Evaluation of the effectiveness of cytotherapy in women with early pregnancy loss

Full Text

Обоснование

Цитотерапию [лимфоцитиммунотерапию, иммуноцитотерапию (ИЦТ), аллоиммунизацию лимфоцитами партнера] применяют на протяжении 50 лет. Она является методом активной иммунокоррекции путем искусственной иммунизации аллогенными отцовскими или донорскими лейкоцитами или их фрагментами при привычном невынашивании беременности, бесплодии неясного генеза, повторных неудачах имплантации при экстракорпоральном оплодотворении (ЭКО) [1, 2].

В основе метода лежит стимуляция продукции антиотцовских цитотоксических антител (anti-paternal cyto-toxic antibodies, APCA) [3], антиидиотипических антител (антиидиотипы, anti-idiotypicantibodies, Ab2) [4] и антител, блокирующих реакцию смешанной культуры лимфоцитов супругов (mixed lymphocyte reaction blocking antibodies, MLR-Bf) [5–8]. Предполагаемые механизмы развития материнского иммунного ответа на отцовские антигены могут быть связаны как с появлением антител, способных связывать в частности рецепторы клеток, участвующих в цитотоксических реакциях в отношении будущего трофобласта, например, LIR-1¹-супрессорные рецепторы натуральных киллеров (NK-клеток), так и с избирательным изменением состава клеток, способствующих формированию оптимального супрессивного фенотипа, необходимых для успешной имплантации и развития беременности [9–11].

Этот метод разработали и предложили A. Beer и соавт. (1970–1978), в России его ввели в практику в 1983 г. В.М. Сидельникова и В.И. Говалло, а патент на методику проведения цитотерапии получен в 2004 г. [12].

До сих пор цитотерапию назначают в большинстве случаев эмпирически, на основе данных репродуктивного анамнеза [13, 14]. В настоящее время обосновано ее персонифицированное назначение по результатам обследования трех локусов системы HLA (human leukocyte antigen, главного комплекса гистосовместимости) II класса (DQA1, DQB1, DRB1) у партнеров с отягощенным репродуктивным анамнезом (привычным невынашиванием беременности, бесплодием неясного генеза, повторными неудачами имплантации при ЭКО).

Эффективность аллоиммунизации лимфоцитами партнера оценивают по клиническому успеху в наступлении и пролонгировании беременности до доношенности [15–17]. Оценка эффективности лабораторными методами предполагает выявление изменений иммунорегуляторных механизмов, направленных на адаптацию иммунной системы матери к полуаллогенному плоду, что проявлено в изменении состава натуральных Т-киллеров (NKT-клеток), NK-клеток, Т-регуляторных клеток, концентрацией провоспалительных цитокинов [18–21] и остается предметом научных исследований.

Несмотря на большой список исследований, уже проведенных различными группами авторов, эффективность данной процедуры в разных популяциях варьирует [22–24]. Разногласия возникают на всех этапах анализа, от критериев отбора пациентов, методики получения материала, кратности и дозы введения лейкоцитарной взвеси, временного интервала наступления беременности, использования крови партнера или донора (как мужчин, так и женщин), лабораторных критериев оценки эффективности до интерпретации полученных данных, что не позволяет ввести данный метод иммунотерапии в современные клинические протоколы, гайдлайны и мировые стандарты [25].

Цель — оценить эффективность цитотерапии у супружеских пар с репродуктивными нарушениями в анамнезе.

Материалы и методы

В исследовании приняли участие 77 супружеских пар с диагнозами «привычный выкидыш» (код 96 по Международной классификации болезней 10-го пересмотра), «женское бесплодие неуточненное» (код 97.9) идиопатического генеза, а также многократными неудачами имплантации при применении вспомогательных репродуктивных технологий (двумя и более). Критерии включения: возраст женщины от 20 до 40 лет, типирование генов главного комплекса гистосовместимости HLA II класса (DRB1, DQA1, DQB1) супружеских пар, две неудачи имплантации и более при применении вспомогательных репродуктивных технологий и/или два эпизода самопроизвольного прерывания беременности и более до 20 нед. от одного и того же партнера (если в каждом случае доказаны нормальные кариотипы абортуса и партнеров), самопроизвольное наступление предыдущих беременностей, отсутствие анатомических, аутоиммунных и гормональных нарушений, воспалительных заболеваний органов малого таза в фазе обострения, подписанная пациенткой форма информированного согласия на исследование.

