Открытый доступ
Доступ предоставлен
Доступ платный или только для подписчиков
Том 28, № 11 (2025)
Фармацевтическая химия
Дозированные сборы из лекарственного растительного сырья (обзор)
Аннотация
Тема применения растений в терапии различных заболеваний не нова. Человек с давних времён накапливал знания о них и умения использования для оздоровления. Причем применялись как монорастения, так и их комплексы в виде растительных сборов. Последним порой отдавалось предпочтение, так как считается, что многокомпонентное воздействие извлечений из растений на организм более эффективно. Однако, несмотря на это, среди лекарственных растительных препаратов растительные сборы в настоящее время составляют около 20%, что нельзя считать оправданным. Особенно это относится к дозированным сборам, обладающим целым рядом преимуществ по сравнению со сборами, выпускаемых в пачках (россыпью).
В данной статье рассматривается современное состояние разработки, исследования и выпуска дозированных сборов из лекарственного растительного сырья.
3-9
РНК-терапия в России: от советских разработок до современных препаратов
Аннотация
Введение. Развитие РНК-терапии является одним из наиболее динамичных направлений современной биомедицины. В СССР были заложены фундаментальные основы использования рибонуклеиновых кислот в медицине, которые послужили базой для современных отечественных разработок.
Цель исследования – анализ эволюции РНК-терапии в СССР и России от первых фундаментальных исследований до современных препаратов, оценка вклада отечественных ученых и перспективы развития данного направления.
Материал и методы. Проведен аналитический обзор научных публикаций, патентов, диссертационных работ советских и российских ученых в области применения РНК в медицине за период 1950–2025 гг. Проанализированы данные о зарегистрированных препаратах на основе РНК, включая Полудан, Ридостин, Амфиэвовир. Изучены зарубежные источники о механизмах действия РНК-препаратов через TLR3/7/8 рецепторы и индукцию интерферонов.
Результаты. Установлено, что советская школа (Р.И. Салганик, С.Н. Загребельный, Ю.С. Аликин) внесла значительный вклад в разработку концепции ферментной противовирусной терапии и иммуномодуляторов на основе полирибонуклеотидов. Созданы и внедрены в практику препараты Полудан, Ридостин, натрия нуклеинат. Современные разработки (Амфиэвовир) демонстрируют противовирусную активность in vitro, но требуют полноценных клинических испытаний.
Заключение. Россия обладает богатым историческим наследием и научным потенциалом в области РНК-терапии. Для широкого внедрения отечественных разработок необходимо проведение рандомизированных контролируемых исследований, совершенствование регуляторной базы и интеграция в международное научное пространство.
10-21
Amorpha fruticosa L.: химический состав, фармакологическая активность, перспективы применения
Аннотация
Настоящий обзор посвящен изучению химического состава и фармакологической активности растения – аморфы кустарниковой (Amorpha fruticosa L.), произрастающей на территории Астраханской области. По данным научной литературы выявлено, что аморфа кустарниковая содержит уникальный комплекс биологически активных соединений, а различные извлечения на ее основе проявляют антиоксидантную, противодиабетическую, цитотоксическую, антимикробную, противовоспалительную, противоопухолевую активность. Анализ результатов современных исследований свидетельствует об уникальности химических, физиологических и терапевтических свойств данного растения. Это создаёт реальные предпосылки к научно обоснованному применению аморфы кустарниковой в качестве средства профилактики и лечения метаболических, онкологических и многих других заболеваний, в патогенетических механизмах развития которых лежат изменения антиоксидантной системы, развитие окислительного стресса, воспалительные процессы.
