – | – | – | – | – | – |
А×О 8-2 | 340 | 0,88 | 0 | – | – | – | – | – | – |
DH×O 5-1 | 126 | 0 | – | – | – | – | – | – | – |
DH×O 5-2 | 254 | 1,58 | 0 | – | – | – | – | – | – |
DH×O 5-3 | 202 | 1,49 | 0 | – | – | – | – | – | – |
Х429×О 3-1 | 280 | 2,86 | 0 | – | – | – | – | – | – |
Х429×О 3-3 | 160 | 27,5 | 168 | 1,05 | 3,82 | 114 | 31 | 0 | 23 |
Л×О(1) 9-2 | 158 | 0,63 | 0 | – | – | – | – | – | – |
Л×О(1) 9-3 | 240 | 3,33 | 45 | 0,19 | 5,63 | 36 | 5 | 0 | 4 |
Л×О(2) 6-1 | 286 | 0,35 | 0 | – | – | – | – | – | – |
Л×О(2) 6-2 | 190 | 0 | – | – | – | – | – | – | – |
Л×О(3) 13-1 | 200 | 3,50 | 79 | 0,40 | 11,29 | 72 | 6 | 0 | 1 |
Л×О(3) 13-2 | 150 | 9,33 | 0 | – | – | – | – | – | – |
Л×О(3) 13-3 | 138 | 0 | – | – | – | – | – | – | – |
Л×О(4) 14-1 | 514 | 0,20 | 0 | – | – | – | – | – | – |
Л×О(4) 14-2 | 524 | 1,72 | 5 | 0,95 | 0,56 | 2 | 0 | 0 | 3 |
Л×О(4) 14-3 | 148 | 3,38 | 0 | – | – | – | – | – | – |
Л×О(5) 11-1 | 488 | 0,82 | 0 | – | – | – | – | – | – |
Л×О(5) 11-2 | 206 | 2,91 | 0 | – | – | – | – | – | – |
Л×О(5) 11-3 | 294 | 1,36 | 0 | – | – | – | – | – | – |
Л×О(6) 12-1 | 320 | 0,94 | 0 | – | – | – | – | – | – |
Л×О(6) 12-2 | 250 | 0 | – | – | – | – | – | – | – |
Л×О(6) 12-3 | 278 | 0 | – | – | – | – | – | – | – |
Сумма | 10246 | – | – | – | – | 283 | 63 | 38 | 70 |
Максимальное значение | 640 | 27,50 | 168 | 1,05 | 11,29 | 114 | 31 | 30 | 27 |
Среднее значение | 292,74 | 2,45 | 12,97 | 0,08 | 0,87 | 8,09 | 1,80 | 1,09 | 2,00 |
Стандартное отклонение | 139,02 | 4,80 | 34,41 | 0,24 | 2,29 | 23,26 | 5,96 | 5,14 | 6,16 |
*Н – гаплоиды, DH – удвоенные гаплоиды, Ae – растения без семян (сформировали цветки нормального или большего размера, но не образовывали семена на двух и более метелках), d – растения, погибшие на ранних этапах роста и развития.
Удвоенные гаплоиды DH, созревшие в культуральной комнате, в количестве 44 линий высевали в 2024 г. на вегетационной площадке в пластиковые сосуды объемом 460 л (199×78×39 см), наполненные почвой. Использовали почву, характерную для рисовых полей, – лугово-бурую тяжелого механического состава с содержанием органического вещества 2,7 % (ГОСТ 26213-92), подвижных форм фосфора и калия – соответственно 35,0 мг/кг и 116,0 мг/кг почвы (ГОСТ Р 54650-2011), легкогидролизуемого азота – 60,0 мг/кг (ГОСТ 26483-85), рН солевой вытяжки – 6,0.
Посев проводили с междурядьями 15 см в типичные для региона сроки – 28 мая, режим орошения – укороченное затопление. Температура воздуха вегетационного периода соответствовала биологическим требованиям культуры, превышая среднемноголетние показатели на 0,2…1,8 °C. Отклонения по сумме осадков от нормы в мае–июне составляло +31,7…62,9 мм, в августе–сентябре – 14,6…54,3 мм.
