Рациональный отбор вариантов гемагглютинина вирусов гриппа H3N2 при подготовке штаммов живой гриппозной вакцины для оптимизации ростовых характеристик

Обоснование. Современные отечественные живые гриппозные вакцины производят в развивающихся куриных эмбрионах. При пассировании в эмбрионах вирус, выделенный из дыхательных путей человека, адаптируется к рецепторам, наиболее распространенным в эмбрионах. Популяция вируса на любом пассаже в куриных эмбрионах гетерогенна и содержит варианты вирусов с тем или иным набором адаптационных замен. Перед подготовкой вакцинного штамма клонируют популяции «дикого» вируса и анализируют генетическую последовательность гемагглютинина и нейраминидазы клонов. От правильного выбора варианта вируса зависят ростовые характеристики вакцинного штамма и его антигенные свойства.

Цель — выбор варианта вируса подтипа H3N2 для подготовки вакцинного реассортанта на основе данных о составе популяции и оценки его ростовых свойств.

Материалы и методы. Вирусы клонировали в развивающихся куриных эмбрионах, секвенировали гены гемагглютинина и нейраминидазы полученных клонов. На основе вариантов, выбранных по результатам анализа популяции, методом реассортации в развивающихся куриных эмбрионах получали штаммы живой гриппозной вакцины. Оценивали ростовые характеристики штаммов, фенотип в развивающихся куриных эмбрионах и антигенные свойства в двустороннем тесте реакции торможения гемагглютинации.

Результаты. Рекомендованный Всемирной организацией здравоохранения на эпидемический сезон 2019/2020 гг. вирус гриппа A/Kansas/14/2017 на седьмом пассаже в развивающихся куриных эмбрионах приобрел пару замен D190N + N246T, доминирующих в популяции. Из популяции A/Kansas/14/2017-подобного штамма A/Brisbane/34/2018 с третьего пассажа в развивающихся куриных эмбрионах удалось получить вариант вируса с заменами G186V + S219Y в гемагглютинине. Ростовые характеристики штамма на основе A/Kansas/14/2017 (пассаж Е7) значительно уступали характеристикам штамма на основе A/Brisbane/34/2018 (пассаж Е3) при отсутствии различий в антигенных свойствах.

Заключение. Вариант яичной адаптации гемагглютинина G186V у штаммов клайда 3с.3а является предпочтительным при подготовке штаммов живой гриппозной вакцины, вариант N246T — неоптимальным. При подготовке штаммов необходимо анализировать состав популяции вируса путем клонирования и выбирать для подготовки штаммов наиболее оптимальный вариант. Закрепление яично-адаптационных замен в пассированных вариантах вируса не всегда оптимально для штаммов живой гриппозной вакцины, в связи с чем для начала работы над штаммом предпочтительно использовать популяцию, наиболее близую к исходному варианту.