Vaginal microbiota in the first trimester of pregnancy in women with a history of miscarriage

Cover Page

Abstract


Hypothesis/aims of study. Dysbiotic disorders of the vagina are one of the main risk factors of miscarriage. The analysis of vaginal microbiota during pregnancy in women having a history of miscarriage may contribute to understanding the importance of specific types of vaginal flora in the development of processes resulting in spontaneous abortion or preterm birth. This study was undertaken to evaluate the vaginal flora in the 1st trimester of pregnancy in women having a history of miscarriage.

Study design, materials, and methods. To participate in the study, 160 individuals in the 1st trimester of pregnancy with and without a history of miscarriage were invited. Group 1 included 100 women with a history of miscarriage, group 2 consisted of 60 women without a history of miscarriage. The vaginal flora was analyzed with microscopic, bacteriological, and quantitative real-time PCR methods.

Results. In patients with a history of miscarriage, the frequency of dysbiotic disorders of the vaginal flora was three times higher (11.0% and 3.3%) and pH value of the vaginal fluid was significantly higher. Along with a significant reduction of the proportion of the Lactobacillus flora in the 1st trimester of pregnancy in patients having a history of miscarriage, there was a significant increase in the abundance of opportunistic microorganisms, mostly aerobic flora, such as Enterobacteriaceae, Streptococcus spp., and Staphylococcus spp. Furthermore, there was a significant predominance of Ureaplasma spp. and Candida spp. in women with a miscarriage history.

Conclusion. The vaginal microbiota in the 1st trimester of pregnancy in women having a history of miscarriage is characterized by higher pH values of the vaginal fluid, the prevalence of opportunistic microorganisms, a decrease in the abundance of the Lactobacillus flora, and a higher concentration of aerobic bacteria, Ureaplasma spp., and Candida spp. These findings indicate dysbiotic disorders of the vaginal microbiocenosis in women having a history of miscarriage, which can lead to late miscarriage and pretem birth.


Введение

Невынашивание беременности представляет собой одну из наиболее сложных проблем практического акушерства. Частота данного осложнения беременности остается стабильно высокой и составляет 10–25 % от всех беременностей. Генитальные инфекции являются одним из основных этиологических факторов досрочного прерывания беременности. На протяжении многих лет значимая роль в досрочном прерывании беременности принадлежала инфекциям, передающимся половым путем. В современных условиях большое внимание в этиологии восходящего инфицирования эндо метрия у женщин с невынашиванием беременности уделяется дисбиозу влагалища с преобладанием условно-патогенной микрофлоры [1–4].

Вклад инфекционного фактора в развитие разных форм невынашивания беременности различен. Накопленные к настоящему времени данные свидетельствуют, что роль инфекции в прерывании беременности на ранних сроках незначительна [5]. В то же время внутриамниотическая инфекция служит причиной примерно 40 % всех случаев преждевременных родов [6] и 60–70 % случаев позднего самопроизвольного выкидыша [7]. Это подтверждается частотой острого хориоамнионита при преждевременных родах: 94 % случаев — между 21-й и 24-й неделями беременности, 40 % — между 29-й и 32-й неделями, 35 % — между 25-й и 28-й неделями, 11 % — между 33-й и 36-й неделями, 4 % — между 37-й и 40-й неделями [8].

Вагинальный микробиом — многокомпо нентная по видовому составу экосистема, которая насчитывает более 300 видов микроорга низмов. Лактобациллы доминируют в вагинальной среде здоровых женщин. С использованием метагеномного анализа установлено наличие в вагинальном микробиоме около 20 видов лактобацилл [9]. При этом преобладают четыре вида группы Lactobacillus acidophilus: L. crispatus, L. jensenii, L. gasseri и L. iners [10]. В состав нормальной микрофлоры влагалища в небольшом количестве могут входить представители условно-патогенной микрофлоры : Gardnerella vaginalis, Mycoplasma hominis, Urea plasma urealyticum, дрожжеподобные грибы рода Candida и представители бактериальных родов Mobiluncus, Atopobium, Prevotella, Megasphaera, Dialister,Peptoniphilus, Sneathia, Eggerthella, Aerococcus, Finegoldia.

Микробиота влагалища у женщин с физиологическим течением беременности стабильна и отличается меньшим разнообразием [11, 12]. Изменение гормонального фона ведет к значительному повышению синтеза гликогена в слизистой оболочке влагалища, что приводит к увеличению роста лактобацилл. Среди представителей лактофлоры в подавляющем большинстве присутствуют L. crispatus и L. iners [12]. В то же время уменьшается количество услов но-патогенных микроорганизмов, в частности, снижается количество как аэробных видов (Corinebacterium spp., Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Enterococcus spp. и др.), так и анаэробной микрофлоры (Bacteroides spp., Peptostreptococcus spp. и др.) [13]. Снижение сексуальной активности во время беременности также способствует стабильности микрофлоры влагалища.