Математическую обработку данных (среднее значение признака – M, стандартное отклонение – SD, коэффициент корреляции – r, вычленение максимального значения – max) проводили в программе Statistica V 10.
Результаты и обсуждение. В культуру in vitro ввели 10246 пыльников риса, от 96 до 640 шт. на гибридное растение (см. табл. 1). Каллусообразование наблюдали у 25 из 35 гибридов. Каллус сформировался на пыльниках всех гибридных комбинаций. Наибольшее каллусообразование отмечали на гибридных растениях F2 Л×О(3) 13–2 – 9,33 % и Х429×О 3–3 – 27,50 %. Тем не менее, в среднем по всем растениям всех комбинаций оно было низким – 2,45 %, что нехарактерно для дальневосточных генотипов. Обычно величина этого показателя превышает 5…10 %, достигая для отдельных генотипов 55 % [23]. При проведении первоначальной работы на гибридах F1. Среднее каллусообразование не превышало 1 %, а максимальные величины наблюдали также на растениях Л×О(3) – 3,08 % и Х429×О – 3,36 % [9].
Регенерацию наблюдали на каллусах семи гибридов риса F2 четырех гибридных комбинаций: Д23×О, С×О, Х429×О и Л×О (см. табл. 1). При этом на гибридах F1 она полностью отсутствовала [9]. Для культуры пыльников in vitro чаще используют гибриды F1, так как это позволяет фиксировать продукты рекомбинации родительских геномов на самом раннем этапе. Однако андрогенетические ответы in vitro выше у гибридов F2 [17]. В нашем эксперименте регенерацию удалось получить только на F2 – всего 454 регенеранта. По морфологическим признакам из них 62,3 % были гаплоидами и только 13,9 % удвоенными гаплоидами. Таким образом, выход удвоенных гаплоидов на пыльник был равен 0,006, на каллус – 0,30. В других экспериментах на дальневосточных гибридах величины этих показателей могли достигать 0,06 и 3,67 соответственно [23]. Основным ограничивающим фактором остается интенсивность каллусообразования. Высокая каллусирующая способность пыльников O. sativa необходима не просто для увеличения доли удвоенных гаплоидов, но и для повышения их генетического разнообразия. При высоком полиморфизме DH возрастает вероятность отбора селекционно значимых образцов [16].
Интенсивность каллусообразования не считают абсолютным предиктором регенерационной способности риса, то есть во многих случаях каллус остается неморфогенным. Например, гибридное растение Л×О(3) 13–2 было вторым из всей выборки по величине каллусообразование (9,33 %), но регенерация отсутствовала. И все-таки вероятность морфогенеза у гибридов риса возрастает по мере повышения интенсивности каллусобразования: корреляционная зависимость между величиной показателя каллусообразования и числом регенерантов составляла r=0,80 (n=25 гибридных растений, образовавших каллус, р=0,05).
Андрогенетические ответы in vitro вида O. sativa в значительной степени зависят от генотипа растений доноров [18, 19, 24]. Это один из лидирующих факторов, ограничивающих успех культивирования пыльников in vitro, при создании удвоенных гаплоидов для селекционных целей. Проявляется он на разных этапах культивирования – отсутствие каллусообразования, морфогенеза, гибель регенерантов (альбинизм и/или нежизнеспособность зеленых растений), низкое спонтанное удвоение хромосом. Слабые андрогенетические ответы in vitro связаны с высокой стерильностью колосков гибридных растений доноров [9]. Причинами стерильности гибридов O. sativa считают определенные комбинации аллелей генов широкой совместимости и такие генетические события, как вставки, делеции, замены нуклеотидов [25]. Эти же факторы могут служить ограничителями в культуре пыльников in vitro. Известны попытки усовершенствования методики удвоения хромосом гаплоидов ex vitro путем использования антитубулиновых химических препаратов для увеличения числа удвоенных гаплоидов [26]. Однако они не привели к существенному увеличению числа DH. Видимо, дело не в протоколах испытаний, а в генотипической предрасположенности к нормальному прохождению этапов формирования микроспор, что в конечном счете сказывается на завязываемости зерновок гибридных растений, андрогенетических ответах in vitro и интенсивности спонтанного удвоения хромосом.