22-30
Изучение полисахаридного комплекса травы репешка обыкновенного
Аннотация
Введение. В настоящее время перспективными объектами для изучения являются лекарственные растения, которые широко применяются в народной медицине. Однако малоизученный химический состав, биологическая активность, отсутствие нормативной документации ограничивают возможность их внедрения в научную медицину с целью расширения ассортимента лекарственных препаратов растительного происхождения. Интересными объектами изучения являются растения рода Agrimonia L. Трава репешка обыкновенного применяется как антибактериальное, противовоспалительное, вяжущее, желчегонное, гепатопротекторное, тонизирующее, гемостатическое средство. Для обоснования взаимосвязи «фармакологическая активность – химический состав» актуальным является изучение полисахаридного комплекса репешка обыкновенного, который может оказывать положительное влияние на различные процессы, происходящие в организме человека.
Цель работы – изучение состава полисахаридного комплекса репешка обыкновенного.
Материал и методы. Объектом исследования являлась воздушно-сухая измельченная трава репешка обыкновенного, заготовленная в 2023–2025 гг. в Республике Башкортостан в период массового цветения. Для обнаружения полисахаридов в лекарственном растительном сырье проводили общепринятые качественные реакции. Полисахаридный комплекс из травы репешка получали путем фракционного разделения на водорастворимые полисахариды, пектиновые вещества, гемицеллюлозу А и гемицеллюлозу Б по методике Кочеткова. Моносахаридный состав полисахаридных комплексов изучали после кислотного гидролиза и последующего хроматографирования на бумаге в различных системах методом нисходящей и восходящей хроматографии в сравнении со стандартными образцами моносахаров, в качестве детектора использовали анилинфталат.
Результаты. Выделены и фракционно разделены полисахариды на водорастворимые полисахариды (ВРПС), пектиновые вещества (ПВ) и гемицеллюлозы А и Б (ГЦ А и ГЦБ). Гравиметрическим методом количественно определено их содержание. Установлено, что в растении преобладают фракции водорастворимых полисахаридов (10,27±0,41%) и гемицеллюлозы А (19,26±0,84%), в меньшем количестве отмечено содержание пектиновых веществ (8,95±0,37%) и гемицеллюлозы Б (6,58±0,31%). Проведена оценка внешних признаков и физико-химических характеристик выделенных комплексов. С помощью хроматографического анализа изучен состав продуктов кислотного гидролиза полисахаридов репешка обыкновенного, в составе ВРПС обнаружены 6 сахаров: глюкоза, фруктоза, галактоза, арабиноза, рамноза, ксилоза. В гидролизате пектинового комплекса выявлены 5 моносахаров: глюкоза, галактоза, арабиноза, ксилоза, рамноза и галактуроновая кислота. В составе гемицеллюлоз А и Б обнаружили галактозу, арабинозу, глюкозу, ксилозу, рамнозу.
Выводы. Проведенные исследования позволили выделить и фракционно разделить полисахариды репешка обыкновенного на ВРПС, ПВ, ГЦ А и ГЦБ. Установлен моносахаридный состав полисахаридных комплексов, который включает в себя нейтральные сахара – глюкозу, фруктозу, галактозу, арабинозу, рамнозу, ксилозу и кислые – галактуроновую кислоту. Высокое содержание полисахаридов в траве репешка обыкновенного указывает на перспективность их дальнейшего использования.
31-36
Фармакогностическая характеристика Artemisia messerschmidtiana Bess
Аннотация
Введение. Представители рода Artemisia L. широко распространены и применяются в официнальной и традиционной медицине для лечения воспалительных, инфекционных и других заболеваний, вызванных грибками, бактериями и вирусами. Однако химический состав Artemisia messerschmidtiana Bess., произрастающей на территории Бурятии, остаётся изученным недостаточно.
Цель исследования – фармакогностический анализ надземной части A. messerschmidtiana.
Материал и методы. Объект исследования – надземная часть A. messerschmidtiana, собранная в фазу цветения, в окрестностях села Удинск Хоринского района Республики Бурятия (август, 2023). Анатомо-диагностические признаки и основные показатели доброкачественности сырья определены в соответствии с методиками ГФ XV издания. Эфирное масло получено методом пародистилляции. Липидные фракции выделены с помощью модифицированного метода Блайя—Дайера с последующим кислотным метанолизом. Химический состав эфирного масла и липидной фракции определяли методом газо-хромато-масс-спектрометрии.
