Species diversity of vaginal lactobacilli in norm and in dysbiotic states

Full Text

Введение

Состав вагинального биотопа является индикатором репродуктивного здоровья женщины. Нормальная вагинальная микрофлора женщин детородного возраста на 98 % представлена лактобациллами.

Ранее в качестве доминирующего вида вагинальной микробиоты рассматривали вид Lactobacillus acidophilus. Позже при секвенировании гена 16S rRNA удалось выявить, что L. acidophilus представляет собой комплекс, включающий несколько видов вагинальных лактобацилл: собственно, L. acidophilus, а также L. crispatus, L. gasseri, L. jensenii, L. Iners, L. johnsonii и некоторые другие. Из всего разнообразия вагинальных лактобацилл доминирующими являются четыре вида лактобацилл группы Lactobacillus acidophilus: L. crispatus, L. jensenii, L. gasseri и L. Iners [1].

В процессе своего нормального метаболизма лактобациллы способны образовывать молочную кислоту и перекись водорода, поддерживая низкое значение рН (3,8–4,4) вагинальной среды. Выработка молочной кислоты происходит в результате расщепления гликогена — основного пищевого субстрата лактобацилл, вырабатываемого клетками вагинального эпителия под влиянием эстрогенов. Также эстрогены стимулируют формирование рецепторов для лактобацилл на эпителии влагалища [2].

Еще одним важным свойством лактобацилл является их способность к продукции перекиси водорода. Изучение вагинальных лактобацилл показало, что L. crispatus, L. jenseni и L. vaginalis — наиболее часто встречающиеся виды перекисьпродуцирующих лактобацилл [3]. Отсутствие перекисьпродуцирующих лактобацилл во влагалище связано с увеличением частоты встречаемости бактериального вагиноза, с повышенным риском распространения ВИЧ через женский генитальный тракт, приобретением вируса простого герпеса 2-го типа и преждевременными родами [4, 5, 16]. Наличие же лактобацилл, продуцирующих высокий уровень перекиси водорода, наоборот, ассоциировано с низкой частотой бактериального вагиноза и хориоамнионита при беременности [3, 6].

Лактобациллы способны образовывать защитные биопленки благодаря тропности к влагалищному эпителию и агрегации между собой. Разные штаммы лактобацилл различаются по своей способности к ауто- и коагрегации с другими микроорганизмами. У лактобацилл комплекса L. аcidophilus максимально выражены свойства к аутоагрегации и крайне низка способность к коагрегации с патогенами. Это создает барьер, препятствующий адгезии патогенов на эпителии, что также является важным механизмом противомикробной защиты [7].

Среди видового разнообразия лактобацилл, населяющих вагинальный биотоп, L. Iners занимает особое место. Этот вид был идентифицирован сравнительно недавно, в 1999 году [8], и роль его в поддержании вагинального здоровья женщины пока неясна. Так, L. Iners достаточно часто обнаруживается как в условиях нормоценоза, так и при дисбиозах. L. Iners не продуцирует перекись водорода и имеет способность адаптироваться к повышенным значениям pH вагинальной среды [9]. Вид L. Iners является труднокультивируемым микроорганизмом и требует дополнительных ростовых факторов, очень изменчив по морфологическим и тинкториальным свойствам.

Изучение генома L. Iners показало, что он является наименьшим среди всех геномов лактобацилл. Необычно маленький геном — около 1 Mbp (у других вагинальных лактобацилл — 3–4 Mbp) — свидетельствует о симбиотическом или паразитарном образе жизни L. Iners. Геном имеет 65 чужеродных генов, 26 из которых несут аминокислотные последовательности, нехарактерные для рода Lactobacillus. Благодаря уникальному строению своего генома L. Iners обладает способностью быстро приспосабливаться к меняющимся условиям окружающей среды, переключая свой метаболизм и используя в качестве пищевых ресурсов не гликоген, а другие вещества. Так, в условиях дисбиоза L. Iners продуцирует холестеринзависимый цитолизин — инеролизин, разрушающий клеточные стенки, и использует глицерин разрушенных клеточных мембран в качестве нового пищевого субстрата [10, 11]. При этом происходит гибель других видов лактобацилл, снижение концентрации молочной кислоты и повышение рН вагинальной среды. Это приводит к размножению анаэробов, ассоциированных с бактериальным вагинозом, которые стремительно занимают освободившуюся нишу. Таким образом, L. Iners не способны, подобно другим лактобациллам, эффективно защищать женский организм от патогенных микроорганизмов, а наоборот, предрасполагают к заселению влагалища условно-патогенной микрофлорой. L. Iners часто встречается при бактериальном вагинозе, обнаруживается у женщин при преждевременных родах [11, 12]. Однако частота встречаемости L. Iners в качестве доминирующего вида при нормоценозе также не редкость [13]. Большинство исследователей указывает на явное преобладание L. crispatus в биотопе здоровых женщин, в то время как L. gasseri и L. Iners в 4 раза чаще встречаются у женщин с бактериальным вагинозом [14–17].