Критерии исключения: со стороны женщин — наличие антифосфолипидного синдрома или повышение антифосфолипидных антител (критериальных), аутоиммунные заболевания (системная красная волчанка, ревматоидный артрит, гломерулонефрит и др.), поливалентная форма аллергии, наличие инфекционных заболеваний или обострение хронических в текущий момент; со стороны мужчин — хронический вирусный гепатит В, С, ВИЧ, сифилис, заболевания, вызванные вирусными инфекциями в настоящий момент, хронические инфекционные заболевания. Критерии исключения являются противопоказанием для назначения цитотерапии.

Так, перед каждой процедурой с целью биологической безопасности проводили обследование мужчины (срок действия всех результатов составляет 3 мес.), включающее:

1. исследование уровня иммуноглобулинов классов M, G (IgM, IgG) к вирусу иммунодефицита человека ВИЧ-1/-2 в крови;
2. определение антител к бледной трепонеме (Treponema pallidum) иммуноферментным методом в крови;
3. определение антигена (HbsAg) вируса гепатита B (Hepatitis B virus) в крови;
4. определение суммарных антител классов M и G (anti-HCV IgG и anti-HCV IgM) к вирусу гепатита C (Hepatitis C virus) в крови.

Перед каждой процедурой проводили комплексное исследование на СПИД, гепатит В, С методом полимеразной цепной реакции (срок действия результатов 72 ч) и клинический анализ крови.

Выделение клеток для цитотерапии

Всем женщинам перед беременностью проводили цитотерапию в качестве монотерапии лимфоцитами супруга в предгравидарной подготовке в середине фолликулярной фазы двух последовательных менструальных циклов (м. ц.) и во время наступившей беременности в сроке 5–6 и/или 8–9 нед. Данную процедуру используют в институте с 2004 г. Методика проведения цитотерапии в формате стандартной операционной процедуры «Логистика приема супружеской пары для процедуры ИЦТ» утверждена на заседании локального этического комитета НИИ АГиР им. Д.О. Отта (протокол № 11 от января 2022 г.).

Забор крови у партнера осуществляли из локтевой вены в стерильные вакутейнеры с гепарином натрия объемом 50–70 мл (6–10 вакутейнеров) в специальном боксированном помещении для работы с компонентами крови с соблюдением условий стерильной работы.

Образцы крови инкубировали в вертикальном положении в термостате при температуре 37 ℃ в течение 2 ч. Дальнейшие манипуляции проводили в ламинарном шкафу (класс 2 биологической безопасности в стерильных условиях). После разделения крови на два слоя надосадок аккуратно снимали пастеровской пипеткой (объемом 10–15 мл) и переносили в стерильные 15 мл. Затем центрифугировали при 150 g 10 мин.

Далее удаляли надосадочную жидкость и проводили лизис эритроцитов 3–4 раза. Очищенную суспензию лейкоцитов ресуспендировали и полученный биоматериал забирали в шприц для дальнейшего внутрикожного ведения. Суспензию, содержащую от 5 × 10⁶ до 100 × 10⁶ лейкоцитарных клеток, вводили внутрикожно в подлопаточную область (в 6–8 точек по 0,3 мл).

В период предгестационной подготовки рекомендована барьерная контрацепция. С третьего м. ц. контрацепция отменена. Наступление беременности регистрировали в течение 12 последующих м. ц. При отсутствии наступления беременности проводили «доиммунизацию» через 6 м. ц. после последней процедуры однократно.

У всех пациенток оценивали количество NK-клеток (CD3⁻CD16⁺CD56⁺) и NKT-клеток (CD3⁺CD16⁺CD56⁺) и определяли функциональную активность NK-клеток по спонтанной и индуцированной экспрессии CD107a методом проточной цитофлуориметрии. Для этого мононуклеары периферической крови выделяли на градиенте плотности фиколла (ρ = 1,077, Sigma, США) стандартным методом. Далее часть клеток инкубировали в культуральной среде RPMI-1640 (Sigma, США) с добавлением реагента для активации лейкоцитов, содержащего смесь форбол-миристат-ацетата и иономицина (BD, США), 3 ч при температуре 37 ℃ и 5 % содержанием диоксида углерода. Другую часть клеток инкубировали без добавления активатора. После инкубации клетки отмывали раствором Хэнкса (ООО «БиолоТ», Россия) и обрабатывали моноклональными антителами к CD16, CD56, CD3, CD45, CD107a (BD, США) согласно рекомендациям производителя.