Нарушение нормального микробиоценоза влагалища может приводить к развитию бактериального вагиноза, аэробного вагинита, внутриамниотической инфекции и, следовательно, к осложнениям беременности и родов, инфицированию новорожденных. Данные исследования G. Donders et al. (2009) свидетельствуют о повышенном риске ранних преждевременных родов в 6 раз и невынашивания беременности на ранних сроках в 2 раза при отсутствии лактобацилл и наличии бактериального вагиноза и аэробного вагинита и, напротив, снижении риска преждевременных родов на 75 % у женщин с нормальной микрофлорой влагалища в первом триместре беременности [9].

Таким образом, необходимо исследование микрофлоры влагалища в первом триместре беременности для своевременного выявления дисбиотических нарушений и санации очага инфекции для снижения рисков прерывания беременности.

Целью данного исследования было выявление особенностей микрофлоры влагалища в первом триместре у беременных женщин с невынашиванием в анамнезе.

Материалы и методы

В исследовании приняли участие женщины, наблюдавшиеся в ФГБНУ «Научно-иссле довательский институт акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта», в Центре диагностики, профилактики и лечения невынашивания беременности при Родильном доме № 1, в Женской консультации № 19 города Санкт-Петербурга в период с октября 2015 по апрель 2018 г.

В исследование были включены женщины в возрасте 21–40 лет в первом триместре беременности. Критерии включения: невынашивание беременности в анамнезе (самопроизвольные выкидыши ранних и поздних сроков, неразвивающаяся беременность, преждевременные роды). Критерии исключения: сахарный диабет, хроническая почечная патология, множественная миома матки, рубец на матке, тяжелая хроническая патология дыхательной и сердечно-сосудистой системы, тяжелая патология печени, многоплодная беременность, хламидийная инфекция, применение антибактериальных препаратов в течение предшествующих четырех недель.

Обследование включало рН-метрию вагинального отделяемого, лабораторные исследования вагинального отделяемого с применением микроскопического, культурального и молекулярно-биологического (количественная ПЦР в реальном времени) методов.

Забор вагинального отделяемого производили из заднебокового свода с применением двух стерильных тампонов и шпателя. Содержимое шпателя наносили на два предметных стекла для микроскопического исследования, один тампон помещали в транспортную среду для бактериологического исследования, содержимое второго тампона использовали для молекулярно-биологического анализа.

Значения рН вагинального отделяемого изме ряли при помощи индикаторных полосок «Кольпо-тест pH», предназначенных для визуального количественного определения кислотности влагалищной среды. Диапазон значений «Кольпо-тест pH» находится в пределах 3,0–7,0 pH. Цветная шкала на этикетке содержит серию цветовых полей, соответствующих значениям pH 3,0; 3,5; 3,7; 4,0; 4,2; 4,5; 4,8; 5,0; 5,5; 6,0; 6,5; 7,0. В основе метода определения рН влагалищной жидкости лежит химическая реакция определения ионов водорода в биологических жидкостях организма человека с помощью рН-индикаторов. В зависимости от значений рН влагалищной жидкости изменяется окраска рН-индикаторов. рН влагалищной жидкости измеряли путем нанесения вагинальной жидкости со стерильного шпателя жидкости на сенсорный элемент тест-полоски.

Для микроскопического анализа клинический материал помещали на два предметных стекла и окрашивали 1 % раствором метиленового синего и по Граму. Оценивали отношение количества лейкоцитов к количеству эпителиальных клеток (в норме ≤ 1 : 1), присутствие лактобацилл, других микроорганизмов, дрожжеподобных грибов, трихомонад, а также «ключевых клеток».

Для бактериологического исследования клинический материал помещали в две чашки Петри с искусственной питательной средой, содержащей 5 % баранью кровь (Oxoid, Великобритания). Одну чашку Петри инкубировали в условиях атмосферного воздуха при температуре 37 °С в течение 48 часов, вторую — в СО2-инкубаторе (5 % СО2) при температуре 37 °С в течение 48 часов. Для выделения дрожжеподобных грибов рода Candida использовали бульон Сабуро (инкубирование при температуре 37 °С в течение 48 часов) с последующим высевом на агар Сабуро. Выделенные микроорганизмы идентифицировали на масс-спектрометре Microflex (Bruker, Германия) при помощи базы данных Maldi Bio Typer RTC.