Целью данного исследования было изучение видового и количественного состава вагинальных лактобацилл женщин репродуктивного возраста при физиологическом и дисбиотическом состояниях микробиоценоза влагалища.

Материалы и методы

Обследуемую популяцию составили пациентки поликлинических отделений ФГБНУ «НИИ АГиР им. Д.О. Отта». Биоматериалом для лабораторного исследования было отделяемое влагалища. ПЦР-амплификацию, анализ продуктов ПЦР и интерпретацию результатов проводили с использованием тест-системы Фемофлор-16 (ДНК-Технология, Москва) и тест-системы для исследовательских целей, позволяющей определить семь наиболее распространенных видов вагинальных лактобацилл (L. crispatus, L. Iners, L. jensenii, L. gasseri, L. johnsonii, L. vaginalis и L. acidophilus) (ДНК-Технология, Москва). Оба теста основаны на методе количественной ПЦР в режиме реального времени. Амплификацию проводили с помощью детектирующего амплификатора ДТ-96 (ДНК-Технология, Москва). Концентрацию ДНК выражали в количестве геномных эквивалентов в 1 мл.

Для анализа различий в распределении категориальных переменных в группах пациенток использовали критерий хи-квадрат для линейного тренда, при анализе количественных переменных применяли U-тест Манна — Уитни. Для оценки связи относительной концентрации лактобацилл с категорией микробиоценоза рассчитывали коэффициент корреляции Спирмена. Статистический анализ результатов проводили с использованием статистического пакета SPSS (IBM).

Результаты

Клинический материал для исследования был получен от 123 женщин в возрасте от 15 до 54 лет (средний возраст — 34,5 года). Наиболее часто среди всех женщин выявлялся вид L. jensenii (у 53 женщин, 43 %), за ним следовали L. Iners (у 51 женщины, 41 %), L. crispatus и L. vaginalis (каждый у 49 женщин, 40 %), L. gasseri (у 44 женщин, 36 %), L. johnsonii (у 32 женщин, 26 %), L. acidophilus (у 17 женщин, 14 %). По результатам теста Фемофлор установили, что микробиоценоз влагалища был охарактеризован у 65 женщин как нормоценоз, у 14 — условный нормоценоз, у 21 — умеренный дисбиоз, у 23 — выраженный дисбиоз. Показатели (в процентном отношении) изучаемых видов лактобацилл у женщин с различными характеристиками микробиоценоза влагалища представлены на рис. 1. При нормоценозе превалирующим по частоте был вид L. crispatus (57 %), при условном нормоценозе чаще других выявляли вид L. vaginalis (71 %), при умеренном дисбиозе — L. gasseri (67 %), при выраженном дисбиозе — L. Iners (39 %).

 

Рис. 1. Частота выявления ДНК видов лактобацилл у женщин с различными характеристиками микробиоценоза влагалища (по результатам теста Фемофлор)

 

Для изучения различий в видовом и количественном составе лактобациллярной микрофлоры при физиологическом и дисбиотическом состояниях микробиоценоза влагалища все женщины были разделены на три группы. Первую группу составили женщины с физиологическим микробиоценозом влагалища (куда вошли пациентки с нормоценозом и условным нормоценозом). Во вторую группу вошли женщины с умеренным дисбиозом влагалища, в третью — женщины с выраженным дисбиозом влагалища. Такие виды лактобацилл, как L. crispatus, L. jensenii, L. acidophilus и L. vaginalis, чаще выявлялись при физиологическом микробиоценозе влагалища. При умеренном и выраженном дисбиозе влагалища частота обнаружения этих видов лактобацилл значительно снижалась (табл. 1). Особенно значимые различия были показаны для вида L. crispatus, частота выявления которого при нормоценозе почти в 2 раза превышала частоту при умеренном дисбиозе и в 13 раз при выраженном дисбиозе. Для видов L. Iners, L. gasseri и L. johnsonii подобной тенденции не установлено.

