Том 23, № 3 (2020)

Фолликулостимулирующий гормон - это один из важнейших гормонов репродуктивной системы человека, который широко используется во вспомогательных репродуктивных технологиях. Выбор штамма-продуцента рекомбинантного фолликулостимулирующего гормона человека (рчФСГ) одна из ключевых задач биотехнологического процесса. Цель работы. Целью работы являлось получение стабильной клеточной линии, продуцирующей рчФСГ, с использованием двух различных родительских клеточных линий СНО. Материалы и методы. Для получения стабильных клонов, продуцирующих рчФСГ, были использованы две клеточные линии -СНО-К1 и СНО-DXB 11, адаптированные к культивированию в бессывороточной среде. Подсчет клеток и оценку клеточной жизнеспособности осуществляли с помощью окраски трипановым синим. Концентрацию рчфСГ определяли методом иммуноферментного анализа, подлинность белка определяли методом вестерн-блотинга. Результаты. Четыре наиболее продуктивных клона, полученные с использованием клеточной линии CHO-DXB 11, были отобраны после трех этапов скрининга - отбор пула, селекция клонов и амплификация с использованием метотрексата. Наибольшей продуктивностью в течение 6 дней культивирования обладал клон CHO-FSH 11/24 - 7,1±0,6 мг/л. Три клона были выбраны после траснфекции и отбора клонов с использованием клеточной линии CHO-K1. Клон CHO-FSH 91 обладал наибольшей продуктивностью после 6 дней культивирования - 10,8±0,9 мг/л. Молекулярные массы препаратов рчФСГ, полученных от разных клеточных линий-продуцентов, совпадали с молекулярной массой коммерческого препарата «Гонал Ф» (Merck Serono). Выводы. Продуцент, полученный с помощью клеточной линии СНО-К1, будет использован для дальнейших экспериментов.

Цель исследования - разработка схемы реакции нарастания титра фага (РНФ) для индикации бактерий Xanthomonas cam-pestris pv. campestris. Материал и методы. Разработку схемы РНФ проводили с использованием бактериофага Кл34-УлГАУ и индикаторной культуры бактерий X. campestris pv. campestris Хс2 на основе методик, апробированных сотрудниками кафедры микробиологии, вирусологии, эпизоотологии и ветеринарно-санитарной экспертизы Ульяновского государственного аграрного университета имени П.А. Столыпина. Результаты. Представлена разработанная схема РНФ. Подобраны оптимальные параметры постановки РНФ: рабочее разведение фагового биопрепарата Кл34-УлГАУ составило 104 БОЕ/мл; разведение индикаторной культуры бактерий - 107 м.к./мл: время культивирования посевов с индикаторной культурой и фаговым биопрепаратом - 18 ч. Выводы. Показано, что идентификация бактерий X. campestris pv. campestris на основе разработанной схемы реакции нарастания титра фага составляет 43 ч.

Проблема мужского бесплодия особенно затрагивает ВИЧ-инфицированных мужчин, поскольку подвижность сперматозоидов снижается при высокоактивной антиретровирусной терапии. Цель исследования - охарактеризовать биохимические особенности сперматозоидов у ВИЧ-инфицированных мужчин для восстановления их функциональной активности. Материал и методы. Исследовали патологические процессы в мужской репродуктивной системе ВИЧ-инфицированных пациентов, в возрасте от 25 до 45 лет, с неопределяемой вирусной нагрузкой (40-50 копий/мл). Исследования проводили с использованием фазово-контрастного микроскопа Nikon Eclipse E200. Определяли биохимические показатели спермальной плазмы после стандартной подготовки проб на автоматическом биохимическом анализаторе «Cobas integra 400+» фирмы «Roche» с использованием реактивов и контрольных материалов «Roche». Результаты. Выявлены нарушения в белковом составе, углеводном обмене. Вследствие метаболических изменений в спермо-плазме нарушается фертильность эякулята. Показатели общего белка и альбумина в спермальной плазме ВИЧ-инфицированных мужчин выше, чем у здоровой группы мужчин и субфертильных пациентов. Значительно выше активность аспа ртата мин отр ансферазы у ВИЧ-инфицированных мужчин. Также у этих пациентов в спермальной плазме отмечаются высокие значения гамма-глутамилтрансферазы. У ВИЧ-инфицированных мужчин, как в спермоплазме, так и в плазме крови, менее активна креатинфосфокиназа - фермент, обеспечивающий альтернативный механизм энергообеспечения. Выводы. Показано, что использование спермальной плазмы здорового донора способствует восстановлению активности сперматозоидов у ВИЧ-инфицированных мужчин до 12%.