Молекулярно-биологическое исследование микрофлоры влагалища проводили с использованием теста «Фемофлор-16» («ДНК-Техно логия», Москва). Тест основан на методе количественной ПЦР в режиме реального времени и позволяет определить количество ДНК искомого микроорганизма в образце, которое выражается в геномных эквивалентах (ГЭ). Количество ГЭ пропорционально количеству клеток микроорганизма. С помощью теста определяют тотальную концентрацию бактериальной ДНК — общую бактериальную массу (ОБМ) — и концентрацию (абсолютную и относительную) следующих видов/родов микроорганизмов: Lactobacillus, Enterobacteriaceae, Streptococcus, Staphylococcus, Gardnerella vaginalis/Prevotella, bivia/Porphyromonas, Eubacterium,Sneathia/Leptotrichia/Fusobacterium, Megasphaera/Veillonella/Dialister, Lachnobacterium spp./Clos tridium, Mobiluncus spp./Corynebacterium, Pepto streptococcus, Atopobium vaginae. Кроме того, оценивали абсолютную концентрацию Mycoplasma hominis, Ureaplasmaи Candida. ПЦР-анализ осуществляли согласно инструкции производителя.

Выявление и определение вида лактобацилл (Lactobacillus crispatus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus iners, Lactobacillus jensenii, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus vaginalis) в отделяемом влагалища выполняли методом ПЦР в реальном времени с применением набора реагентов для исследовательских целей производства «ДНК-Технология» (Москва).

Статистический анализ результатов проводили с использованием статистического пакета NCSS 12 (NCSS, LCC). Для непрерывных переменных данные представляли графически в ви де диапазона и медианы с межквартильными интер валами, для анализа различий применяли U-критерий Манна – Уитни. Для категориальных переменных данные рассчитывали в виде частот, различия анализировали с использованием критерия хи-квадрат Пирсона. Если при анализе таблиц сопряженности хотя бы в одной ячейке ожидаемое явление принимало значение от 5 до 9, критерий хи-квадрат рассчитывали с поправкой Йейтса. Если хотя бы в одной ячейке ожидаемое явление было ниже 5, то для анализа применяли точный критерий Фишера. Критический уровень достоверности нулевой статистической гипотезы принимали равным 0,05 (p < 0,05).

Результаты

Всего в исследование было включено 160 женщин. В основную группу (группу 1) вошли 100 женщин с невынашиванием беременности в анамнезе. Группу сравнения (группу 2) составили 60 женщин без невынашивания беременности в анамнезе.

Возраст пациенток варьировал от 21 до 40 лет (средний возраст для обеих групп составил 29 лет (27–32,5 года)). Обследование проводили при сроке беременности от 5 до 12 недель (средний срок гестации для обеих групп составил 9 недель).

Пациентки первой группы имели в анамнезе в среднем два случая невынашивания беременности (табл. 1).

 

Таблица 1. Частота невынашивания беременности у женщин с невынашиванием беременности в анамнезе (группа 1)

Table 1. Cases of miscarriage in women with a history of miscarriage (group 1)

Число случаев досрочного самопроизвольного прерывания беременности

Основная группа (n = 100)

1

37 (37 %)

2

47 (47 %)

3

11 (11 %)

4

5 (5 %)

Среднее число случаев невынашивания беременности

2 (1–2)

 

Наиболее часто отмечались случаи невынашивания беременности на раннем сро ке (96 %). Частота случаев позднего невынашивания — преждевременных родов и позднего выкидыша — была намного ниже (7 и 13 % соответственно). Превалирующее число потерь беременности наблюдалось при сроке 7/8 и 9/10 не дель (рис. 1).

 

Рис. 1. Гестационные сроки невынашивания беременности у женщин с невынашиванием беременности в анамнезе (группа 1)

Fig. 1. Gestational age of miscarriage in women with a history of miscarriage (group 1)

 

В структуре гинекологических заболеваний хронический сальпингоофорит и наружный генитальный эндометриоз встречались только у женщин с невынашиванием беременности (табл. 2). У 11 % женщин первой группы было отмечено нарушение менструальной функции (p < 0,05). Хронический эндометрит в анамнезе был зафиксирован только у женщин c невынашиванием беременности в 34 % случаев. При этом различия между группами по частоте хронического эндометрита были статистически значимы.

 

Таблица 2. Гинекологический и соматический анамнез женщин с невынашиванием (группа 1) и без невынашивания (группа 2) беременности в анамнезе

Table 2. Comparative analysis of characteristics of women with a history of miscarriage (group 1) and without it (group 2)

Заболевание

Группа 1 (n = 100)

Группа 2 (n = 60)

р

Хронический эндометрит

34 (34 %)

0 (0 %)

< 0,00005

Нарушение менструальной функции

11 (11 %)

0 (0 %)

0,0072

Хронический сальпингоофорит

4 (4 %)

0 (0 %)

0,29782

Эрозия шейки матки

23 (23 %)

9 (15 %)

0,30743

Наружный генитальный эндометриоз

3 (3 %)

0 (0 %)

0,29245

Артериальная гипертензия

3 (3 %)

2 (3,3 %)

1,00000

Варикозная болезнь

11 (11 %)

6 (10 %)

1,00000

Хронический тонзиллит/бронхит

5 (5 %)

12 (20 %)

0,00661

Хронический гастрит

9 (9 %)

10 (16,7 %)