 

Таблица 1. Сравнение частоты выявления ДНК видов лактобацилл у женщин с физиологическим и нарушенным микробиоценозом влагалища

Table 1. Comparison of the frequency of detection of Lactobacillus species DNA in women with physiological and disturbed vaginal microbiocenosis

Вид лактобацилл	Число женщин (%)				Значение р-trend
	Все женщины (n = 123)	Женщины с физиологическим микробиоценозом влагалища* (n = 79)	Женщины с умеренным дисбиозом влагалища (n = 21)	Женщины с выраженным дисбиозом влагалища (n = 23)
L. Iners	51 (41)	38 (48)	4 (19)	9 (39)	0,182
L. crispatus	49 (40)	42 (53)	6 (29)	1 (4)	0,000
L. jensenii	53 (43)	41 (52)	6 (29)	6 (26)	0,012
L. gasseri	44 (36)	22 (28)	14 (67)	8 (35)	0,152
L. johnsonii	32 (26)	15 (19)	12 (57)	5 (22)	0,236
L. acidophilus	17 (14)	16 (20)	1 (5)	0 (0)	0,006
L. vaginalis	49 (40)	34 (43)	12 (57)	3 (13)	0,043
* в группу вошли женщины с микробиоценозом влагалища, определенным с применением теста Фемофлор как нормоценоз или условный нормоценоз

 

Количество видов лактобацилл, выявляемых у одной женщины, варьировало от 1 до 6. У 34 женщин был обнаружен один вид лактобацилл, у 89 женщин присутствовали два и более видов лактобацилл. Видовое разнообразие лактобацилл (выявление ≥2 видов) наблюдалось значительно чаще у женщин с физиологическим микробиоценозом (64 из 79, 81 %) и у женщин с умеренным дисбиозом (18 из 21, 86 %), чем у женщин с выраженным дисбиозом влагалища (7 из 23, 30 %) (р-trend = 0,000).

Для проверки предположения о связи количества видов лактобацилл с их общей концентрацией в образце и, следовательно, состоянием микробиоценоза влагалища было проведено сравнение концентраций общей лактобациллярной микрофлоры в образцах, содержащих один вид лактобацилл, и образцах, содержащих два и более видов лактобацилл. В образцах, содержащих один вид лактобацилл, концентрация общей лактобациллярной микрофлоры была значительно ниже (диапазон 1,6 × 103 – 6,3 × 107, медиана 7,9 × 105), чем в образцах, содержащих два и более видов лактобацилл (диапазон 105 – 6,3 × 107, медиана 5 × 106) (р = 0,000).

С учетом того что большинство вагинальных проб содержали несколько видов лактобацилл, был проведен сравнительный анализ частоты видов лактобацилл в норме и при дисбиозах после определения доминирующего вида в каждом образце. Доминирующим считали вид, концентрация которого относительно общей концентрации лактобациллярной микрофлоры составляла 50 % и более. L. Iners были доминирующим видом у 41 женщины, L. crispatus — у 35 женщин, L. jensenii — у 14 женщин, L. gasseri — у 29 женщин, L. acidophilus — у 1 женщины (табл. 2), при этом у двух женщин доминирующими были признаны два вида лактобацилл — L. Iners и L. crispatus, так как их содержание было равным. В 5 образцах относительная концентрация всех изучаемых видов лактобацилл была существенно ниже 50 %, поэтому эти образцы были исключены из данного анализа. L. crispatus как доминирующий вид значительно чаще выявлялись в норме, чем при дисбиозе влагалища, тогда как L. jensenii и L. gasseri значительно чаще обнаруживались при дисбиозе влагалища, чем в норме. Для L. Iners и L. acidophilus статистически значимых различий между группами не выявлено. L. johnsonii и L. vaginalis ни в одном образце не были доминирующими видами, и показатели их максимального содержания составили 2 и 6 % соответственно.

