Abstract

Abstract

Full Text

Введение. По данным Всемирной Организации Здравоохранения до 15 % супружеских пар детородного возраста бесплодны, в 50 % случаев бесплодие в браке обусловлено мужским фактором. При этом в половине случаев причины мужского бесплодия остаются неизвестными. В 15-30 % случаев мужское бесплодие обусловлено генетическими нарушениями, а у мужчин с идиопатическим бесплодием частота выявления фрагментации ДНК сперматозоидов (одно- и двунитевых разрывов) достигает 20 %. Основными причинами фрагментации ДНК сперматозоидов считают нарушение компактизации хроматина в процессе спермиогенеза, окислительный стресс и апоптоз. Целью нашего исследования явилось изучение прогностической значимости фрагментации ДНК сперматозоидов у мужчин, страдающих идиопатической формой бесплодия, в отношении исходов процедур вспомогательных репродуктивных технологий. Пациенты и методы. Основой настоящего исследования являются результаты обследования 20 супружеских пар, страдающих бесплодием в браке по мужскому, женскому или смешанному фактору - 8, 7 и 5 соответственно. У всех 20 мужчин имела место идиопатическая форма бесплодия. Троим половым партнершам этих мужчин в прошлом была выполнена процедуры экстракорпорального оплодотворения (ЭКО), а 17 - ЭКО с интрацитоплазматической инъекцией сперматозоида (ICSI), которые завершились спонтанно замершей на различных сроках (у 11 женщин) или эктопической (у 9 женщин) беременностью. Всем мужчинам выполняли исследование эякулята, включающее, наряду с традиционными методами оценки его качества (подсчет концентрации сперматозоидов в 1 мл, доли прогрессивно-подвижных и нормальных форм) определение степени фрагментации ДНК сперматозоидов с использованием прямого метода детекции ДНК-повреждений - terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated deoxyuridine triphosphate-nick-end labeling assay (TUNEL). Метод TUNEL основан на флуоресцентном мечение одно- и двунитевых разрывов ДНК сперматозоида с помощью фермента терминальной нуклеотидтрансферазы (TdT), которая присоединяет к свободному 3’ концу поврежденной ДНК меченый флуорохромом дезоксиуридинтрифосфат (dUTP) с последующей детекцией флуоресцентного сигнала с использованием цитофлуориметра или флуоресцентного микроскопа. Пороговым значением доли сперматозоидов с фрагментированной ДНК считали 20 %. При оценке параметров эякулята руководствовались критериям ВОЗ (2010 год). Результаты. Исследование эякулята выявило различные нарушения показателей сперматогенеза у всех мужчин, находившихся под наблюдением: олигозооспермию - у 2 (10 %), олигоастенозооспермию - у 3 (15 %), тератозооспермию - у 3 (15 %), астенотератозооспермию - у 4 (20 %) и олигоастенотератозооспермию - у 8 (40 %) пациентов. Фрагментация ДНК сперматозоидов была диагностирована у 6 из 20 (30 %) мужчин. У четверых из них имело место превышение порогового значения степени фрагментации ДНК сперматозоидов, причем это были 4 из 11 (36 %) мужчин, у половых партнерш которых после ЭКО/ICSI имела место замершая беременность. Ни у оного из 9 мужчин, у половых партнерш которых после ЭКО/ICSI возникала эктопическая беременность, не было выявлено повышения степени фрагментации ДНК сперматозоидов. Заключение. Полученные результаты свидетельствуют о том, что целостность ДНК сперматозоидов имеет самостоятельное прогностическое значение наряду с параметрами стандартного спермиологического анализа эякулята. Пороговым значением показателя степени фрагментации ДНК сперматозоида, определяемым методом TUNEL, можно считать 20 %. В случае превышения данного показателя возрастает вероятность спонтанно замершей беременности после процедур ЭКО/ICSI, а вероятность эктопической - не изменяется.