0,23057

Хронический цистит

5 (5 %)

0 (0 %)

0,15787

Ожирение

4 (4 %)

2 (3,3 %)

1,00000

Миопия

4 (4 %)

7 (11,7 %)

0,10285

Заболевания щитовидной железы, в том числе

20 (20 %)

5 (8,3 %)

0,08137

  • АИТ. Гипотиреоз

16 (16 %)

3 (5 %)

0,04403

  • Узловой нетоксический зоб

4 (4 %)

2 (3,3 %)

1,00000

Наследственная тромбофилия

3 (3 %)

0 (0 %)

0,29245

 

При анализе соматического анамнеза выявлены значимые различия между группами по частоте хронического тонзиллита/бронхита и заболеваний щитовидной железы, а именно гипотиреозу (табл. 2).

Результаты обследования женщин в первом триместре настоящей беременности

Значения рН вагинального отделяемого у женщин с невынашиванием беременности в анамнезе были значительно выше, чем у женщин с неотягощенным акушерским анамнезом (p < 0,05). У 62 (62 %) женщин с невынашиванием в анамнезе определялись значения рН > 4,5, в то время как в группе без невынашивания значения рН > 4,5 отмечались у 18 женщин (30 %) (p < 0,05).

При микроскопическом исследовании отделяемого влагалища наблюдали более высокую частоту воспалительной реакции (превалирование лейкоцитов над эпителиальными клетками) и преобладание других видов микроорганизмов над лактобациллами в группе женщин с невынашиванием беременности в анамнезе (табл. 3).

 

Таблица 3. Микроскопическое исследование препаратов отделяемого влагалища в первом триместре беременности у женщин с невынашиванием (группа 1) и без невынашивания (группа 2) беременности в анамнезе

Table 3. Microscopic examination of vaginal fluid in the 1st trimester of pregnancy in women with a history of miscarriage (group 1) and without it (group 2)

Показатели

Группа 1 (n = 100)

Группа 2 (n = 60)

р

Воспалительная реакция (преобладание лейкоцитов над эпителиальными клетками при микроскопии окрашенного по Граму препарата)

26 (26 %)

10 (16,7 %)

0,17109

Преобладание лактобацилл

86 (86 %)

57 (95 %)

0,05997

Преобладание других видов микроорганизмов

14 (14 %)

3 (5 %)

0,11026

Наличие дрожжевых клеток/псевдомицелия

11 (11 %)

3 (5 %)

0,25416

Наличие ключевых клеток

2 (2 %)

1 (1,7 %)

1,00000

 

При культуральном исследовании вагинального отделяемого в группе беременных женщин с невынашиванием в анамнезе было выявлено значительно более высокое количество нелактобациллярных видов микроорганизмов (p < 0,05). При этом значительно чаще при культуральном исследовании встречались представители аэробной микрофлоры, а именно Staphylococcus hominis, Streptococcus agalactiae, Enterococcus faecalis (табл. 4).

 

Таблица 4. Нелактобациллярные виды микроорганизмов, выявленные при культуральном исследовании отделяемого влагалища у женщин с невынашиванием (группа 1) и без невынашивания (группа 2) беременности в анамнезе

Table 4. Non-Lactobacillus species of microorganisms identified in vaginal fluid by bacteriological examination in women with a history of miscarriage (group 1) and without it (group 2)

Характеристика

Группа 1 (n = 100)

Группа 2 (n = 60)

р

Обнаружение Сorynebacterium amycolatum

10 (10 %)

2 (3,3 %)

0,21322

Обнаружение Candida albicans

13 (13 %)

5 (8,3 %)

0,51828

Обнаружение Staphylococcus haemolyticus

5 (5 %)

0 (0 %)

0,15787

Обнаружение Staphylococcus hominis

32 (32 %)

5 (8,3 %)

0,00118

Обнаружение Escherichia coli

7 (7 %)

2 (3,3 %)

0,48536

Обнаружение Staphylococcus epidermidis

6 (6 %)

1 (1,7 %)

0,25728

Обнаружение Streptococcus agalactiae

9 (9 %)

0 (0 %)

0,01443

Обнаружение Klebsiella pneumoniae

6 (6 %)

1 (1,7 %)

0,25728

Обнаружение Enterococcus faecalis

18 (18 %)

3 (5 %)

0,02744

Обнаружение Gardnerella vaginalis

6 (6 %)

1 (1,7 %)

0,25728

 

С применением метода количественной ПЦР в реальном времени (тест «Фемофлор-16») было показано, что у женщин первой группы содержание лактобацилл (концентрация лактобацилл по отношению к ОБМ) было значимо выше, чем у женщин второй группы (рис. 2). Выраженный анаэробный дисбиоз определялся несколько чаще у женщин с невынашиванием беременности в анамнезе в сравнении с женщинами без невынашивания (6 и 3,3 соответственно, p > 0,05). Выраженный аэробный дисбиоз был обнаружен только у женщин первой группы в 5 % случаев, однако различия между группами не достигли статистической значи мости.