 

Таблица 2. Сравнение частоты выявления видов лактобацилл (по доминирующему виду) при физиологическом и нарушенном микробиоценозе влагалища

Table 2. Comparison of the frequency of detection of Lactobacillus species DNA (according to a dominating species) in women with physiological and disturbed vaginal microbiocenosis

Вид лактобацилл	Число женщин (%)				Значение р-trend
	Все женщины (n = 118)	Женщины с физиологическим микробиоценозом влагалища* (n = 78)	Женщины с умеренным дисбиозом влагалища (n = 19)	Женщины с выраженным дисбиозом влагалища (n = 21)
L. Iners	41 (35)	28 (36)	4 (21)	9 (43)	0,842
L. crispatus	35 (30)	34 (44)	1 (5)	0 (0)	0,000
L. jensenii	14 (12)	5 (6)	3 (16)	6 (29)	0,005
L. gasseri	29 (25)	12 (15)	11(58)	6 (29)	0,028
L. acidophilus	1 (1)	1 (1)	0 (0)	0 (0)	0,507
* в группу вошли женщины с микробиоценозом влагалища, определенным с применением теста Фемофлор как нормоценоз или условный нормоценоз

 

При оценке проб, содержащих единственный вид лактобацилл, было определено, что при нормоценозе один вид лактобацилл встречался у 15 из 34 женщин (44 %), при умеренном дисбиозе — у 3 из 34 (9 %) и при выраженном дисбиозе — у 16 из 34 (47 %). При этом наиболее часто встречающимися единственными видами были L. Iners, L. crispatus и L. jensenii (табл. 3). L. johnsonii ни разу не были идентифицированы как единственный вид лактобацилл. Самым частым единственным видом при нормоценозе был L. crispatus (определялся в 40 % проб), при выраженном дисбиозе — вид L. Iners (был выявлен у 56 % женщин этой группы).

 

Таблица 3. Сравнение частоты выявления видов лактобацилл при физиологическом и нарушенном микробиоценозе влагалища в образцах, содержащих единственный вид лактобацилл

Table 3. Comparison of the frequency of detection of Lactobacillus species DNA in women with physiological and disturbed vaginal microbiocenosis in samples containing a single Lacobacillus species

Вид лактобацилл	Число женщин (%)				Значение р-trend
	Все женщины (n = 34)	Женщины с физиологическим микробиоценозом влагалища* (n = 15)	Женщины с умеренным дисбиозом влагалища (n = 3)	Женщины с выраженным дисбиозом влагалища (n = 16)
L. Iners	14 (41)	5 (33)	0 (0)	9 (56)	0,197
L. crispatus	7 (21)	6 (40)	1 (33)	0 (0)	0,007
L. jensenii	8 (24)	2 (13)	1 (33)	5 (31)	0,249
L. gasseri	3 (9)	1 (7)	0 (0)	2 (13)	0,569
L. acidophilus	1 (3)	1 (7)	0 (0)	0 (0)	0,281
L. vaginalis	1 (3)	0 (0)	1 (33)	0 (0)	0,975
* в группу вошли женщины с микробиоценозом влагалища, определенным с применением теста Фемофлор как нормоценоз или условный нормоценоз

 

Для изучения ассоциации относительной концентрации лактобацилл с категорией микробиоценоза использовали корреляционный анализ. Относительная концентрация L. Iners, L. crispatus, L. jensenii, L. acidophilus, L. vaginalis значительно снижалась в направлении от физиологического микробиоценоза влагалища к умеренному и выраженному дисбиозу, тогда как для L. gasseri и L. johnsonii такой закономерности не выявлено (табл. 4).

 

Таблица 4. Анализ корреляции относительной концентрации лактобацилл с категорией микробиоценоза

Table 4. Analysis of correlation of the relative concentration of Lactobacillus species with a microbiocenosis category

Вид лактобацилл	Коэффициент корреляции	Значение р
L. Iners	–0,214	0,018
L. crispatus	–0,424	0,000
L. jensenii	–0,211	0,019
L. gasseri	0,130	0,151
L. johnsonii	0,100	0,272
L. acidophilus	–0,180	0,046
L. vaginalis	–0,198	0,028

 

Для количественной оценки содержания каждого вида лактобацилл в отделяемом влагалища рассчитывали концентрацию лактобацилл в образце по отношению к общей бактериальной массе, включающей другие микроорганизмы. На рис. 2 представлены средние значения относительных концентраций (долей) изучаемых видов лактобацилл у женщин с нормоценозом, умеренным и выраженным дисбиозом (рис. 2). Средние доли L. Iners, L. crispatus и L. jensenii уменьшались в направлении от физиологического микробиоценоза влагалища к умеренному и выраженному дисбиозу. Средняя доля L. gasseri при умеренном дисбиозе влагалища в 2 раза превышала долю при нормоценозе. Средние доли L. johnsonii, L. acidophilus и L. vaginalis не превышали 1 %.

