Количественное определение 4-гексилрезорцинола в мышечной ткани цыплят-бройлеров, получавших это соединение в рационе кормления, и эффект его остаточных концентраций на микробиологические характеристики готовой продукции

Обложка

Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Доступ платный или только для подписчиков

Аннотация

Введение. Растительные соединения с антимикробной активностью (фитобиотики) формируют актуальную альтернативу традиционным кормовым антибиотикам в животноводстве и птицеводстве. Перспективных фитобиотиками являются алкилрезорцинолы – обширная группа фенольных липидов растительного происхождения, среди которых наиболее выраженную антимикробную активность демонстрирует 4-гексилрезорцинол.

Цель исследования – оценить возможность аккумуляции 4-гексилрезорцинола в мясе цыплят-бройлеров, получавших данное соединение в качестве добавки к основному рациону кормления, с оценкой влияния его остаточных концентраций на микробиологические характеристики продукции птицеводства.

Материал и методы. В работе использован химически синтезированный 4-гексилрезорцинол (CAS 136-77-6) со степенью очистки 98%. Экспериментальные группы цыплят-бройлеров линии Arbor Acres в течение 35 суток получали данное соединение в качестве добавки к основному рациону в дозах 62,5, 125 и 250 мг на 1 кг корма. Количественное присутствие 4-гексилрезорцинола в мышечной ткани цыплят-бройлеров оценено методом высокоэффективной хроматографии с трехквадрупольным масс-спектрометрическим детектированием на жидкостном хромато-масс-спектрометре LCMS-8050 (Shimadzu Corporation, Япония). Микробная обсемененность мышечной ткани после убоя и через 5 суток хранения при +4°С проанализирована по ГОСТ 10444.15-94, ГОСТ 31747-2012 и ГОСТ 31468-2012.

Результаты. Валидация метода ВЭЖХ-МС/МС для анализа количественного присутствия 4-гексилрезорцинола в мышечной ткани цыплят-бройлеров позволила установить диапазон линейности его обнаружения в интервале значений 50 1000 нг/г с отклонением не более ±15% между номинальными и определяемыми концентрациями. Анализ экспериментальных образцов от цыплят-бройлеров, выкармливаемых с добавлением 4-гексилрезорцинола, показал возможность накопления данного соединения в диапазоне от 50 до 200 нг на 1 г мышечной ткани с максимальными значениями 124,4–194,5 нг/г в группе цыплят-бройлеров, получавших его в дозе 125 мг на 1 кг корма. Аккумуляция 4-гексилрезорцинола в мышцах цыплят-бройлеров снижала присутствие санитарно-показательных мезофильных аэробных и факультативно-анаэроб-ных микроорганизмов в пост-убойной продукции, что было наиболее выражено в образцах с максимальным накоплением данного соединения.

Выводы. Полученные данные свидетельствуют о возможности аккумуляции 4-гексилрезорцинола в продукции птицеводства как следствия его кормового использования. Указанный факт согласуется с присутствием 4-гексилрезорцинола в перечне добавок, разрешенных для применения при производстве пищевой продукции (ТР ТС 029/2012), но требует дальнейшего исследования миграции данного соединения по пищевым цепям с учетом множественности вариантов его биологической активности.

Полный текст

Доступ закрыт

Об авторах

Д. Г. Дерябин

ФГБНУ «Федеральный научный центр биологических систем и агротехнологий Российской академии наук»

Автор, ответственный за переписку.
Email: dgderyabin@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0002-9578-7947

доктор медицинских наук, профессор, зав. лабораторией

 

Россия, 460000, г. Оренбург, ул. 9 Января, д. 29

Г. К. Дускаев

ФГБНУ «Федеральный научный центр биологических систем и агротехнологий Российской академии наук»

Email: gduskaev@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-9015-8367

доктор биологических наук, гл. научный сотрудник

Россия, 460000, г. Оренбург, ул. 9 Января, д. 29

Е. Н. Гончарова

ООО «МИП «Академия инноваций»