 

Рис. 2. Содержание лактобацилл в отделяемом влагалища у женщин с невынашиванием (группа 1) и без невынашивания (группа 2) беременности в анамнезе: ОБМ — общая бактериальная масса

Fig. 2. Concentration of lactobacilli in vaginal fluid in women with a history of miscarriage (group 1) and without it (group 2): TBM — total bacterial mass

 

Определив частоту доминирования различных видов лактобацилл в лактобациллярной микрофлоре влагалища у женщин с невынашиванием беременности в анамнезе и женщин без невынашивания, выявили преобладание четырех видов лактобацилл: L. crispatus, L. iners, L. jensenii и L. gasseri (рис. 3). С наибольшей частотой в обеих группах в качестве доминирующего вида обнаруживали L. crispatus и L. iners. Следует отметить, что частота доминирования L. crispatus и L. jensenii была несколько выше в группе женщин без невынашивания в анамнезе, в то время как виды L. iners и L. gasseri, напротив, чаще преобладали в группе женщин с невынашиванием беременности (различия статистически не значимы).

 

Рис. 3. Частота доминирования различных видов лактобацилл в лактобациллярной микрофлоре влагалища у женщин с невынашиванием (группа 1) и без невынашивания (группа 2) беременности в анамнезе

Fig. 3. Frequency of dominance of different Lactobacillus species in the vaginal Lactobacillus flora in women with a history of miscarriage (group 1) and without it (group 2)

 

В результате анализа содержания микроорганизмов методом количественной ПЦР в реальном времени были установлены значительно более высокие показатели Enterobacteriaceae, стрептококков, стафилококков, дрожжеподоб ных грибов Candida spp. и Ureaplasma spp. в группе женщин с невынашиванием беременности в анамнезе (рис. 4–8). Для остальных микроорганизмов значимых различий между группами не выявлено.

 

Рис. 4. Содержание Enterobacteriaceae в отделяемом влагалища у женщин с невынашиванием (группа 1) и без невынашивания (группа 2) беременности в анамнезе

Fig. 4. Concentration of Enterobacteriaceae in vaginal fluid in women with a history of miscarriage (group 1) and without it (group 2)

 

Рис. 5. Содержание Streptococcus spp. в отделяемом влагалища у женщин с невынашиванием (группа 1) и без невынашивания (группа 2) беременности в анамнезе

Fig. 5. Concentration of Streptococcus spp. in vaginal fluid in women with a history of miscarriage (group 1) and without it (group 2)

 

Рис. 6. Содержание Staphylococcus spp. в отделяемом влагалища у женщин с невынашиванием (группа 1) и без невынашивания (группа 2) беременности в анамнезе

Fig. 6. Concentration of Staphylococcus spp. in vaginal fluid in women with a history of miscarriage (group 1) and without it (group 2)

 

Рис. 7. Содержание Candida spp. в отделяемом влагалища у женщин с невынашиванием (группа 1) и без невынашивания (группа 2) беременности в анамнезе

Fig. 7. Concentration of Candida spp. in vaginal fluid in women with a history of miscarriage (group 1) and without it (group 2)

 

Рис. 8. Содержание Ureaplasma spp. в отделяемом влагалища у женщин с невынашиванием (группа 1) и без невынашивания (группа 2) беременности в анамнезе

Fig. 8. Concentration of Ureaplasma spp. in vaginal fluid in women with a history of miscarriage (group 1) and without it (group 2)

 

Обсуждение

Снижение частоты невынашивания беременности во многом зависит от выявления этиологического фактора на ранних сроках беременности. Персистенция во влагалище патогенных и условно-патогенных микроорганизмов может приводить к развитию инфекционных заболеваний нижних отделов генитального тракта, микробной инвазии амниотической полости и развитию в дальнейшем неблагоприятных исходов беременности, включая самопроизвольный выкидыш и преждевременные роды. Единого мнения о значимости каких-либо определенных видов микроорганизмов в генезе перинатальных потерь в настоящее время не сложилось. Как правило, изменения в вагинальной микрофлоре носят полимикробный характер. Многочисленные исследования показали, что наличие бактериального вагиноза и аэробного вагинита связано с повышенным риском преждевременных родов и инфекционными ослож нениями в послеродовом периоде [14–16].

Проведенный нами сравнительный анализ состава микрофлоры влагалища в первом триместре беременности продемонстрировал, что дисбиотические нарушения диагностировали как у женщин с невынашиванием беременности в анамнезе, так и без невынашивания, при этом выраженные дисбиозы наблюдали в небольшом проценте случаев. Однако стоит отметить, что частота данных нарушений была несколько выше у женщин с невынашиванием в анамнезе (11 и 3,3 %). На фоне значительных различий в доле лактобациллярной флоры у таких пациенток, в сравнении с женщинами без перинатальных потерь в анамнезе, отмечалось значимое увеличение частоты условно-патогенных микроорганизмов. При этом среди нелактобациллярных видов микроорганизмов в значительной степени доминировали представители аэробной микрофлоры — Enterobacteriaceae, Streptococcus spp., Staphyloсoссus spp.