 

Рис. 2. Средние значения относительных концентраций изучаемых видов лактобацилл (1 — L. iners, 2 — L. crispatus, 3 — L. jensenii, 4 — L. gasseri, 5 — L. johnsonii, 6 — L. acidophilus, 7 — L. vaginalis) в составе микрофлоры влагалища у женщин с нормоценозом (слева), с умеренным дисбиозом (в середине), с выраженным дисбиозом (справа)

 

Обсуждение и заключение

Лактобациллы являются самыми часто обнаруживаемыми микроорганизмами в вагинальном биотопе женщин репродуктивного возраста. Эстрогензависимая способность лактобацилл к адгезии на эпителиальных клетках влагалища, продукция ими перекиси водорода, молочной кислоты и антибиотикоподобных веществ обеспечивают барьерную функцию, препятствуя размножению условно-патогенных микроорганизмов [2].

Большинство исследований, посвященных изучению видового состава вагинальных лактобацилл у женщин репродуктивного возраста, свидетельствует о том, что L. crispatus, L. jensenii, L. Iners и L. gasseri являются самыми распространенными видами вагинального биотопа женщин с учетом их этнической принадлежности, полового поведения и гигиенических особенностей. При этом вид L. crispatus доминирует у женщин с физиологическим микробиоценозом влагалища. В различных исследованиях имеются многочисленные указания на возможные причинно-следственные связи между обнаружением видов L. Iners и L. gasseri с развитием дисбиотических состояний микробиоценоза влагалища, а L. Iners — с риском развития бактериального вагиноза.

В нашей работе установлено, что наиболее часто у женщин нашего региона выявлялся вид L. jensenii (у 43 % женщин), за ним следовали L. Iners (41 %), L. crispatus и L. vaginalis (каждый по 40 %) и L. gasseri (36 %). При изучении различий видового и количественного состава лактобацилл у женщин с физиологическим и дисбиотическим состоянием вагинального биотопа для видов L. crispatus, L. jensenii, L. acidophilus и L. vaginalis выявили значительное снижение частоты встречаемости при дисбиозах влагалища по сравнению с физиологическим микробиоценозом. Особенно это показательно для вида L. crispatus, частота выявления которого при нормоценозе (53 %) почти в 2 раза превышала частоту при умеренном дисбиозе (29 %) и в 13 раз при выраженном дисбиозе (4 %).

В одном биотопе чаще обнаруживаются два и более вида лактобацилл. В нашем исследовании в 72 % проб лактобациллярная микрофлора была представлена несколькими видами. Видовое разнообразие лактобацилл (выявление ≥ 2 видов в одном биотопе), наблюдавшееся значительно чаще у женщин с физиологическим микробиоценозом (81 %) и с умеренным дисбиозом (86 %), чем у женщин с выраженным дисбиозом влагалища (30 %), свидетельствует о создании оптимальных условий для колонизации вагинального биотопа различными видами лактобацилл комплекса L. acidophilus и их симбиотическом сосуществовании [18]. Это подтверждается и тем, что в образцах, содержащих несколько видов лактобацилл, концентрация общей лактобациллярной микрофлоры была значительно выше, чем в образцах c одним видом лактобацилл.

При оценке образцов, содержащих один вид лактобацилл, отмечено явное преобладание видов L. Iners, L. jensenii и L. crispatus. При этом L. Iners превалировали над всеми остальными видами лактобацилл в пробах от женщин с выраженным дисбиозом (56 %). Такое значительное преобладание L. Iners при выраженном дисбиозе подтверждает способность этого вида лактобацилл приспосабливаться к самым неблагоприятным условиям вагинальной среды [11]. Доминирующим единственным видом при нормоценозах был вид L. crispatus. При выраженном дисбиозе L. crispatus как единственный вид отсутствовал.