Измерения проводили на проточном цитофлуориметре FacsCanto II (BD, США) в отделе иммунологии и межклеточных взаимодействий НИИ АГиР им. Д.О. Отта. NK-клетки анализировали до иммунизации и через 2 нед. после повторной иммунизации.

Статистический анализ

Статистическая обработка результатов проведена с использованием программы IBM SPSS Statistics 26. Перед описанием количественных данных проверен характер их распределения с помощью критерия Шапиро – Уилка. Все необходимые условия соблюдены с обоснованием их применимости: нормальное распределение признаков и равенство дисперсий в сравниваемых группах — максимальная близость значений среднего арифметического. Показатели измерены в количественной шкале, соблюдено правило «трех сигм». Поскольку все выборки соответствовали критериям нормального распределения, использованы параметрические методы (t-критерий Стьюдента).

Значимость различий относительных показателей, характеризующих частоту наступления беременности, оценивали с помощью метода χ². Частоты аллелей рассчитывали по закону Харди – Вайнберга. Статистически значимыми считали различия при р < 0,05.

Результаты

В общей когорте пациенток с репродуктивными нарушениями средний возраст составил 33,9 ± 4,6 года (от 26 до 42 лет), индекс массы тела — 22,4 ± 3,8 кг/м² (от 17 до 35,1 кг/м²).

До решения вопроса о назначении цитотерапии все женщины с отягощенным репродуктивным анамнезом из группы исследования прошли многолетний путь диагностики для выявления возможных причин данной патологии и патогенетическую терапию. Наиболее часто встречались воспалительные заболевания органов малого таза (56,5 %), урогенитальные инфекции (46,4 %). Гормональные нарушения (синдром поликистозных яичников, неклассическая форма врожденной дисфункции коры надпочечников, нарушение лютеиновой фазы / ановуляция, нарушение менструального цикла) диагностированы у каждой 7-й женщины (14,2 %). Наружный генитальный эндометриоз и/или аденомиоз диагностирован у 12,9 % пациенток. У 19,5 % женщин был повышенный уровень антител к аннексину V и хорионическому гонадотропину человека. Так, практически в половине случаев встречались воспалительные заболевания органов малого таза и урогенитальная инфекция, причем их лечение выполнено в полном объеме. После коррекции гинекологической и экстрагенитальной патологии и при отсутствии эффекта от назначенной терапии (отсутствии наступления беременности или потере беременности на ранних сроках гестации) рекомендовано более детальное иммунологическое и генетическое исследование.

Всем супружеским парам проведено типирование генов главного комплекса гистосовместимости HLA II класса по трем локусам DRB1, DQA1, DQB1 с помощью аллель-специфической полимеразной цепной реакции.

 

Таблица 1. Варианты трех локусов системы HLA II класса (DRB1, DQA1, DQB1)

Table 1. Variants of the three HLA class II loci (DRB1, DQA1, DQB1)

Локус	Вариант
DQA1	101-102, 103, 201, 301, 401, 501, 601
DQB1	201, 301, 302, 303, 304, 305, 401, 402, 501, 502, 503.1, 504, 601, 602-8
DRB1	01, 03, 04, 06, 07, 08, 09, 10, 11, 12, 15, 16

 

При анализе количества совпадений аллелей в супружеских парах по локусам DQA1, DQB1 и DRB1 исследована частота совпадений по каждому локусу, а также частота аллелей и генотипов у каждого из супругов. Совпадением считали наличие у обоих супругов хотя бы одного случая одинаковых аллелей в локусе. При обнаружении одинаковых вариантов внутри локуса количество совпадений удваивали. Так, присутствие у супружеской пары с генотипом ♀DQA1 103/103 и ♂DQA1 201/103 приравнивали к двум совпадениям по локусу DQA1, а генотип ♀DQA1 103/103 и ♂DQA1 103/103 — к четырем совпадениям по локусу DQA1. Таким образом, максимальное количество возможных совпадений по трем локусам в гене HLA II класса (у) может достигать у = (2n × 3) × 2 = 12, где n — аллель. Это является наиболее отягощающем иммунологическим фактором у пациентов с привычной потерей плода на ранних сроках.