Результаты. Определены основные анатомо-диагностические признаки сырья: эпидермис листа состоит из изодиаметрических клеток со слабоизвилистыми стенками. Устьица аномоцитного типа, расположены преимущественно на нижней стороне листа. Характерны Т-образные волоски и овальные эфирномасличные железки ярусного типа. Установлены показатели доброкачественности (влажность (7,6%), зола общая (7,9%), зола нерастворимая в 10%-ной хлористоводородной кислоте (0,6%), экстрактивные вещества, извлекаемые спиртом этиловым 70-ным% (42,8%) и примеси: органическая (0,8%), побуревшие и почерневшие части (2,0%). Количественное содержание эфирных масел составило 0,3% в пересчете на воздушно-сухое сырье (в.с.с.), основные компоненты: 1,8 цинеол (до 11,6%), камфора (до 19,6%), борнеол (4,0%), α-терпинен (6,1%), изотерпинолен (3,4%), фитол (7,0%), дегидросесквицинеол (4,8%), кариофиллен оксид (до 2,3%). Выход липидной фракции составил 4,5% в пересчете на в.с.с., обнаружено 10 высших жирных кислот, основные – пальмитиновая (42,0%), линолевая (16,6%) и линоленовая (14,9%) кислоты.
Выводы. Определены основные анатомо-диагностические признаки и показатели доброкачественности A. messerschmidtiana травы. Установлено, что состав эфирного масла стабилен, доминируют монотерпеноиды – 1,8-цинеол, камфора и борнеол; сесквитерпеноид – кариофиллен оксид. В липидной фракции преобладают пальмитиновая, линолевая и линоленовая кислоты. Результаты проведенных исследований свидетельствуют о целесообразности дальнейшего изучения A. messerschmidtiana в качестве перспективного лекарственного растительного сырья и создания на его основе новых лекарственных средств.
37-45
Эффект ацетонового экстракта листьев Agrimonia Pilosa Ledeb. на амилазу и липазу
Аннотация
Введение. В последние годы значительный интерес вызывают пищеварительные ферменты для таргетированного воздействия на метаболические пути. Лекарственные растения богаты различными биологически активными соединениями и в сравнении с синтетическими ингибиторами обладают меньшей токсичностью в качестве ингибирующих лигандов желудочно-кишечных ферментов. В пищевой практике возможно расширение спектра применения экстрактов листьев Agrimonia pilosa Ledeb.
Цель исследования – определение содержания фенольных соединений и флавоноидов в ацетоновом экстракте листьев A. pilosa и оценка его влияния на ферментативную активность панкреатических ферментов амилазы и липазы.
Материал и методы. Для опреледения активности панкреатических ферментов использовались in vitro методы с использованием искуственных субтратов, синтезированных для специфического взаимодействия с липазой и амилазой.
Результаты. Обогащенный полифенольными соединениями ацетоновый экстракт листьев A. pilosa ингибировал активность пищеварительных ферментов в моделях in vitro. При этом ингибирование амилазы оказалось значительнее, чем липазы.
Выводы. Эффект A. pilosa на липазу ранее уже был предметом изучения, однако, по мнению авторов, исследования влияния ацетонового экстракта листьев A. pilosa на амилазу не проводились, что придает новизну полученным данным. Полученные результаты открывают перспективу для дальнейшего проведения исследований в этом направлении.