Очевидное преобладание L. crispatus при нормоценозе соответствует данным литературы о доминировании этого вида в биотопе здоровых женщин [14, 15, 18]. Это объясняется способностью L. crispatus поддерживать постоянство микробиоценоза влагалища за счет выраженных протективных свойств, препятствующих размножению условно-патогенных микроорганизмов [19, 20].

Согласно литературным данным вид L. Iners часто встречается как при физиологическом состоянии микробиоценоза, так и при дисбиозе влагалища [13, 17], что также подтверждает и наше исследование. При сравнении частоты выявления ДНК видов лактобацилл у женщин с физиологическим и нарушенным микробиоценозом влагалища L. Iners обнаруживался у 48 % женщин с нормоценозом и у 39 % с выраженным дисбиозом. Но, в отличие от L. crispatus, L. Iners, вероятно, не так эффективно препятствует размножению условно-патогенной микрофлоры. Возможно, L. Iners имеет несколько фенотипов, одни из которых способствуют поддержанию физиологического микробиоценоза, а другие связаны с возникновением дисбиоза.

Неоднозначна и роль вида L. gasseri в поддержании постоянства микробиоценоза влагалища. В нашем исследовании этот вид часто встречался при дисбиозах: доминировал в группе умеренных дисбиозов (67 %) и был второй по частоте встречаемости после L. Iners в группе выраженных дисбиозов, а количество L. gasseri при выраженном дисбиозе по сравнению с нормоценозом при оценке проб с единственным видом лактобацилл двукратно увеличилось. По данным литературы, L. gasseri, как и L. Iners, имеет сравнительно небольшой геном (около 2 Mbp) [21] и лишь до 15 % всех штаммов L. gasseri способны продуцировать перекись водорода [17]. Это может свидетельствовать о более низкой способности вида L. gasseri к поддержанию постоянства микробиоценоза влагалища.

Таким образом, данное исследование показывает, что в нашем регионе наиболее распространенными видами вагинальных лактобацилл являются L. jensenii, L. Iners, L. crispatus, L. vaginalis и L. gasseri. Видовое разнообразие лактобацилл (выявление ≥2 видов) наблюдается значительно чаще у женщин с физиологическим микробиоценозом, чем у женщин с дисбиозом влагалища. Интереса заслуживает высокая частота выявления вида L. vaginalis, которому в литературе уделяется мало внимания. Наше исследование подтверждает, что L. crispatus является доминирующим видом вагинального биотопа здоровых женщин, а при дисбиозах наиболее часто определяются виды L. gasseri и L. Iners.

На основании проведенного анализа можно сделать вывод, что превалирование в вагинальном биотопе видов L. crispatus и L. jensenii является хорошим условием для поддержания постоянства микробиоценоза влагалища. Выявление же L. gasseri и L. Iners в качестве доминирующих видов микробиоценоза влагалища может свидетельствовать о предпосылке перехода к дисбиотическому состоянию. Однако необходимо подчеркнуть, что достаточно частое присутствие L. Iners как в пробах с нормоценозом, так и в пробах с выраженным дисбиозом побуждает с осторожностью интерпретировать связь этого вида лактобацилл с риском возникновения бактериального вагиноза.

About the authors

Olga V Budilovskaya

FSBSI “The Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology named after D.O. Ott”

Author for correspondence.
Email: o.budilovskaya@gmail.com

Researcher, Laboratory of Microbiology

Russian Federation, Saint Petersburg, Russia

Elena V Shipitsyna

FSBSI “The Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology named after D.O. Ott”

Email: shipitsyna@inbox.ru

Senior Researcher, Laboratory of Microbiology

Russian Federation, Saint Petersburg, Russia

Ekaterina N Gerasimova

FSBSI “The Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology named after D.O. Ott”

Email: iagmail@ott.ru

Researcher, Laboratory of Microbiology

Russian Federation, Saint Petersburg, Russia

Margarita M Safronova

North-western State Medical University named after I.I.Mechnikov

Email: kafedra.pro@mail.ru

MD, Professor, Head of the Department of Women’s Reproductive Health

Russian Federation, Saint Petersburg, Russia

Alevtina M Savicheva

FSBSI “The Research Institute of Obstetrics, Gynecology and Reproductology named after D.O. Ott”

Email: savitcheva@mail.ru

Head of Laboratory of Microbiology

Russian Federation, Saint Petersburg, Russia

References

Supplementary files