Так, среди супружеских пар с репродуктивными нарушениями (бесплодием, повторными неудачами имплантации при ЭКО и привычным невынашиванием беременности) в 85,7 % случаев установлено совпадение по двум аллелям в системе HLA II класса и более (рис. 1). В парах с репродуктивными нарушениями диагностировано совпадение по 2 аллелям у 16,9 % пар, по 3 — у 33,7 %, по 4 — 10,4 %, по 5 — у 15,6 %, по 6 — у 7,8 %. У двух пар установлено совпадение по 8 и 12 аллелям в трех локусах DQA1, DQB1, DRB1. Из 33 супружеских пар с бесплодием совпадения по двум аллелям и более обнаружено у 79 %, а из 44 пар с привычным невынашиванием беременности — у 90,5 % (р < 0,05).

 

Рис. 1. Распределение по количеству совпадений по системе HLA II класса среди супружеских пар с репродуктивными нарушениями

Fig. 1. Distribution of the matches according to the HLA class II system among married couples with reproductive disorders

 

Таким образом, у 85 % пар с отягощенным репродуктивным анамнезом выявлено совпадение по двум и более локусам в системе HLA II класса, наиболее частыми вариантами аллельных совпадений по двум локусам являются DQA1*0501/DRB1*11/ и DQA1*0501/DQB1*301/ (9,1 и 16,9 % соответственно), по трем локусам DQA1*0201/DQB1*201/DRB1*07/ и DQA1*101-102/DQB1*501/DRB1*01/ (6,5 и 6,5 % соответственно) (табл. 2).

 

Таблица 2. Количество супружеских пар с наиболее частыми гаплотипами HLA II класса (DQA1, DQB1, DRB1) среди супружеских пар с репродуктивными нарушениями

Table 2. Number of couples with the most common HLA class II haplotypes (DQA1, DQB1, DRB1) among couples with reproductive disorders

Количество супружеских пар	DQA1	DQB1	DRB1
6,5 % (n = 5)	–	301	11
6,5 % (n = 5)	101-102	501	–
6,5 % (n = 5)	–	602-8	06
6,5 % (n = 5)	301	–	04
7,8 % (n = 6)	501	201	–
7,8 % (n = 6)	101-102	–	01
7,8 % (n = 6)	101-102	–	01
7,8 % (n = 6)	201	201	–
7,8 % (n = 6)	201	–	07
7,8 % (n = 6)	101-102	602-8	–
9,1 % (n = 7)	501	–	11
16,9 % (n = 13)	501	301	–
6,5 % (n = 5)	201	201	07
6,5 % (n = 5)	101-102	501	01

 

В зависимости от количества совпадений проанализирована частота совпадений у аллелей трех локусов DRB1, DQA1, DQB1 и выделены наиболее значимые (рис. 2).

 

Рис. 2. Распределение наиболее часто встречающихся совпадений у аллелей трех локусов системы HLA II класса (DQA1, DQB1, DRB1) у супружеских пар с репродуктивными нарушениями

Fig. 2. Distribution of the most frequent matches in alleles of the three HLA class II loci (DQA1, DQB1, DRB1) in married couples with reproductive disorders

 

Так, обращает на себя внимание группа из четырех аллелей: совпадения среди них встречались у каждой второй супружеской пары: DQA1*101-102 и DQA1*0501 в 50 % случаев, DQA1*0301 и DRB1*11 в 56,3 % случаев (рис. 2).

Показанием для назначения курса цитотерапии, помимо комплексного иммунологического обследования, было исследование генов HLA II класса. Так, всем супружеским парам на прегравидарном этапе проведены две процедуры цитотерапии в формате монотерапии до 14-го дня м. ц. в течение 2 последовательных м. ц. При наступлении беременности в зависимости от количества совпадений по системе HLA II класса была дополнительно назначена одна (на сроке 5–6 нед.) или две процедуры цитотерапии (на сроке 5–6 и 8–9 нед.). Так, при наличии трех совпадений и менее проводили иммунизацию при беременности однократно, а при наличии 4 совпадений и более — двукратно.