По результатам ПЦР анализа в нашем исследовании 33 из 63 удвоенных гаплоидов риса обладали аллелем устойчивости гена Pi-b, но ни в одном из них аллеля устойчивости Pi-ta не обнаружено.
Удвоенные гаплоиды, выращенные на вегетационной площадке, оказались непригодными для селекционных отборов: часть из них не взошла, остальные оказались в сильной или средней степени осыпающимися (табл. 2). В прежние годы мы предпринимали попытки интрогрессии гена Pi-b в дальневосточные сорта риса. Во всех случаях отмечали отсутствие каллусообразования в культуре пыльников in vitro или его низкое значение. Исключение составил один из трех гибридов F2 Рассвет×Oxy 2x, было получено 390 осыпающихся удвоенных гаплоидов риса. Семена 13 растений гибрида F2 Рассвет×Oxy 2x оказались сильно осыпающимися, 16 растений – осыпающимися в средней степени [16].
Табл. 2. Осыпаемость удвоенных гаплоидов Oryza sativa L., полученных из гибридов F2 с участием образца Oxy 2x
Гибрид | Каллусная линия | Число удвоенных гаплоидов | Фенотип |
Д23×О 2-3 | 6.2.1 | 1 | сильно осыпающиеся |
Х429×О 3-3 | 102.1.1 | 1 | сильно осыпающиеся |
220.2.1 | 13 | сильно осыпающиеся | |
С×О(1) 10-2 | 76.1.1 | 9 | сильно осыпающиеся |
219.1.1 | 5 | 3 не взошли, 2 сильно осыпающиеся | |
С×О(3) 4-2 | 108.2.1 | 1 | сильно осыпающиеся |
141.1.1 | 3 | сильно осыпающиеся | |
Л×О(1) 9-3 | 94.1.1 | 5 | среднеосыпающиеся |
Л×О(3) 13-1 | 116.1.1 | 6 | среднеосыпающиеся |
Среди селекционеров долгое время бытовало мнение, что вести селекцию по признаку осыпаемости риса легко. Считали, что его контролирует один ген Th: доминантный аллель отвечает за осыпаемость, рецессивный – за трудное обмолачивание [27]. Однако тот факт, что методы объективной оценки сортовой разнокачественности осыпаемости O. sativa [27] до сих пор не разработаны, свидетельствует о множестве переходных форм, то есть об отсутствии дискретности признака. В исследованиях последних лет показано, что за прочность крепления зерновки риса подвида japonica отвечает ряд локусов количественных признаков (qSH1, qSH3, sh4, qCSS3, qCSS9) [28, 29], в первую очередь qSH1 и sh4. Однонуклеотидная замена в локусе qSH1 и рецессивное состояние локуса sh4 обеспечивают отсутствие осыпаемости. Различные комбинации других локусов регулируют этот признак в сторону осыпаемости. Все это свидетельствует о сложной природе наследуемости признака. Сам коллекционный образец Oxy 2x характеризуется прочным креплением зерновки на оси метелки, однако, вступая во взаимодействие с локусами других сортов, ответственных за этот признак, дает осыпающийся в разной степени фенотип в гомозиготном состоянии у DH. Таким образом, образец O. sativa Oxy 2x представляет слабый интерес для селекционной работы в дальневосточных условиях. Возможно, беккроссирование или использование сложных гибридов будет способствовать улучшению признака прочности крепления зерновки с одновременной передачей аллеля устойчивости гена Pi-b. Кроме того, встречаются коллекционные образцы и линии удвоенных гаплоидов с трудновымолачиваемой зерновкой. Скрещивание с таким рисом может дать оптимальное проявление прочности крепления зерновки.
