Рекомбинантная продукция и структурно-функциональная характеристика токсина Ts1 из яда бразильского скорпиона Tityus serrulatus
- Авторы: Шенкарёв З.О.1,2, Шулепко М.А.1,3, Пеньёр С.4, Мышкин М.Ю.1,2, Беркут А.А.1,2, Василевский А.А.1,2, Титгат Я.4, Люкманова Е.Н.1,3, Кирпичников М.П.1,3
-
Учреждения:
- Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской Академии наук
- Московский физико-технический институт (государственный университет)
- Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова
- Лёвенский католический университет
- Выпуск: Том 484, № 1 (2019)
- Страницы: 112-116
- Раздел: Биохимия, биофизика, молекулярная биология
- URL: https://journals.eco-vector.com/0869-5652/article/view/12154
- DOI: https://doi.org/10.31857/S0869-56524841112-116
- ID: 12154
Цитировать
Полный текст
Аннотация
Разработана эффективная бактериальная система продукции β-токсина Ts1 – основного компонента яда бразильского скорпиона Tityus serrulatus. Рекомбинантный токсин и его 15N-меченый аналог получены в ходе прямой экспрессии синтетического гена в Escherichia coli с последующей ренатурацией из телец включения. Методом ЯМР-спектроскопии показано, что токсин структурирован в водном растворе, и его молекула содержит значительную долю β-структурных элементов. В процессе ренатурации токсина также наблюдали образование стабильного дисульфидного изомера Ts1, обладающего неупорядоченной структурой. Рекомбинантный Ts1 блокировал ток ионов Na+ через каналы NaV1.5, не влияя на процессы активации и инактивации. Эффект в отношении каналов NaV1.4 выражен сдвигом кривой зависимости активации в область более отрицательных значений мембранного потенциала.
Об авторах
З. О. Шенкарёв
Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской Академии наук; Московский физико-технический институт (государственный университет)
Автор, ответственный за переписку.
Email: zakhar-shenkarev@yandex.ru
Россия, 117997, Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10; 141701, Московская обл., г. Долгопрудный, Институтский пер., д.9
М. А. Шулепко
Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской Академии наук; Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова
Email: zakhar-shenkarev@yandex.ru
Россия, 117997, Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10; 119991, г. Москва, ул. Ленинские горы, д.1
С. Пеньёр
Лёвенский католический университет
Email: zakhar-shenkarev@yandex.ru
Бельгия, Лёвен
М. Ю. Мышкин
Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской Академии наук; Московский физико-технический институт (государственный университет)
Email: zakhar-shenkarev@yandex.ru
Россия, 117997, Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10; 141701, Московская обл., г. Долгопрудный, Институтский пер., д.9
А. А. Беркут
Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской Академии наук; Московский физико-технический институт (государственный университет)
Email: zakhar-shenkarev@yandex.ru
Россия, 117997, Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10; 141701, Московская обл., г. Долгопрудный, Институтский пер., д.9
А. А. Василевский
Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской Академии наук; Московский физико-технический институт (государственный университет)
Email: zakhar-shenkarev@yandex.ru
Россия, 117997, Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10; 141701, Московская обл., г. Долгопрудный, Институтский пер., д.9
Я. Титгат
Лёвенский католический университет
Email: zakhar-shenkarev@yandex.ru
Бельгия, Лёвен
Е. Н. Люкманова
Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской Академии наук; Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова
Email: zakhar-shenkarev@yandex.ru
Россия, 117997, Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10; 119991, г. Москва, ул. Ленинские горы, д.1
М. П. Кирпичников
Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской Академии наук; Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова
Email: zakhar-shenkarev@yandex.ru
академик РАН
Россия, 117997, Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10; 119991, г. Москва, ул. Ленинские горы, д.1Список литературы
- Catterall W.A. // J. Physiol. 2012. V. 590. P. 2577–2589.
- Stevens M., Peigneur S., Tytgat J. // Front. Pharmacol. 2011. V. 2. P. 71.
- Mӓnnikkӧ R., Shenkarev Z.O., Thor M.G., Berkut A.A., Myshkin M. Y., Paramonov A.S., Kulbatskii D.S., Kuzmin D.A., Sampedro Castaneda M., King L., Wilson E.R., Lyukmanova E.N., Kirpichnikov M.P., Schorge S., Bosmans F., Hanna M.G., Kullmann D. M., Vassilevski A. A. // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 2018. V. 115. P. 4495–4500.
- Pinheiro C.B., Marangoni S., Toyama M.H. et al. // Acta Crystallogr. D Biol. Crystallogr. 2003. V. 59. P. 405–415.
- Barhanin J., Giglio J.R., Leopold P., et al. // J. Biol. Chem. 1982. V. 257. P. 12553–12558.
- Martin-Eauclaire M.F., Bougis P.E., de Lima M.E. // Toxicon. 2018. V. 152. P. 106–120.
- Bosmans F., Martin-Eauclaire M.F., Tytgat J. // Toxicol. Appl. Pharmacol. 2007. V. 218. P. 45–51.
- Peigneur S., Cologna C.T., Cremonez C.M., et al. // Neuropharmacology. 2015. V. 95. P. 269–277.
- Bosmans F., Martin-Eauclaire M.F., Swartz K.J. // Nature 2008. V. 456. P. 202–208.
- Loret E.P., Sampieri F., Roussel A., et al. // Proteins: Struct., Funct., Bioinf. 1990. V. 8. P. 164–172.
- Dang B., Kubota T., Correa A.M., et al. // Angew. Chem. Int. Ed. 2014. V. 53. P. 8970–8974.
- Coelho V.A., Cremonez C.M., Anjolette F.A., et al. // Toxicon. 2014. V. 83. P. 15–21.
- Люкманова Е.Н., Шулепко М.А., Шенкарев З.О., Долгих Д.А., Кирпичников М.П. // Биоорг. химия. 2010. Т. 36. № 2. С. 149–158.
- Pluzhnikov K., Vassilevski A., Korolkova Y., Fisyunov A., Iegorova O., Krishtal O, Grishin E. // Toxicon. 2007. V. 50. № 7. P. 993–1004.
- Shulepko M.A., Lyukmanova E.N., Shenkarev Z.O., Dubovskii P.V., Astapova M.V., Feofanov A.V., Arseniev A.S., Utkin Y.N., Kirpichnikov M.P., Dolgikh D.A. // Protein Expr. Purif. 2017. V. 130. P. 13–20.
Дополнительные файлы
