Морфологические изменения внутренних органов и иммунной системы у мышей balb/c в отдаленные сроки после спленэктомии

Аннотация

В эксперименте на мышах-самцах линии Balb/c были изучены морфологические изменения в легких, миокарде, печени, почках, тимусе и аксиллярных лимфатических узлах, возникающие на 30-е и 60-е сут после спленэктомии. Полученные в работе результаты патоморфологического исследования говорят о развитии инфекционно-воспалительных процессов, возникающих на фоне вторичного иммунодефицитного состояния в отдаленные сроки после спленэктомии.

Полный текст

Хирургическое удаление селезенки – спленэктомия, проводится при травмах селезенки, цитопенических состояниях различной этиологии, синдроме гиперспленизма, ходжкинских лимфомах, лейкозах и д.р. [3, 6]. Спленэктомия в отдаленные сроки после выполнения операции приводит к развитию так называемого постспленэктомического синдрома, который характеризуется развитием гематологических и иммунологических нарушений [3, 6, 8, 9]. Гематологические нарушения проявляются тромбоцитозом, эритроцитозом, лейкоцитозом в сочетании с моно- и лимфоциозом, что увеличивает риск тромботических осложнений [2, 5]. Иммунологические нарушения характеризуются развитием вторичного иммунодефицитного состояния, обусловленного нарушением антигензависимой дифференцировки В- и Т-лимфоцитов в селезенке. Клиническим проявлением вторичного иммунодефицитного состояния, вызванного спленэктомией, является повышение частоты инфекционных заболеваний, более тяжелое их течение и тенденция к хронизации воспалительного процесса [6, 8, 9, 10, 11]. Изучение динамики морфологических изменений, возникающих в отдаленном периоде после спленэктомии, возможно только в условиях экспериментального исследования. Цель работы – изучить морфологические изменения во внутренних органах и органах иммунной системы у мышей линии Balb/с в отдаленные сроки после спленэктомии. Материалы и методы Работа была выполнена на 40 мышах-самцах линии Balb/c массой тела 18-20 г (питомник Столбовая). Содержание животных и выведение их из эксперимента проводилось в соответствии с приказом Минздрава СССР №755 от 12.08.1977. Мыши были разделены на три группы: контрольная группа, которая состояла из интактных животных и включала 10 мышей, две опытные группы по 15 мышей в каждой со сроками выведения из эксперимента на 30-е и 60-е сут после спленэктомии. Мышам опытных групп проводили спленэктомию под эфирным наркозом. В левом подреберье, параллельно реберной дуге выполнялся косой разрез протяженностью 0,3-0,5 см. В рану выводилась селезенка, на ее ворота накладывалась кетгутовая лигатура, после чего селезенка удалялась. Рана ушивалась послойно кетгутом. Все манипуляции проводились с соблюдением асептики и антисептики. В послеоперационном периоде терапия антибиотиками не проводилась. В течение первых двух суток после операции погибло 5 мышей в обеих опытных группах. Выведение мышей из эксперимента проводилось путем передозировки эфирного наркоза. Для гистологического исследования забирались кусочки легкого, печени, почки, сердца, тимуса, аксиллярные лимфатические узлы. Материал фиксировался в 10% нейтральном формалине, подвергался обезвоживанию и заливке в парафин с последующим изготовлением срезов толщиною 5-7 мкм и окраской их гематоксилином и эозином. Кроме того, срезы миокарда окрашивались железным гематоксилином по Рего для выявления контрактурных изменений, а срезы легких – по Маллори для дифференцировки соединительной ткани и выявления очагов фиброза, а также по Лефлеру для выявления бактерий. Для оценки объемной доли очагов пневмонии и эмфиземы на срезах легких использовали морфометрический метод [1]. Результаты и их обсуждение В легких у всех мышей Balb/с на 30-е сут после спленэктомии выявлялись множественные очаги интерстициальной пневмонии с перифокальной эмфиземой. В очагах пневмонии просветы альвеол были щелевидными, межальвеолярные перегородки резко утолщены за счет инфильтрации лимфоцитами, гистиоцитами и нейтрофилами. В просвете бронхов определялись единичные клетки десквамированного эпителия, нейтрофилы. Эпителиальная выстилка бронхов на всем протяжении сохранена, на небольших участках эпителий был десквамирован. В адвентициальном слое бронхов выявлялась слабовыраженная лимфоидно-гистиоцитарная инфильтрация. При помощи окраски по Лефлеру в пневмонических очагах выявлялись единичные кокки. По данным морфометрического исследования объемная доля очагов интерстициальной пневмонии на 30-е сут после спленэктомии составляла 16,0±5,4%, прифокальной эмфиземы – 9±1,7% (см. табл.). На 60-е сут после спленэктомии в легких у всех мышей наблюдалась очаговая интерстициальная пневмония с фиброзированием, просветы альвеол были очагово