J.C. Carey et al. (2005) также обнаружили значимую взаимосвязь между наличием во влагалище у женщин представителей аэробной вагинальной флоры (Klebsiella spp., E. coli, стафилококков и стрептококков) и преждевременными родами [17]. G. Donders et al. (2009) установили, что у женщин с дисбиотическими процессами во влагалище с преобладанием как аэробной микрофлоры, так и облигатно-ана эробных микроорганизмов в первом триместре беременности отмечалось повышение риска самопроизвольного выкидыша и преждевременных родов. В нашей работе среди облигатных анаэробных бактерий у беременных с невынашиванием в анамнезе несколько чаще встречались Eubacterium spp., Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae. В недавно проведенном иссле довании французских ученых [18] также было показано, что при сочетании высоких концентраций Gardnerella vaginalis и Atopobium vaginae в вагинальном отделяемом у женщин с симптомами угрозы досрочного прерывания беременности или с наличием в анамнезе поздних выкидышей риск преждевременных родов повышался.

Нами было выявлено значительное преобладание Ureaplasma spp. и дрожжеподобных грибов Candida spp. у беременных с невынашиванием в анамнезе по сравнению с женщинами без невынашивания. Несмотря на значимую роль Ureaplasma spp. в развитии осложнений у недоношенных детей, данные в отношении роли этого микроорганизма в этиологии досрочного прерывания беременности в настоящее время остаются достаточно противоречивыми [9, 19–21]. Также нет единого мнения о степени влияния вульвовагинального кандидоза на увеличение риска спонтанного прерывания беременности [22–24]. Однако имеются данные об увеличении частоты преждевременных родов у женщин с рецидивирующим кандидозным вагинитом с ранних сроков беременности [25].

Высокие значения рН вагинального отде ляемого значительно чаще были отмечены у жен щин с невынашиванием беременности в анамнезе. Известны несколько факторов, обуслов ливающих повышение pH вагинальной среды. С одной стороны, эти изменения связаны с уменьшением лактобациллярной флоры на фоне увеличения количества патогенных и услов но-патогенных микроорганизмов, с другой — с нарушением процессов ацидо- и аммониогенеза в эпителии влагалища и повышением активности протеолитических ферментов при дисбиозах [26]. Во время беременности повышение pH влагалища вместе с симптомами нарушений микробиоценоза может служить значимым фактором для диагностики дисбиотических нарушений, в частности, бактериального вагиноза [27].

Таким образом, анализ микробиоты влагалища в первом триместре беременности у женщин с невынашиванием в анамнезе показал значимые особенности: 1) высокие значения рН вагинальной среды (> 4,5); 2) превалирование нелактобациллярной микрофлоры над лактобациллами; 3) преобладание в два раза аэробных бактерий (энтеробактерий, стрептококков, стафилококков); 4) высокое содержание уреаплазм и дрожжеподобных грибов рода Candida.

Полученные данные свидетельствуют о дисбиотических изменениях микробиоты влагалища в первом триместре у женщин с невынашиванием беременности в анамнезе. Эти факторы могут являться причиной самопроизвольного прерывания беременности на поздних сроках, поэтому необходимо проведение динамического диагностического мониторинга микробиоты влагалища во время беременности в группах риска по невынашиванию беременности со свое временным лечением обнаруженных дисбиозов.

Anna A. Sinyakova

Research Institute of Obstetrics, Gynecology, and Reproductology named after D.O. Ott

Author for correspondence.
Email: annakizeeva@yandex.ru

Russian Federation, Saint Petersburg

Post-Graduate Student

Elena V. Shipitsyna

Research Institute of Obstetrics, Gynecology, and Reproductology named after D.O. Ott

Email: shipitsyna@inbox.ru

Russian Federation, Saint Petersburg

PhD, DSci (Biology), Leading Researcher. The Laboratory of Microbiology

Olga V. Budilovskaya

Research Institute of Obstetrics, Gynecology, and Reproductology named after D.O. Ott

Email: iagmail@ott.ru

Russian Federation, Saint Petersburg

Researcher. The Laboratory of Microbiology

Zinaida M. Martikaynen

Research Institute of Obstetrics, Gynecology, and Reproductology named after D.O. Ott

Email: iagmail@ott.ru

Russian Federation, Saint Petersburg

PhD, Senior Researcher. The Laboratory of Microbiology

Aleksey N. Grigoryev

Research Institute of Obstetrics, Gynecology, and Reproductology named after D.O. Ott

