Ростовые характеристики штаммов экспериментальной живой гриппозной вакцины с модифицированными генами NP и NS
- Авторы: Прокопенко П.И.1, Матюшенко В.А.1, Исакова-Сивак И.Н.1, Руденко Л.Г.1
-
Учреждения:
- Институт экспериментальной медицины
- Выпуск: Том 21, № 3 (2021)
- Страницы: 135-139
- Раздел: Материалы конференции
- URL: https://journals.eco-vector.com/MAJ/article/view/77800
- DOI: https://doi.org/10.17816/MAJ77800
- ID: 77800
Цитировать
Полный текст
![Открытый доступ](https://journals.eco-vector.com/lib/pkp/templates/images/icons/text_open.png)
![Доступ закрыт](https://journals.eco-vector.com/lib/pkp/templates/images/icons/text_unlock.png)
![Доступ закрыт](https://journals.eco-vector.com/lib/pkp/templates/images/icons/text_lock.png)
Аннотация
Обоснование. На сегодняшний день вакцинация является наиболее эффективным средством борьбы с эпидемиями гриппа, но иммуногенность современных гриппозных вакцин не всегда удовлетворительна. Одним из способов повышения иммуногенности аттенуированной живой гриппозной вакцины считают укорочение рамки считывания белка NS1 — модулятора противовирусного врожденного иммунитета. Кроме того, оптимизировать Т-клеточный ответ на вакцинацию можно путем включения в геном вакцинных штаммов гена NP от эпидемического родительского вируса.
Материалы и методы. Рамка считывания белка NS1 донора аттенуации А/Ленинград/134/17/57 была усечена до 126 аминокислотных остатков сайт-направленным мутагенезом. В качестве модельного вируса использовали штамм А/Ануи/1/2013 (H7N9), гены HA, NA и NP которого были клонированы в вектор pCIPolISapIT. Сборку рекомбинантных вирусов гриппа осуществляли при помощи трансфекции клеток Vero необходимым набором плазмид. Ростовые свойства полученных вирусов определяли в развивающихся куриных эмбрионах, инкубированных при различных температурах, а также в тканях респираторного тракта мышей (носовые ходы, легкие).
Результаты. Экспериментальные вакцинные штаммы живой гриппозной вакцины подтипа H7N9 с формулами генома 6:2 и 5:3, несущие в своем составе полноразмерный или укороченный ген NS1, активно реплицировались в развивающихся куриных эмбрионах при оптимальных условиях, сохраняя при этом температурочувствительный и холодоадаптированный фенотипы, свойственные классическим штаммам живой гриппозной вакцины. У всех вирусов отсутствовала способность размножаться в легких мышей линии C57BL/6J, что подтверждает аттенуированный фенотип вирусов. В носовых ходах мышей реплицировались только вирусы с полноразмерным геном NS1, тогда как вирусы, экспрессирующие укороченный белок NS1, не обнаруживали в респираторном тракте животных.
Заключение. Полученные результаты свидетельствуют, что модификация гена NS вакцинного штамма и включение в состав генома NP гена от вирулентного вируса не влияют на его ростовые характеристики в развивающихся куриных эмбрионах. Снижение активности репликации вирусов в верхних дыхательных путях мышей при укорочении рамки считывания белка NS1 указывает на усиление аттенуирующих свойств модифицированных вакцин, что открывает перспективы применения новых вакцин у детей младше трех лет.
Ключевые слова
Полный текст
![Доступ закрыт](https://journals.eco-vector.com/lib/pkp/templates/images/icons/text_lock.png)
Об авторах
Полина Игоревна Прокопенко
Институт экспериментальной медицины
Автор, ответственный за переписку.
Email: pi.prokopenko@gmail.com
аспирант, лаборант-исследователь
Россия, Санкт-ПетербургВиктория Аркадьевна Матюшенко
Институт экспериментальной медицины
Email: small.scorpion@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-4698-6085
SPIN-код: 1857-1769
научный сотрудник отдела вирусологии им. А.А. Смородинцева
Россия, Санкт-ПетербургИрина Николаевна Исакова-Сивак
Институт экспериментальной медицины
Email: isakova.sivak@iemspb.ru
ORCID iD: 0000-0002-2801-1508
SPIN-код: 3469-3600
д-р биол. наук, заведующая лабораторией иммунологии и профилактики вирусных инфекций отдела вирусологии им. А.А. Смородинцева
Россия, Санкт-ПетербургЛариса Георгиевна Руденко
Институт экспериментальной медицины
Email: vaccine@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-0107-9959
SPIN-код: 4181-1372
д-р мед. наук, профессор, заслуженный деятель науки Российской Федерации, заведующая отделом вирусологии им. А.А. Смородинцева
Россия, Санкт-ПетербургСписок литературы
- Iuliano A.D., Roguski K.M., Chang H.H. et al. Estimates of global seasonal influenza-associated respiratory mortality: a modelling study // Lancet. 2018. Vol. 391, No. 10127. P. 1285–1300. doi: 10.1016/S0140-6736(17)33293-2
- Marc D. Influenza virus non-structural protein NS1: interferon antagonism and beyond // J. Gen. Virol. 2014. Vol. 95, No. Pt 12. P. 2594–2611. doi: 10.1099/vir.0.069542-0
- Pica N., Langlois R.A., Krammer F. et al. NS1-truncated live attenuated virus vaccine provides robust protection to aged mice from viral challenge // J. Virol. 2012. Vol. 86, No. 19. P. 10293–10301. doi: 10.1128/JVI.01131-12
- Zhou B., Li Y., Belser J.A. et al. NS-based live attenuated H1N1 pandemic vaccines protect mice and ferrets // Vaccine. 2010. Vol. 28, No. 50. P. 8015–8025. doi: 10.1016/j.vaccine.2010.08.106
- Isakova-Sivak I., Korenkov D., Smolonogina T. et al. Comparative studies of infectivity, immunogenicity and cross-protective efficacy of live attenuated influenza vaccines containing nucleoprotein from cold-adapted or wild-type influenza virus in a mouse model // Virology. 2017. Vol. 500. P. 209–217. doi: 10.1016/j.virol.2016.10.027
- Rekstin A., Isakova-Sivak I., Petukhova G. et al. Immunogenicity and cross protection in mice afforded by pandemic H1N1 live attenuated influenza vaccine containing wild-type nucleoprotein // Biomed. Res. Int. 2017. Vol. 2017. P. 9359276. doi: 10.1155/2017/9359276
- Reed L.J., Muench H. A simple method of estimating fifty per cent endpoints // American Journal of Epidemiology. 1938. Vol. 27, No. 3. P. 493–497. doi: 10.1093/oxfordjournals.aje.a118408
- Vasin A.V., Temkina O.A., Egorov V.V. et al. Molecular mechanisms enhancing the proteome of influenza A viruses: an overview of recently discovered proteins // Virus. Res. 2014. Vol. 185. P. 53–63. doi: 10.1016/j.virusres.2014.03.015
Дополнительные файлы
![](/img/style/loading.gif)