Email: goncharova.e@vetmag.ru
ORCID iD: 0000-0002-2207-3257

кандидат химических наук, зав. лабораторией

Ph.D. (Chem.), Head of Laboratory

 

Россия, 125080, Москва, ул. Талалихина, д. 33, стр. 5

Т. А. Климова

ФГБНУ «Федеральный научный центр биологических систем и агротехнологий Российской академии наук»

Email: klimovat91@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-4298-1663

научный сотрудник

 

Россия, 460000, г. Оренбург, ул. 9 Января, д. 29

К. С. Лазебник

ФГБНУ «Федеральный научный центр биологических систем и агротехнологий Российской академии наук»

Email: christinakondrashova94@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0003-4907-9656

мл. научный сотрудник

Россия, 460000, г. Оренбург, ул. 9 Января, д. 29

К. С. Инчагова

ФГБНУ «Федеральный научный центр биологических систем и агротехнологий Российской академии наук»

Email: ksenia.inchagova@mail.ru
ORCID iD: 0000-0003-1111-8293

кандидат биологических наук, научный сотрудник

Россия, 460000, г. Оренбург, ул. 9 Января, д. 29

Е. А. Букарева

ФГБНУ «Федеральный научный центр биологических систем и агротехнологий Российской академии наук»

Email: elenka_rs@mail.ru
ORCID iD: 0000-0002-1622-1284

кандидат биологических наук, и.о. зав. лабораторией

Россия, 460000, г. Оренбург, ул. 9 Января, д. 29

И. Э. Ларюшина

ФГБНУ «Федеральный научный центр биологических систем и агротехнологий Российской академии наук»