Из 77 женщин, включенных в исследование, у 29 не прошло 12 мес. для регистрации беременности, поэтому из оставшихся 48 супружеских пар, получивших полный курс иммунизации, спустя 12 мес. у 28 (58,3 %) зарегистрировали наступление беременности в течение 6 м. ц. после иммунизации, еще у 4 (8,3 %) женщин — в период 7–12 м. ц. При этом у 16 (33,3 %) женщин беременность не наступила в течение 12 м. ц. после иммунизации (рис. 3). У 21 из 32 (65,6 %) женщин беременность завершилась рождением живых доношенных детей. В 5 (15,6 %) случаях зарегистрирована неразвивающаяся беременность на сроках 5–9 нед., из них в 2 (6,3 %) случаях — по причине хромосомной аномалии у плода. Остальные 6 (18,7 %) женщин в настоящее время беременны.

 

Рис. 3. Эффективность цитотерапии на основании наступления беременности

Fig. 3. Efficacy of cytotherapy based on pregnancy onset

 

На втором этапе исследования пациентки разделены на 2 группы: группа 1 (n = 31) включала женщин с привычным невынашиванием беременности, группа 2 (n = 17) — с первичным бесплодием идиопатического генеза и повторными неудачами имплантации при ЭКО. При анализе клинической эффективности цитотерапии установлено, что среди пациенток из группы 1 беременность наступила в 87 % случаев (у 27 человек), причем у 15 (48,4 %) она закончилась рождением здорового доношенного ребенка, а у 8 (25,8 %) женщин в настоящее время беременность развивается.

Среди пациенток из группы 1 беременность наступила в 35,3 % случаев (у 6 пациенток), при этом у 3 (50 %) женщин из данной когорты беременность закончилась рождением доношенного здорового ребенка, у 2 (33,3 %) беременность развивается, у одной женщины диагностирована неразвивающаяся беременность (рис. 4).

 

Рис. 4. Исходы лечения у обследованных женщин

Fig. 4. Therapy outcomes in the examined women

 

При анализе показателей содержания и активности NK-клеток периферической крови у 47,8 % пациенток определено повышенное количество NK-клеток (CD3⁻CD16⁺CD56⁺) в периферической крови (12,5 % и более), а у 21,4 % пациенток также отмечено повышение спонтанной активности NK-клеток по экспрессии CD107a (2 % и более).

Лабораторная эффективность процедуры цитотерапии была основана на сравнении показателей функциональной активности NK-клеток периферической крови до цитотерапии и через 2 нед. после повторной иммунизации на прегравидарном этапе. Так, наблюдали отчетливую динамику в регуляции иммунной системы: отмечено статистически значимое снижение общего количества NK-клеток на 5,1 % (р = 0,015), а также выявлена тенденция к снижению содержания NKT-клеток и спонтанно активированных NK-клеток (CD107a) на 0,55 и 0,26 % соответственно и повышению уровня индуцируемо активированных NK-клеток (CD107a) на 0,13 % (p > 0,05; рис. 5).

 

Рис. 5. Динамика изменений показателей функциональной активности натуральных киллеров (NK-клеток) и натуральных Т-киллеров (NKТ-клеток) периферической крови до цитотерапии и через две недели после повторной иммунизации. Точки обозначают «выбросы» из общей группы по статистическому анализу, не входящие в 95 % доверительный интервал

Fig. 5. Natural killer (NK) and natural T-killer (NKT) cell functional activity dynamics in peripheral blood before cytotherapy and two weeks after re-immunization. Dots denote “outliers” from the total statistical analysis group outside the 95% confidence interval

 

Таким образом, наиболее высокую клиническую эффективность наблюдали среди пар с привычной потерей плода на ранних сроках гестации в анамнезе по сравнению со значением при первичном бесплодии (87 против 35,3 % наступления беременности; р < 0,01). Одновременно с этим лабораторная эффективность подтверждена в сравнительном анализе показателей функциональной активности NK-клеток периферической крови до цитотерапии и через 2 нед. после повторной иммунизации на прегравидарном этапе, поскольку иммунорегуляторные механизмы направлены на снижение общего количества NK-клеток.

Обсуждение

Метод цитотерапии обладает достаточной эффективностью, однако успех от данной процедуры непосредственно зависит от репродуктивного анамнеза (привычного невынашивания беременности или первичного бесплодия неясного генеза) и количества совпадений в системе HLA II класса у супружеских пар [26].