46-49
Биологическая химия
Координационные соединения платины: синтез и применение в терапии онкологических заболеваний
Аннотация
Представлен обзор противоопухолевых средств на основе платины. Известно, что препараты на основе координационных соединений двухвалентной платины Pt(II) и четырехвалентной платины Pt(IV) широко используются в методе химиотерапевтического лечения злокачественных новообразований. Рассмотрены вопросы разработки и механизма действия цисплатина и его производных, одобренных для клинического использования. С целью преодоления недостатков препаратов Pt(II) предложены пролекарства на основе Pt(IV). Рассмотрены подходы к модификации препаратов Pt(II) и Pt(IV) для повышения селективности их действия на опухолевые клетки с целью дальнейшего применения в фотодинамической терапии и фотоактивируемой химиотерапии. Фотофизические свойства комплексов платины с фотосенсибилизаторами указывают на возможность двойного действия препаратов на раковые клетки. На основании анализа имеющихся литературных данных сделан вывод о том, что, несмотря на достигнутые результаты, необходима дальнейшая разработка подходов к снижению токсичности и повышению селективности при сохранении терапевтической эффективности препаратов и, наконец, расширение спектра их действия. В качестве перспективных подходов рассматриваются комбинированные методы терапии онкологических заболеваний с использованием препаратов платины, позволяющие приводить к синергетическому эффекту.
50-58
Медицинская химия
Клиническое значение метилирования генов днРНК GAS5, ZEB1-AS1 в опухоли больных раком молочной железы
Аннотация
Введение. Длинные некодирующие РНК (днРНК) – транскрипты, роль которых в канцерогенезе изучена недостаточно. Экспрессия днРНК определяет биологические свойства клетки, включая инвазивный потенциал и способность к миграции. Статус метилирования в свою очередь влияет на уровень экспрессии днРНК и может быть маркером прогноза клинического течения опухоли.
Цель работы – анализ частоты метилирования генов днРНК GAS5, ZEB1-AS1 при раке молочной железы (РМЖ) и оценка ее клинической значимости.
Материал и методы. Обследовали 140 больных РМЖ, преимущественно с Т1 (39%) и Т2 (56%) стадиями. Статус N0 отмечен у 54% больных, статус N1 – у 37,9%. По гистологическому строению у большинства (77%) пациенток диагностирован инвазивный протоковый рак, у 63% – степени злокачественности G2. По молекулярной классификации люминальный тип опухоли выявлен у 113 (80%) пациенток, нелюминальный – у 27 (20%). В парных образцах опухоли и гистологически неизмененной ткани молочной железы методом метил-специфичной ПЦР изучено метилирование CpG-островков в промоторных областях генов днРНК GAS5, ZEB1-AS1.
Результаты. Частота метилирования генов GAS5, ZEB1-AS1 в опухоли выше (19/140 (13,57%) и 11/140 (7,86%) соответственно), чем в гистологически неизмененной ткани молочной железы (0/140 (0%)). Частота метилирования генов GAS5 и ZEB1-AS1 коррелировала с возрастом (R=0,43, р=0,00002 и R=0,26, р=0,014 соответственно). Установлена корреляция частоты метилирования гена GAS5 с индексом T (R=0,21, р<0,05), статусом N (R=0,31, р<0,05), стадией (R=0,33, р=0,001). При метилировании гена GAS5 наблюдали снижение 5-летней общей выживаемости и 10-летней выживаемости без прогрессирования при РМЖ.
Выводы. При РМЖ частота метилирования генов днРНК GAS5, ZEB1-AS1 в опухоли превышает таковую в неизмененной ткани молочной железы. Статус метилирования гена GAS5 связан со стадией, размером опухоли, регионарным метастазированием, выживаемостью без прогрессирования.
59-67
Взаимосвязь характеристик метаболизма селена и селенопротеинов с интенсивностью повреждения хряща у пациентов с ревматоидным, псориатическим и подагрическим артритом
Аннотация
Цель исследования – оценка уровня селена в индикаторных биосубстратах, сывороточной концентрации селенопротеина Р (SELENOP) и активности глутатионпероксидазы (GPX) в крови пациентов с ревматоидным артритом (РА), псориатическим артритом (ПА) и подагрическим артритом, а также изучение их взаимосвязи с концентрацией олигомерного матриксного белка хряща (COMP), являющегося маркером повреждения хрящевой ткани.
Материал и методы. Проведено обследование пациентов с РА (n = 101), ПА (n = 105) и подагрой (n = 105), а также здоровых лиц (контроль, n = 131). Определение содержания SELENOP и COMP осуществляли методом иммуноферментного анализа. Оценку активности GPX в крови проводили спектрофотометрически. Уровень селена в сыворотке крови, моче и волосах выявляли методом масс-спектрометрии с индуктивно-связанной плазмой.