Кроме того, Oxy 2x перспективен для изучения природы признака осыпаемости, его генетической основы. Современные исследования в качестве осыпающихся материнских форм предусматривают привлечение природных видов риса, например, Oryza rufipogon Griff или Oryza nivara Sharma et Shastry, сорта O. sativa subsp. indica Kato. Рис подвида indica более склонен к осыпанию, чем O. sativa subsp. japonica Kato [28, 29]. Oxy 2x фенотипически относится к подвиду риса japonica. Его использование в качестве материнской формы в целевых скрещиваниях по выявлению особенностей наследуемости прочности крепления зерновки поможет расширить представление о локусах, ответственных за признак осыпаемости у вида O. sativa. Возможно геномное редактирование участков ДНК для снижения осыпаемости, что, в конечном счете, позволяет повысить урожайность риса [29].
Выводы. Использование в андрогенезе in vitro в качестве растений доноров гибридов F2 между дальневосточными сортами O. sativa и коллекционным образцом Oxy 2x позволяет получить весьма ограниченное количество удвоенных гаплоидов из-за низкого каллусообразования и регенерации: из 10246 пыльников образовалось 63 удвоенных гаплоида; только в 33 подтверждено наличие аллеля устойчивости гена Pi-b. Полученные удвоенные гаплоиды характеризуются средней и сильной степенью осыпаемости зерновки. Таким образом, общий выход исходного селекционного материала для последующих отборов в полевых условиях весьма ограничен и бесперспективен из-за осыпаемости зерновки.
ФИНАНСИРОВАНИЕ РАБОТЫ.
Работа выполнена в рамках государственного задания по теме «Получить высокопродуктивные гибриды и сорта сельскохозяйственных культур устойчивые в био- и абиострессорам Дальневосточного региона», рег. № НИОКТР 125020701697-8.
СОБЛЮДЕНИЕ ЭТИЧЕСКИХ СТАНДАРТОВ.
В данной работе отсутствуют исследования человека и животных.
КОНФЛИКТ ИНТЕРЕСОВ.
Авторы работы заявляют отсутствие конфликта интересов.
Об авторах
М. В. Илюшко
Федеральный научный центр агробиотехнологий Дальнего Востока им. А. К. Чайки
Автор, ответственный за переписку.
Email: ilyushkoiris@mail.ru
кандидат биологических наук
Россия, 692539, Приморский край, пoc. Тимирязевский, ул. Воложенина, 30С. С. Гученко
Федеральный научный центр агробиотехнологий Дальнего Востока им. А. К. Чайки
Email: ilyushkoiris@mail.ru
Россия, 692539, Приморский край, пoc. Тимирязевский, ул. Воложенина, 30
Список литературы
- Ковалевская В. А., Лелявская В. Н., Ковалева А. А. Устойчивость риса к пирикуляриозу в Приморском крае // Защита и карантин растений. 2013. № 5. С. 24–26.
- Molecular breeding strategy and challenges towards improvement of blast disease resistance in rice crop / S. Ashkani, M. Y. Rafii, M. Shabanimofrad, et al. // Frontiers in Plant Science. 2015. Vol. 5. Article 886. URL: https://www.frontiersin.org/journals/plant-science/articles/10.3389/fpls.2015.00886/full (дата обращения: 18.12.2021). doi: 10.3389/fpls.2015.00886.
- Current status of conventional and molecular interventions for blast resistance in rice / D. Srivastava, M. Shamim, M. Kumar, et al. // Rice Science. 2017. Vol. 24. No. 6. P. 299–321. doi: 10.1016/j.rsci.2017.08.001.
- Ecology of rice viruses in the south of the Russian Far East / Y. G. Volkov, N. N. Kakareka, V. F. Tolkach, et al. // Rice Research. 2024. Vol. 12. Article 409. URL: https://www.omicsonline.org/open-access/ecology-of-rice-viruses-in-the-south-of-the-russian-far-east.pdf (дата обращения: 19.02.2025). doi: 10. 4172/2375-4338.1000409.