Ранее доказано, что иммунотерапия отцовскими лимфоцитами увеличивает экспрессию блокирующих APCA (блокирующего фактора) к TCR (T-cell receptor, рецептор Т-клеток), Ab2, MLR-Bf, PIBF (Progesterone-induced-blocking factor, прогестерон-индуцированный блокирующий фактор) и подавляет активность цитокинов Th-1 и NK-клеток [27–29]. Цитотерапия оказывает значительный стимулирующий эффект на развитие плаценты, уменьшая случаи плацентарной недостаточности, частоты задержки внутриутробного развития плода. Так, дефицит указанных антител у женщин с наличием ранних репродуктивных потерь в анамнезе или беременных с угрозой выкидыша [30, 31] ассоциирован с высоким сходством партнеров по HLA-антигенам гистосовместимости [32–34]. Соответственно, для профилактики и лечения привычного невынашивания беременности предложен метод иммунизации лимфоцитами отца, позволяющий индуцировать появление блокирующего фактора [35–37].

За последнее десятилетие накапливаются данные и идет пересмотр взглядов акушеров-гинекологов и иммунологов на цитотерапию: врачи и ученые пытаются разработать более персонифицированный подход при ее назначении и оценке критериев клинической и лабораторной эффективности.

Так, Е.И. Антух и соавт. в 2011 г. провели исследование чтобы определить эффективность иммунизации лимфоцитами мужа беременных женщин с идиопатическим привычным невынашиванием беременности в анамнезе. Полученные результаты позволили рекомендовать обследование HLA-совместимости супружеских пар с идиопатическим бесплодием, привычным невынашиванием беременности неясного генеза, двумя неудачными попытками ЭКО в анамнезе и более, так как была показана эффективность применения метода иммунизации лимфоцитами мужа у женщин при HLA-совместимости партнеров [38].

В 2021 г. Г.Х. Мамедли и соавт. проанализировали иммуногенетические данные 60 супружеских пар с ранними репродуктивными потерями [39]. Установлено, что полное несовпадение HLA-генотипов было благоприятным фактором для развития беременности. Совпадение по трем антигенам и более системы HLA класса II являлось фактором, повышающим риск ранних потерь беременности. Показаниями для лимфоцитиммунотерапии стали совместимость супругов по антигенам системы HLA по трем аллелям и более, а также гомозиготность супругов по локусам HLA-DRB*1, DQA1* и DQB1*. Анализ клинической эффективности показал, что лимфоцитиммунотерапия увеличивает частоту наступления (76,3 и 36,4 % соответственно; р < 0,05) и вынашивания (82,7 и 0,0 % соответственно; р < 0,001) беременности у супружеских пар с высокой степенью HLA-совместимости. Важным итогом стало следующее: использование только медикаментозной сохраняющей терапии (включая спазмолитические средства, седативные препараты, витамины, антиагреганты, дидрогестерон) в группе сравнения у женщин с HLA-совместимостью с супругом без лимфоцитиммунотерапии ни в одном случае не способствовало сохранению беременности.

Известно, что совпадение по двум локусам и более системы HLA II класса ассоциировано с привычными репродуктивными потерями, и чем больше наблюдают идентичных аллелей по системе HLA, тем выше риск бесплодия или репродуктивных потерь очень раннего срока [26]. Повышенная частота совпадений по локусам главного комплекса гистосовместимости характеризует отдельно взятые популяции, где в культуре есть близкородственные связи или браки между дальними родственниками 4-го, 5-го, 6-го поколения. И чем ярче проявляется данная особенность, тем вероятность совпадения по системе HLA выше, что обосновано накоплением на протяжении многих столетий «иммунологического и генетического груза».

Известно, что иммунологические взаимоотношения между матерью и плодом представляют собой двунаправленную связь. В ее основе лежит, с одной стороны, презентация антигена плода, а с другой — распознавание этих антигенов и реакция на них иммунной системы матери [40, 41]. Таким образом, иммунологическое распознавание беременности необходимо для ее благоприятного течения и развития, а неадекватное распознавание фетальных антигенов может привести к ее прерыванию.