Email: iagmail@ott.ru

Russian Federation, Saint Petersburg

Researcher. The Laboratory of Microbiology

Vyacheslav M. Bolotskikh

Research Institute of Obstetrics, Gynecology, and Reproductology named after D.O. Ott

Email: iagmail@ott.ru

Russian Federation, Saint Petersburg

MD, PhD, DSci (Medicine), Deputy Director for Clinical Care

Alevtina M. Savicheva

Research Institute of Obstetrics, Gynecology, and Reproductology named after D.O. Ott

Email: savitcheva@mail.ru

Russian Federation, Saint Petersburg

MD, PhD, DSci (Medicine), Professor, Honoured Scholar of the Russian Federation, the Head of the Laboratory of Microbiology

  • Garland SM, Nı́ Chuileannáin F, Satzke C, Robins-Browne R. Mechanisms, organisms and markers of infection in pregnancy. J Reprod Immunol. 2002;57(1-2):169-183. doi: 10.1016/s0165-0378(02)00018-9.
  • Берлев И.В., Кира Е.Ф. Роль условно-патогенной микрофлоры в развитии невынашивания беременности у женщин с нарушением микробиоценоза влагалища // Журнал акушерства и женских болезней. - 2002. - Т. 51. - № 1. - С. 33-37. [Berlev IV, Kira EF. Rol’ uslovno patogennoy mikroflory v razvitii nevynashivaniya beremennosti u zhenshhin s narusheniem mikrobiotsenoza vlagalishcha. Journal of Obstetrics and Women’s Diseases. 2002;51(1):33-37. (In Russ.)]
  • Petricevic L, Domig KJ, Nierscher FJ, et al. Characterisation of the vaginal Lactobacillus microbiota associated with preterm delivery. Sci Rep. 2014;4(1). doi: 10.1038/srep05136.
  • Сидельникова В.М. Привычная потеря беременности. - М.: Триада-Х, 2005. [Sidel’nikova VM. Privychnaya poterya beremennosti. Moscow: Triada-Kh; 2005. (In Russ.)]
  • Giakoumelou S, Wheelhouse N, Cuschieri K, et al. The role of infection in miscarriage. Hum Reprod Update. 2016;22(1):116-133. doi: 10.1093/humupd/dmv041.
  • McClure EM, Goldenberg RL. Infection and stillbirth. Semin Fetal Neonatal Med. 2009;14(4):182-189. doi: 10.1016/j.siny.2009.02.003.
  • Mendz GL, Kaakoush NO, Quinlivan JA. Bacterial aetiological agents of intra-amniotic infections and preterm birth in pregnant women. Front Cell Infect Microbiol. 2013;3:58. doi: 10.3389/fcimb.2013.00058.
  • Russell P. Inflammatory lesions of the human placenta: clinical significance of acute chorioamnionitis. Am J Diagn Gynecol Obstet. 1979;1:127-137.
  • Donders GG, Van Calsteren K, Bellen G, et al. Predictive value for preterm birth of abnormal vaginal flora, bacterial vaginosis and aerobic vaginitis during the first trimester of pregnancy. BJOG. 2009;116(10):1315-1324. doi: 10.1111/j.1471-0528.2009.02237.x.
  • Pavlova SI, Kilic AO, Kilic SS, et al. Genetic diversity of vaginal lactobacilli from women in different countries based on 16S rRNA gene sequences. J Appl Microbiol. 2002;92(3):451-459. doi: 10.1046/j.1365-2672.2002.01547.x.
  • DiGiulio DB, Callahan BJ, McMurdie PJ, et al. Temporal and spatial variation of the human microbiota during pregnancy. Proc Natl Acad Sci U S A. 2015;112(35):11060-11065. doi: 10.1073/pnas.1502875112.
  • Romero R, Hassan SS, Gajer P, et al. Correction: The composition and stability of the vaginal microbiota of normal pregnant women is different from that of non-pregnant women. Microbiome. 2014;2(1):10. doi: 10.1186/2049-2618-2-10.
  • Берлев И.В. Состояние микроэкосистемы влагалища у беременных и ее роль при инфекционной патологии в акушерской практике: Автореф. дис. … канд. мед. наук. - СПб., 2001. [Berlev IV. Sostoyanie mikroekosistemy vlagalishcha u beremennykh i ee rol’ pri infektsionnoy patologii v akusherskoy praktike. [dissertation] Saint Petersburg; 2001. (In Russ.)]
  • Jacobsson B, Pernevi P, Chidekel L, Platz-Christensen JJ. Bacterial vaginosis in early pregnancy may predispose for preterm birth and postpartum endometritis. Acta Obstet Gynecol Scand. 2002;81(11):1006-1010. doi: 10.1034/j.1600-0412.2002.811103.x.
  • Daskalakis G, Papapanagiotou A, Mesogitis S, et al. Bacterial Vaginosis and Group B Streptococcal Colonization and Preterm Delivery in a Low-Risk Population. Fetal Diagn Ther. 2006;21(2):172-176. doi: 10.1159/000089298.
  • Thorsen P, Vogel I, Olsen J, et al. Bacterial vaginosis in early pregnancy is associated with low birth weight and small for gestational age, but not with spontaneous preterm birth: a population-based study on Danish women. J Matern Fetal Neonatal Med. 2006;19(1):1-7. doi: 10.1080/14767050500361604.
  • Carey JC, Klebanoff MA. Is a change in the vaginal flora associated with an increased risk of preterm birth? Am J Obstet Gynecol. 2005;192(4):1341-1346; discussion 1346-1347. doi: 10.1016/j.ajog.2004.12.069.
  • Bretelle F, Rozenberg P, Pascal A, et al. High Atopobium vaginae and Gardnerella vaginalis vaginal loads are associated with preterm birth. Clin Infect Dis. 2015;60(6):860-867. doi: 10.1093/cid/ciu966.
  • Tavo V. Prevalence of Mycoplasma Hominis and Ureaplazma Urealyticum among Women of Reproductive Age in Albania. Med Arch. 2013;67(1):25. doi: 10.5455/medarh.2013.67.25-26.
  • Paul VK, Gupta U, Singh M, et al. Association of genital mycoplasma colonization with low birth weight. Int J Gynecol Obstet. 1998;63(2):109-114. doi: 10.1016/s0020-7292(98)00135-0.
  • Stout MJ, Zhou Y, Wylie KM, et al. Early pregnancy vaginal microbiome trends and preterm birth. Am J Obstet Gynecol. 2017;217(3):356.e1-356.e18. doi: 10.1016/j.ajog.2017.05.030.
  • Cotch MF, Hillier SL, Gibbs RS, Eschenbach DA. Epidemiology and outcomes associated with moderate to heavy Candida colonization during pregnancy. Vaginal Infections and Prematurity Study Group. Am J Obstet Gynecol. 1998;178:374-80.
  • Banhidy F, Acs N, Puho EH, Czeizel AE. Rate of preterm births in pregnant women with common lower genital tract infection: a population-based study based on the clinical practice. J Matern Fetal Neonatal Med. 2009;22(5):410-418. doi: 10.1080/14767050902801645.
  • Czeizel AE, Fladung B, Vargha P. Preterm birth reduction afterclotrimazole treatment during pregnancy. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 2004;116(2):157-163. doi: 10.1016/j.ejogrb.2004.02.011.
  • Farr A, Kiss H, Holzer I, et al. Effect of asymptomatic vaginal colonization with Candida albicans on pregnancy outcome. Acta Obstet Gynecol Scand. 2015;94(9):989-996. doi: 10.1111/aogs.12697.
  • Кира Е.Ф. Бактериальный вагиноз. - СПб.: МИА, 2012. [Kira EF. Bakterial’nyy vaginoz. Saint Petersburg: MIA; 2012. (In Russ.)]
  • Di Renzo GC, De Domenico P. Cervico-inguinal microbiology, vaginal pH, infections, and premature labor. Acta Biomed Ateneo Parmense. 2000;71 Suppl 1:513-517.