Актуальность. Плоды боярышника полумягкого (мягковатого) (Crataegus submollis Sarg., сем. Розоцветные - Rosaceae) являются популярным пищевым продуктом, однако в медицинской практике в настоящее время не используются. Ранее была показана возможность применения свежих плодов боярышника полумягкого в качестве источника антидепрессантных и диуретических лекарственных препаратов. Одним из новых лекарственных препаратов может являться сок на основе свежих плодов боярышника полумягкого. В свежих плодах боярышника полумягкого преобладают восстановленные формы флавоноидов - процианидины. Проведенный ранее анализ сока из свежих плодов боярышника полумягкого с использованием спектрофотометрии показал, что максимум поглощения в УФ-спектре составляет 282 нм, что совпадает с максимумом поглощения раствора катехина, являющегося биогенетическим предшественником процианидинов. Цель исследования - разработка методики количественного определения суммы процианидинов в свежих плодах боярышника полумягкого. Материал и методы. Объектом исследования служили свежие плоды боярышника полумягкого, заготовленные в сентябре 2019 г. на территории г. Самары и Самарской области. Методом анализа являлась прямая спектрофотометрия при длине волны 282 нм в пересчете на катехин. Результаты. Разработана методика количественного определения суммы процианидинов (в пересчете на катехин) в свежих плодах боярышника полумягкого методом прямой спектрофотометрии при аналитической длине волны 282 нм. Определено, что содержание суммы процианидинов варьирует в свежих плодах боярышника полумягкого от 0,52±0,03% до 0,97±0,06% (в пересчете на катехин). Ошибка единичного определения с доверительной вероятностью 95% составляет ± 5,81%. Наиболее высокое содержание процианидинов можно отметить в чашелистиках и кожице свежих плодов боярышника полумягкого. Выводы. Свежие плоды боярышника полумягкого являются перспективным лекарственным растительным сырьем. В результате проведенного исследования разработана методика количественного определения суммы процианидинов в свежих плодах боярышника полумягкого (мягковатого) (Crataegus submollis Sarg.) методом прямой спектрофотометрии при аналитической длине волны 282 нм в пересчете на катехин.

Лапчатка белая (Potentilla alba L.) и лапчатка крупноцветковая (Potentilla megalantha L.) являются ценными лекарственными растениями, в клетках которых синтезируются разные классы фенольных соединений, в частности дубильные вещества, обладающие высокой биологической активностью. Поиск альтернативных путей размножения лапчатки в условиях in vitro и сохранения их биоразнообразия является актуальной задачей. Цель работы - изучение особенностей размножения лапчатки белой (P. alba L.) и лапчатки крупноцветковой (P. megalantha L.) в условиях in vitro. Для достижения поставленной цели применялись различные способы предобработки семян: механическая обработка, термическая обработка, замачивание, стратификация. Установлено, что при введении в культуру in vitro P. alba L. и P. megalantha L. необходимо применять стратификацию семян и проводить их прорастание на безгормональной среде. Добавление в состав питательной среды БАП в концентрации 1 мг/л приводит к наибольшему увеличению биомассы P. megalantha L. и P. alba L. в результате образования максимального количества адвентивных микропобегов.