Заключение

Применение цитотерапии является эффективным методом иммунокоррекции у пациентов с привычной потерей плода и в 87 % случаев приводит к наступлению беременности, а в 74 % — к ее пролонгированию после 13 нед. Так, прегестационная подготовка в формате монотерапии и комплексное назначение цитотерапии одновременно со стандартной сохраняющей терапией способствовало снижению частоты ранних потерь беременности. Эффект процедуры оправдан ее иммунорегуляторными функциями, что проявлено в снижении общего количества NK-клеток.

Дополнительная информация

Источник финансирования. Исследование выполнено в рамках научно-исследовательской работы «Разработка методов комплексной иммуноэфферентной терапии у супружеских пар с иммунологическими причинами репродуктивных потерь», номер государственной регистрации научно-исследовательских, опытно-конструкторских и опытно-технологических работ FGWN-2023-0002.

Конфликт интересов. Авторы декларируют отсутствие явных и потенциальных конфликтов интересов, связанных с публикацией настоящей статьи.

Вклад авторов. Все авторы внесли существенный вклад в разработку концепции, проведение исследования и подготовку статьи, прочли и одобрили финальную версию перед публикацией.

Наибольший вклад распределен следующим образом: М.О. Шенгелия — концепция и дизайн исследования, обзор литературы, цитотерапия, сбор и обработка материалов, анализ полученных данных, написание текста, внесение окончательной правки; О.Н. Беспалова — концепция и дизайн исследования, написание текста, внесение окончательной правки; Т.С. Жернакова, Е.А. Корнюшина, О.В. Пачулия — написание текста, внесение окончательной правки; В.А. Семёнов — сбор и обработка материалов, выделение клеток для лейковзвеси при цитотерапии, анализ полученных данных.

Этический комитет. Протокол исследования был одобрен локальным этическим комитетом НИИ АГиР им. Д.О. Отта (№ 11 от 20.01.2022).

Additional information

Funding source. The study was carried out within the framework of research “Development of methods of complex immunoefferent therapy in married couples with immunological causes of reproductive losses” state registration number FGWN-2023-0002.

Competing interests. The authors declare that they have no competing interests.

Author contribution. All the authors have made a significant contribution to the development of the concept, research, and preparation of the article as well as read and approved the final version before its publication.

Personal contribution of the authors: M.O. Shengelia — concept and design of the study, literature review, cytotherapy, collecting and preparation of samples, data analysis, text writing, making final edits; O.N. Bespalova — concept and design of the study, text writing, making final edits; T.S. Zhernakova, E.A. Kornyushina, O.V. Pachuliia — text writing, making final edits; V.A. Semenov — collecting and preparation of samples, isolating cells for leukemia suspension during cytotherapy, data analysis.

Ethics approval. The present study protocol was approved by the local Ethics Committee of the Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology named after D.O. Ott (No. 11 dated 20.01.2022).

 

¹ LIT-1 — Leukocyte Ig-like receptor, лейкоцитарный иммуноглобулиноподобный рецептор.

About the authors

Margarita O. Shengeliia

The Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology named after D.O. Ott

Author for correspondence.
Email: bakleicheva@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-0103-8583
SPIN-code: 7831-2698

MD, Cand. Sci. (Medicine)

Russian Federation, Saint Petersburg

Olesya N. Bespalova

The Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology named after D.O. Ott

Email: shiggerra@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-6542-5953
SPIN-code: 4732-8089

MD, Dr. Sci. (Medicine)

Russian Federation, Saint Petersburg

Tatiana S. Zhernakova

The Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology named after D.O. Ott

Email: tatazhernakova@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-5131-4363
SPIN-code: 3913-7697

MD

Russian Federation, Saint Petersburg

Ekaterina A. Kornyushina

The Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology named after D.O. Ott

Email: hapacheva@yandex.ru
ORCID iD: 0009-0003-5918-2697
SPIN-code: 5844-1975

MD, Cand. Sci. (Medicine)

Russian Federation, Saint Petersburg

Olga V. Pachuliia

The Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology named after D.O. Ott

Email: for.olga.kosyakova@gmail.com
ORCID iD: 0000-0003-4116-0222
SPIN-code: 1204-3160
Scopus Author ID: 57299197900

MD, Cand. Sci. (Medicine)

Russian Federation, Saint Petersburg

Vyacheslav A. Semenov

The Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology named after D.O. Ott

Email: semenov.v.a@gmail.com
ORCID iD: 0009-0001-1777-9650
Russian Federation, Saint Petersburg

References

Supplementary files