уменьшены, в этих зонах межальвеолярные перегородки были утолщены за счет созревающей фиброзной ткани, представленной пучками частично упорядоченных коллагеновых волокон с воспалительной инфильтрацией гистиоцитами, лимфоцитами с примесью нейтрофилов. Вокруг зон пневмонии выявлялась перифокальная эмфизема. В просветах бронхов определялись единичные клетки эпителия, эпителиальная выстилка была сохранена на всем протяжении. В авентициальном слое сосудов и бронхов наблюдалась слабо выраженная лимфоидно-гистиоцитарная инфильтрация. По данным морфометрического исследования объемная доля очагов фиброза и интерстициальной пневмонии на 60-е сут после спленэктомии была ниже, чем на 30-е сут. Эти различия достоверно статистически значимыми не были. Показатели объемной доли эмфиземы достоверно не изменялись (см. табл. 1). Таблица 1 Морфометрическая характеристика легких мышей линии Balb/с в отдаленные сроки после спленэктомии Объемная доля в % 30-е сут 60-е сут Пневмония 16,0±5,4 14,0±6,3 Эмфизема 9,0±1,7 9,0±2,9 Неизмененная ткань 75,0±6,7 77,0±7,5 В легких мышей контрольной группы патологических изменений выявлено не было. В печени на 30-е сут после спленэктомии балочно-дольковая структура была сохранена. В дольках печени, около v. cenralis, наблюдались очаговые микроабсцессы, размеры которых колебались по числу нейтрофилов от 10-15 до 200-300 клеток. При окраске по Лефлеру в микроабсцессах выявлялись единичные кокки. Наблюдалась умеренная и выраженная дистрофия гепатоцитов, полиморфизм их ядер, а также увеличение числа неэпителиальных клеточных элементов. В одном случае нами были обнаружены гиалиновые тромбы в v. centralis. На 60-е по сравнению с 30-ми сут микроабсцессы не выявлялись, наблюдалась усиленная регенерация гепатоцитов с наличием 1-2 митозов в поле зрения при увеличении х400. Наблюдалась слабая и умерено выраженная дистрофия гепатоцитов с полиморфизмом их ядер, единичные митозы в поле зрения при х400. В печени мышей контрольной группы патологических изменений не выявлено. В миокарде на 30-е сут выявлялись очаги гиперэозинофилии кардиомиоцитов, в одном случае в сочетании с очаговым миоцитолизом. При окраске срезов миокарда по Рего были выявлены очаговые контрактурные изменения кардиомиоцитов (рис.3). На 60-е сут после спленэктомии и в контроле в миокарде патологических изменений выявлено не было. В почках на 30-е сут наблюдалась слабо- и умерено выраженная гиалиново-капельная дистрофия эпителия извитых канальцев. На 60-е сут после спеленэктомии и у мышей в контрольной группе в почках патологических изменений не было. В тимусе на 30-е сут наблюдалась акцидентальная инволюция II-III стадии. Корковый слой был гиперплазирован, в нем наблюдалась картина «звездного неба» с очаговым опустошением коры и гибнущими тимоцитами, инверсией слоев, увеличением числа телец Гассаля и формированием кистоподобных полостей. На 60-е сут в тимусе наблюдалась акцидентальная инволюция I-II стадии с увеличением числа телец Гассаля, гибнущими тимоцитами и небольшими очагами опустошения коры. У мышей контрольной группы патологических изменений в тимусе не наблюдалось. В аксиллярных лимфатических узлах на 30-е и 60-е сут после спленэктомии отмечалось расширение паракортикальной зоны, светлые центры лимфоидных узелков были представлены рыхло расположенными лимфоцитами, лимфобластами и вытянутыми эпителиоидоподобными клетками. В строме мозгового слоя располагались лимфоциты, гистиоциты и единичные нейтрофилы. У мышей контрольной группы реактивных изменений в лимфатических узлах не наблюдалось. Выводы Таким образом, по данным морфологического исследования у всех мышей в отдаленные сроки после спленэктомии развивается вторичное иммунодефицитное состояние, характеризующееся акцидентальной инволюцией тимуса и реактивными изменениями лимфатических узлов, а также развитием микроабсцессов в печени и очаговой пневмонии бактериальной этиологии с затяжным течением. Полученные в работе результаты патоморфологического исследования внутренних органов согласуются с данными более ранних авторов [6, 9, 10], в которых показано, что наиболее частым осложнением после спленэктомии является бактериальная пневмония, развивающаяся как в раннем периоде после операции, так и в отдаленные сроки. Данные о формировании микроабсцессов в печени не совпадают с результатами [2], согласно которым в печени у морских свинок на 40-е сут после спленэктомии наблюдается лишь рыхлая лимфоцитарная инфильтрация. Сведения о реактивных изменениях в лимфатических узлах по данным исследования тех же авторов совпадают с результатами, полученными в работе. Таким образом, развитие инфекционно-воспалительных процессов после спленэктомии обусловлено вторичным иммунодефицитным состоянием.