Email: inhip@mail.ru

кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник

Россия, 460000, г. Оренбург, ул. 9 Января, д. 29

Список литературы

  1. Тимофеев Н.П. Фитобиотики в мировой практике: виды растений и действующие вещества, эффективность и ограничения, перспективы (обзор). Аграрная наука Евро-Северо-Востока. 2021;22(6):804–825. [Timofeev N.P. Phytobiotics in world practice: plant species and active substances, efficiency and limitations, perspectives (review). Agricultural Science Euro-North-East. 2021;22(6):804-825. (In Russ.)]. doi: 10.30766/2072-9081.2021.22.6.804-825.
  2. Подобед Л. Фитобиотики в кормлении животных. Животноводство России. 2018;7:57–58. [Podobed L. Phytobiotics in animal feeding. Animal husbandry of Russia. 2018;7:57–58. (In Russ.)].
  3. Kozubek A., Tyman J.H. Resorcinolic Lipids, the Natural Non-isoprenoid Phenolic Amphiphiles and Their Biological Activity. Chemical Reviews. 1999;99(1):1–26. doi: 10.1021/cr970464o.
  4. Zarnowski R., Kozubek А. Alkylresorcinol Homologs in Pisum sativum L. Varieties. Zeitschrift für Naturforschung C. 1999;54(1-2):44–48. doi: 10.1515/znc-1999-1-208.
  5. Żarnowska Е.D., Żarnowski R., Kozubek A. Alkylresorcinols in Fruit Pulp and Leaves of Ginkgo biloba L. Zeitschrift für Naturforschung C. 2000;55(11-12):881–885. doi: 10.1515/znc-2000-11-1206.
  6. Knödler M., Reisenhauer K., Schieber A. et al. Quantitative determination of allergenic 5-alk(en)ylresorcinols in mango (Mangifera indica L.) peel, pulp, and fruit products by high-performance liquid chromatography. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 2009;57(9):3639–3644. doi: 10.1021/jf803934p.
  7. Deryabin D.G., Tolmacheva, A.A. Antibacterial and Anti-Quorum Sensing Molecular Composition Derived from Quercus cortex (Oak bark) Extract. Molecules. 2015;20(9):17093–17108. doi: 10.3390/molecules200917093.
  8. Nikolaev Y.A., Tutel'yan A.V., Loiko N.G. et al. The use of 4-Hexylresorcinol as antibiotic adjuvant. PLoS One. 2020;15(9):e0239147. doi: 10.1371/journal.pone.0239147.
  9. Инчагова К.С., Русакова Е.А. Исследование регуляторных эффектов малых молекул растительного происхождения в отношении бактериальных биосенсоров с различными системами «quorum sensing» LuxI/LuxR-типа. Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. 2023;26(11):40−46. [Inchagova K.S., Rusakova E.A. Investigation of the regulatory effects of small molecules of plant origin in relation to bacterial biosensors with various LUXI/LuxR-type "quorum sensing" systems. Problems of Biological, Medical and Pharmaceutical Chemistry. 2023;26(11):40-46. (In Russ.)]. doi: 10.29296/25877313-2023-11-07.
  10. Дерябин Д. Г., Камаева А. А., Толмачева А. А. и др. Влияние алкилоксибензолов на индуцируемые гомосеринлактонами проявления кворум сенсинга у бактерий. Прикладная биохимия и микробиология. 2014;50(4):391-397. [Deryabin D.G., Kamayeva A.A., Tolmacheva A.A. et al. The effects of alkylhydroxybenzenes on homoserine lactone-induced manifestations of quorum sensing in bacteria. Applied Biochemistry and Microbiology. 2014;50(4):391-397. (In Russ.)]. doi: 10.7868/S0555109914040199.
  11. Zabolotneva A.A., Gaponov A.M., Roumiantsev S.A. et al. Alkylresorcinols as New Modulators of the Metabolic Activity of the Gut Microbiota. International Journal of Molecular Sciences. 2023;24(18):14206. doi: 10.3390/ijms241814206.
  12. Iyengar R., Bohmont C.W., Mcevily A.J. 4-Hexylresorcinol and prevention of shrimp blackspot: Residual analyses. Journal of Food Composition and Analysis. 1991;4(2):148-157. doi: 10.1016/0889-1575(91)90008-t.
  13. Zavyalov O., Duskaev G., Kurilkina M. Effect of feeding bioactive compounds identified from plant extracts (4-hexylresorcinol, 7-hydroxycoumarin, and gamma-octalactone) on the productivity and quality of broiler meat. Veterinary World. 2022;15(12): 2986-2996. doi: 10.14202/vetworld.2022.2986-2996.
  14. Шестопалов А.В., Гапонов А.М., Заболотнева А.А. и др. Алкилрезорцинолы – новые потенциальные биорегуляторы в системе суперорганизма (человек-микробиота). Известия Российской академии наук. Серия биологическая. 2022;3:246-257. [Shestopalov A.V., Gaponov A.M., Zabolotneva A.A. et al. Alkylresorcinols: new potential bioregulators in the superorganism system (human–microbiota). Biology Bulletin. 2022;3:246-257. (In Russ.)]. doi: 10.31857/S1026347022030155.
  15. Технический регламент Таможенного союза ТР ТС 029/2012 «Требования безопасности пищевых добавок, ароматизаторов и технологических вспомогательных средств» (с изменениями на 18 сентября 2014 года). [Technical Regulation of the Customs Union TR TS 029/2012 “Safety requirements for food additives, flavorings and technological aids” (as amended on September 18, 2014). (In Russ.)]; https://ucsol.ru/images/docs/TR/029_2012_tr_ts.pdf.
  16. ГОСТ 10444.15-94. Продукты пищевые. Методы определения количества мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов. [GOST 10444.15-94. Food products. Methods for determining the number of mesophilic aerobic and facultative-anaerobic microorganisms. (In Russ.)]; https://internet-law.ru/gosts/gost/18812/.
  17. ГОСТ 31747-2012. Продукты пищевые. Методы выявления и определения количества бактерий группы кишечных палочек (колиформных бактерий). [GOST 31747-2012. Food products. Methods of detection and determination of the number of Escherichia coli bacteria (coliform bacteria) (In Russ.)]; https://internet-law.ru/gosts/gost/52791/.
  18. ГОСТ 31468-2012. Мясо птицы, субпродукты и полуфабрикаты из мяса птицы. Метод выявления сальмонелл. [GOST 31468-2012 Poultry meat, by-products and semi-finished products from poultry meat. Method for the detection of salmonellae (In Russ.)]; https://internet-law.ru/gosts/gost/52573.
  19. VICH topic GL49: Studies to evaluate the metabolism and residues kinetics of veterinary drugs in human food-producing animals: validation of analytical methods used in residue depletion studies; https://www.ema.europa.eu/en/documents/scientific-guideline/vich-gl49-studies-evaluate-metabolism-and-residue-kinetics-veterinary-drugs-food-producing-animals-validation-analytical-methods-used-residue-depletion-studies_en.pdf.
  20. Hao Y., Gao X., Xia W. Determination of 4-Hexylresorcinol in Shrimp Samples by Solid Phase Extraction Ultra Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry. Molecules. 2018;23(9):2173. doi: 10.3390/molecules23092173.
  21. Guandalini E., Ioppolo A., Mantovani A., Stacchini P., Giovannini C. 4-Hexylresorcinol as inhibitor of shrimp melanosis: efficacy and residues studies; evaluation of possible toxic effect in a human intestinal in vitro model (Caco-2); preliminary safety assessment. Food Additives and Contaminants. 1998;15(2):171–180. doi: 10.1080/02652039809374627.
  22. NTP Toxicology and Carcinogenesis Studies of 4-Hexylre-sorcinol (CAS No. 136-77-6) in F344/N Rats and B6C3F1 Mice (Gavage Studies). Natl Toxicol Program Tech Rep Ser. 1988 May:330:1–166; https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12732906/.
  23. Жаринов А.И., Кузнецова О.В., Жукова А.Ю., Костенко Ю.Г. К вопросу контаминации мяса птицы бактериями Serratia marcescens. Мясные технологии. 2019;4(196):56-59. [Zharinov A.I., Kuznetsova O.V., Zhukova A.Y., Kostenko Y.G. To the question of contamination of poultry meat with Serratia marcescens bacteria. Meat Technologies. 2019;4(196):56–59. (In Russ.)]. doi: 10.33465/2308-2941-2019-4-56-58.
  24. Сейтжанова М.Е. Оценка качества различных видов мясного сырья и готовой продукции. European Student Scientific Journal. 2018; 3:12–12. [Seitzhanova M.E. Quality assessment of different types of meat raw materials and finished products. European Student Scientific Journal. 2018; 3:12–12. (In Russ.)]; https://sjes.esrae.ru/en/article/view?id=433.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
2. Рис. 1. Структурная формула 4-гексилрезорцинола