- Клименкова Т. Г., Михайлик Т. А., Лелявская В. Н. Оценка сортообразцов и сортов риса на устойчивость к пирикуляриозу // Дальневосточный аграрный вестник. 2018. № 4(48). С. 67–74. doi: 10.24411/1999-6837-2018-14082.
- Устойчивость образцов конкурсного сортоиспытания и сортов риса Oryza sativa L. дальневосточной селекции к пирикуляриозу / М. В. Илюшко, С. С. Гученко, В. Н. Лелявская, и др. // Российская сельскохозяйственная наука. 2022. № 1. С. 19–22. doi: 10.31857/S2500262722010045.
- Comprehensive evaluation of resistance effects of pyramiding lines with different broad-spectrum resistance genes against Magnaporthe oryzae in rice (Oryza sativa L.) / Y. Wu, N. Xiao, Y. Chen, et al. // Rice. 2019. Vol. 12. Article 11. URL: https://thericejournal.springeropen.com/articles/10.1186/s12284-019-0264-3 (дата обращения: 15.04.2020). doi: 10.1186/s12284-019-0264-3.
- Molecular screening of blast resistance genes in rice germplasms resistant to Magnaporthe oryzae / Y. Loang, B. Yan, Y. Peng, et al. // Rice Science. 2017. Vol. 24. No. 1. P. 41–47. doi: 10.1016/j.rsci.2016.07.004.
- Влияние фертильности пыльцы гибридных растений доноров на андрогенез in vitro риса Oryza sativa L. / М. В. Илюшко, С. С. Гученко, В. Н. Лелявская и др. // Рисоводство. 2023. № 2(59). С. 6–12. doi: 10.33775/1684-2464-2023-59-2-6-12.
- Comparison of pathogenicity of Pyricularia oryzae under different genetic backgrounds / J. Ma, G. Zhang, A. Xin, et al. // Acta Agronomica Sinica. 2015. Vol. 41. No. 12. P. 1791–1801. doi: 10.3724/SP.J.1006.2015.01791.
- Distribution research of blast resistance genes Pita, Pib, Pi9 and Pikm in blast-resistance rice resources / X. Dai, Y. Yan, L. Zhou, et al. // Life Science Research. 2012. Vol. 16. No. 4. P. 340–356. doi: 10.16605/j.cnki.1007-7847.2012.04.009.
- Идентификация генов устойчивости к пирикуляриозу риса Pi-1, Pi-2, Pi-33, Pi-40, Pi-ta, Pi-b / О. В. Шумская, Н. Н. Вожжова, О. С. Жогалева, и др. // Зерновое хозяйство России. 2023. Т. 15. № 5. С. 30–38. doi: 10.31367/2079-8725-2023-88-5-30-38.
- Identification of rice blast resistance genes using international monogenic differentials / J. C. Wang, Y. Jia, J. W. Wen, et al. // Crop Protection. 2013. Vol. 45. P. 109–116. doi: 10.1016/j.cropro.1012.11.020.
- Blast resistance R genes pyrtamiding in temperate japonica rice / G. Orasen, R. Greco, E. Puja, et al. // Euphytica. 2020. Vol. 214. Article 40. URL: https://link.springer.com/article/10.1007/s10681-020-2575-2 (дата обращения: 22.01.2021). doi: 10.1007/s10681-020-2575-2.
- Genetic improvement for blast resistance in high-yielding cold-tolerant rice (Oryza sativa L.) cultivar Himalaya 741 by marker-assisted backcross breeding / R. Rathour, R. Kumar, K. Thakur, et al. // 3 Biotech. 2022. Vol. 12. Article 165. URL: https://link.springer.com/article/10.1007/s13205-022-03244-w (дата обращения: 25.05.2023). doi: 10.1007/s13205-022-03244-w.
- Илюшко М. В., Ромашова М. В., Гученко С. С. Оценка частоты внутрикаллусной изменчивости андрогенных удвоенных гаплоидов риса (Oryza sativa L.) по генам устойчивости к пирикуляриозу // Сельскохозяйственная биология. 2023. Т. 58. № 3. С. 554–566. doi: 10.15389/agrobiology.2023.3.554rus.