Supplementary files

Supplementary Files Action
1. Fig. 1. Gestational age of miscarriage in women with a history of miscarriage (group 1) View (25KB) Indexing metadata
2. Fig. 2. Concentration of lactobacilli in vaginal fluid in women with a history of miscarriage (group 1) and without it (group 2): TBM — total bacterial mass View (30KB) Indexing metadata
3. Fig. 3. Frequency of dominance of different Lactobacillus species in the vaginal Lactobacillus flora in women with a history of miscarriage (group 1) and without it (group 2) View (45KB) Indexing metadata
4. Fig. 4. Concentration of Enterobacteriaceae in vaginal fluid in women with a history of miscarriage (group 1) and without it (group 2) View (33KB) Indexing metadata
5. Fig. 5. Concentration of Streptococcus spp. in vaginal fluid in women with a history of miscarriage (group 1) and without it (group 2) View (32KB) Indexing metadata
6. Fig. 6. Concentration of Staphylococcus spp. in vaginal fluid in women with a history of miscarriage (group 1) and without it (group 2) View (32KB) Indexing metadata
7. Fig. 7. Concentration of Candida spp. in vaginal fluid in women with a history of miscarriage (group 1) and without it (group 2) View (29KB) Indexing metadata
8. Fig. 8. Concentration of Ureaplasma spp. in vaginal fluid in women with a history of miscarriage (group 1) and without it (group 2) View (30KB) Indexing metadata

Views

Abstract - 68

PDF (Russian) - 37

PlumX


Copyright (c) 2018 Sinyakova A.A., Shipitsyna E.V., Budilovskaya O.V., Martikaynen Z.M., Grigoryev A.N., Bolotskikh V.M., Savicheva A.M.

Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.