3. Рис. 2. ВЭЖХ-МС/МС хроматограмма определения 4-гексилрезорцинола на уровне НПКО (50 нг/г). Сверху: по оси абсцисс – время удержания на колонке, мин; по оси ординат – интенсивность сигнала, имп. Снизу: параметры его масс-спектрометрического обнаружения

Скачать (116KB)
4. Рис. 3. Градуировочная зависимость для количественного определения 4-гексилрезорцинола в мышечной ткани цыплят-бройлеров, построенная на основе трех параллельных измерений одного аналитического цикла. По оси абсцисс [4-GR] – номинальная (внесенная) концентрация гексилрезорцинола (нг/г); по оси ординат [S] – площадь хроматографического пика (S) при проведении ВЭЖХ-МС/МС определения

Скачать (40KB)
5. Рис. 4. Соответствия между присутствием остаточных количеств 4-гексилрезорцинола (по оси абсцисс, нг/г) и микробной обсемененностью мышечной ткани цыплят-бройлеров, характеризуемой показателем КМАФАнМ (по оси ординат, КОЕ/г) непосредственно после забоя (белые ромбы) и через 5 суток хранения при +4 °С (черные ромбы). Нормативное значение бактериальной обсемененности по ГОСТ 10444.15-94 [16] показано горизонтальной линией

Скачать (42KB)

© ИД "Русский врач", 2024