AMINO-ACID COMPOSITION OF UROLOGICAL HERBAL TEA

Abstract

Qualitative & quantitative amino-acid composition of urological herbal tea “Uvaur” which includes manzanita leaves, tickseed, birch gemmae. 19 amino acids are determined in the herbal tea, 9 of which are indispensable. The total content of amino acids is 6,998%, in which 12,34% glutamic acid, 10,38% aspartic acids, 8,69% leucine.

Full Text

Аминокислоты, синтезируемые растениями, играют важную роль в системе жизнеобеспечения, подразделяются на две категории: протеиногенные, входящие в состав белков (20), и непротеиногенные, встречающиеся в растении в свободном виде (свыше 200). Последние выполняют функции транспортной формы азота по растению, являются основной запасной формой азота в семенах, быстро и эффективно регулируют количество доступного NH4+ для растения [8]. Фитопрепараты, к которым относятся и растительные сборы, включают в себя различные группы биологически активных веществ (БАВ), в том числе и аминокислоты. БАВ в растениях находятся в легко усваиваемых человеческим организмом комплексах в биологически доступных концентрациях [1]. Аминокислоты придают БАВ, присутствующим в фитопрепаратах, легко усваиваемую безвредную форму, потенцируя их фармакологический эффект. В сочетании с ними они обеспечивают проявление широкого спектра фармакологического действия [1, 2]. В этой связи оценка аминокислотного состава в лекар ственном растительном сырье и фитопрепаратах может быть актуальна для их стандартизации, что находит отражение в многочисленных публикациях [3-5]. Целью исследования являлась качественная и количественная оценка аминокислотного состава в урологическом сборе «Уваур». Материалы и методы Объектом исследования являлся лекарственный растительный сбор «Уваур», состоящий из листьев толокнянки, травы череды, почек березовых [6, 7]. Для определения общего содержания аминокислот в лекарственном растительном сборе был проведен их кислотный гидролиз в извлечении, полученном из сбора, и определен качественный и количественный состав. Аналитическую пробу сбора измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм. Пробу массой 1,0 г (точная навеска) помещали в круглодонную колбу со шлифом, прибавляли 20 мл 70% спирта этилового, взвешивали с точностью ±0,01 г и нагревали на водяной бане с обратным холодильником в течение 1 часа. Излече 116 Российский медико-биологический вестник имени академика И.П. Павлова, №3, 2015 г. ние затем охлаждали до комнатной температуры, взвешивали и при необходимости доводили 70% спиртом этиловым до первоначальной массы. Полученное извлечение фильтровали через бумажный фильтр. Первые 10 мл фильтрата отбрасывали. Из последующей порции фильтрата отбирали 50 мкл и упаривали досуха в вакуумном испарителе фирмы «Serv-anta» (США). Сухой остаток растворяли в 200 мкл 0,1М раствора кислоты хлористоводородной, нагревали на водяной бане в течение 15 мин при температуре 60°С, перемешивали и центрифугировали в течение 3 мин при скорости 4000 оборотов в минуту. Для анализа использовали 50 мкл полученного гидролизата. Аминокислотный анализ водорастворимых фракций проводили на аминокислотном анализаторе фирмы «Хитачи» модель 835 на стальной колонке (0,4 x 15 см), заполненной катионообменной смолой марки 2619 (Hitachi Customlon Exchange Resin). Разделение аминокислот проводилось в трех системах натрий - цитратных буферных растворов: 0,18 H- pH 3,25; 0,3 H -pH 3,9; 1,6 H- pH 4,75. Нингидриновый реактив готовили с использованием метилового эфира этиленгликоля. Цитратные буферные растворы подавали в колонку по стандартной программе со скоростью 32 мл/час. Нингидриновый реактив подавали со скоростью 20 мл/час. После выхода из аналитической колонки разделенные аминокислоты смешивались с нингидриновым реактивом в смесительном блоке в соотношении 2:1. Реакция аминокислот с нин-гидриновым реактивом проходила за 4 мин при 100°С в реакционной бане. Колориметрическое измерение окрашенных комплексов, образующихся в результате реакции с нингидрином, проводилось непрерывно и одновременно при двух длинах волн. Первичные амины давали пурпурную окраску, оптическую плотность которых измеряли при длине волны 570 нм, а вторичные (пролин и оксипро-лин) образовывали соединения желтой окраски (измерение проводили при длине волны 440 нм). Рис. Хроматограмма спиртового извлечения из урологического сбора «Уваур» 117 Российский медико-биологический вестник имени академика И.П. Павлова, №3, 2015 г. Результаты и их обсуждение Как следует из представленных данных (см. таблицу и рисунок) в лекарственном растительном сборе аминокислотный состав представлен девятнадцатью аминокислотами, из них девять относятся к незаменимым. Наибольшее со держание в сборе отмечается для аминокислот глутаминовой, аспарагиновой, лейцина - 12,34%; 10,38%; 8,69% соответственно. Минимальное содержание установлено для цистеина 0,46%; оксили-зина 0,53%; метионина 1,33%. Таблица Содержание аминокислот в сборе урологическом «Уваур» Название аминокислот Общее содержание аминокислот, % Доля аминокислоты от общего содержания, % Oксипролин 0,125 1,78 Аспарагиновая кислота 0,727 10,38 Треонин 0,342 4,89 Серин 0,362 5,18 Г лутаминовая кислота 0,864 12,34 Пролин 0,488 6,97 Г лицин 0,440 6,29 Аланин 0,450 6,43 Цистеин 0,032 0,46 Валин 0,404 5,77 Метионин* 0,093 1,33 Изолейцин 0,335 4,79 Лейцин* 0,608 8,69 Тирозин 0,245 3,50 Фенилаланин 0,392 5,60 O^^aronn 0,037 0,54 Лизин 0,412 5,88 Гистидин* 0,172 2,47 Аргинин 0,47 6,71 Сумма 6,998 100 * Примечание. незаменимые аминокислоты Выводы 1. Изучен аминокислотный состав урологического сбора «Уваур», включающего листья толокнянки, траву череды, почки березовые, установлено наличие 19 аминокислот, из них 9 - незаменимых. 2. Общее содержание аминокислот урологического сбора составляет 6,998 %, в котором преобладают глутаминовая кислота 12,34 %, аспарагиновая кислота 10,38 %, лейцин 8,69 %.