- Sarao N. K., Gosal S. S. In vitro androgenesis accelerated breeding in rice // Biotechnology of crop improvement. Switzerland: Springer, Cham. Springer International Publishing AG, 2018. Vol. 1. P. 407–435. doi: 10.1007/978-3-319-78283-6.
- Strategies and prospects of haploid induction in rice (Oryza sativa) / M. Kyum, H. Kaur, A. Kamboj, et al. // Plant Breeding. 2021. Vol. 141(2). URL: https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/pbr.12971 (дата обращения: 11.12.2021). doi: 10.1111/pbr.12971.
- Exploring factors affecting anther culture in rice (Oryza sativa L.) / S. K. Tripathy, D. Swain, P. M. Mohapatra, et al. // Journal of Applied Biology and Biotechnology. 2019. Vol. 7 (02). P. 87–92. doi: 10.7324/JABB.2019.70216.
- Creation of rice doubled haploids resistant to prolonged flooding using anther culture / P. Kostylev, N. Kalinina, N. Vozhzhova, et al. // Plants. 2023. Vol. 3681. Article 3681. URL: https://www.mdpi.com/2223-7747/12/21/3681 (дата обращения: 13.10.2024). doi: 10.3390/plants12213681.
- Получение дигаплоидых линий для селекции глютинозного риса / И. А. Сартбаева, Б. Н. Усенбеков, А. Б. Рысбекова и др. // Биотехнология. 2018. Т. 34. № 2. С. 26–36. doi: 10.21519/0234-2758-2018-34-2-26-36.
- Aljanabi S. M., Martinez I. Universal and rapid salt-extraction of high quality genomic DNA for PCR-based techniques // Nucleic Acid Research. 1997. Vol. 25. No. 22. P. 4692–4693. doi: 10.1093/nar/25.22.4692.
- Ilyushko M. V. Effect of growing conditions of rice donor plants on anther culture in vitro // Journal of Agricultural Science and Technology A. 2015. Vol. 5. P. 686–694. doi: 10.17265/2161-6256/2015.08.007.
- Improvement of anther culture to integrate doubled haploid technology in temperate rice (Oryza sativa L.) breeding / C. Lantos, M. Jancso, A. Szekely, et al. // Plants. 2022. Vol. 11. Article 3446. URL: https://www.mdpi.com/2223-7747/11/24/3446 (дата обращения: 02.02.2023). doi: 10.3390/plants11243446.
- Харитонов Е. М., Гончарова Ю. К. Стерильность при межподвидовой гибридизации риса Oryza sativa L. в связи с поиском генов широкой совместимости и отнесением образцов к подвидам indica и japonica // Сельскохозяйственная биология. 2013. № 5. С. 61–68. doi: 10.15389/agrobiology.2013.5.61rus.
- D’Hooghvorst I., Ferreres I., Nogues S. Anther culture and chromosome doubling in Mediterranean japonica rice // Jose M. Segui-Simarro (ed.). Doubled haploid technology. Volume 1: General topics, Alliaceae, Cereals, Methods in molecular biology, 2287. Springer Science+Business Media, LLC, part of Springer Nature. 2021. P. 333–341. doi: 10.1007/978-1-0716-1315-3_19.
- Ляховкин А. Г. Рис. Мировое производство и генофонд. СПб: Профи-Информ, 2005. 288 с.
- Detection of a novel locus involved in non-seed-shattering behavior of Japonica rice cultivar, Oryza sativa «Nipponbare» / Y. Tsujimura, S. Sugiyama, K. Otsuka, et al. // Theoretical and Applied Genetics. 2019. Vol. 132. P. 2615–2623. doi: 10.1007/s00122-019-03376-3.
- Wu H., He Q., Wang Q. Advances in rice seed shattering // International Journal of Molecular Sciences. 2023. Vol. 24. Article 8889. URL: https://www.mdpi.com/1422–0067/24/10/8889 (дата обращения: 02.02.2025). doi: 10.3390/ijms24108889.
Дополнительные файлы