Результаты. Установлено, что концентрация COMP у пациентов с воспалительными артропатиями превышала контрольные значения более чем в 9 раз. Уровень SELENOP у пациентов с РА, ПА и подагрой был достоверно ниже контрольных значений в 4,9, 3,9 и 2,7 раза соответственно. Концентрация общего селена в сыворотке крови пациентов с РА и ПА была ниже таковой в группе здоровых обследуемых на 11 и 10% соответственно. Различия в содержании селена в моче и волосах оказались менее выражены. Регрессионный анализ продемонстрировал, что концентрация SELENOP в сыворотке крови и уровень селена в моче являлись независимыми отрицательными предикторами повышения уровня СОМР у обследуемых даже после введения поправки на наличие артритов.
Выводы. Результаты проведенного исследования показали, что пациенты с воспалительными артропатиями, в первую очередь РА и ПА, характеризуются снижением уровня селена и селенопротеина P в сыворотке, причем концентрация селенопротеина Р характеризуется выраженной обратной взаимосвязью с уровнем СОМР, что свидетельствует о модулирующей роли селена в повреждении хрящевой ткани.
68-76
Метаболическая трансформация ротовой жидкости при COVID-19: роль провоспалительных цитокинов
Аннотация
Введение. В условиях продолжающейся пандемии COVID-19 изучение всех аспектов воздействия SARS-CoV-2 на организм человека остаётся приоритетной задачей. В данной статье рассматриваются изменения в ротовой жидкости пациентов с COVID-19, уделется особое внимание взаимосвязи между провоспалительными цитокинами и метаболическими изменениями.
Цель исследования – изучение биохимического состава ротовой жидкости больных COVID-19 и выявление взаимосвязи провоспалительных цитокинов c возможными метаболическими изменениями.
Материал и методы. Исследование проводилось на базе Самарского государственного медицинского университета. В качестве материала для исследования использовали ротовую жидкость 157 больных COVID-19 (опытная группа) и 89 здоровых лиц (контрольная группа). В ротовой жидкости определяли содержание общего белка, альбумина, С-реактивного белка, метаболитов (мочевина, мочевая кислота, глюкоза, лактат), электролитов, цитокинов (интерлейкин-6, интерлейкин-8), активность ферментов (аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы, креатинфосфокиназы, гамма-глутамилтранспептидазы, щелочной фосфатазы, лактатдегидрогеназы). Статистическую обработку полученных данных проводили с использованием программы StatTech v. 4.8.7 (ООО «Статтех», Россия).
Результаты. В исследовании оценивались метаболические и иммунологические изменения в ротовой жидкости пациентов с COVID-19. Выявлено значительное увеличение содержания общего белка, натрия, хлора, кальция, магния, железа, а также интерлейкинов 6 и 8, С-реактивного белка, активности креатинфосфокиназы, гамма-глутамилтранспептидазы, лактатдегидрогеназы. Установлена обратная корреляция между уровнем интерлейкина-6 и активностью аланинаминотрансферазы, аспартатаминотрансферазы, креатинфосфокиназы, концентрацией мочевины и магния, что может указывать на альтернативные механизмы патогенеза COVID-19 в ротовой полости. Обнаружена прямая корреляция между С-реактивным белком и мочевой кислотой, вероятно, связанная с окислительным стрессом. Интерлейкин-8 не показал значимых взаимосвязей с метаболическим профилем.
Выводы. Результаты исследования подчеркивают наличие взаимосвязи между иммунным ответом, метаболическим статусом и локальными процессами, протекающими в ротовой полости. Выявленные закономерности определяют необходимость проведения дальнейших углубленных исследований для детального изучения молекулярных механизмов описанных взаимосвязей. Полученные знания могут способствовать поиску потенциальных биомаркеров для оценки тяжести заболевания, прогнозирования его исхода и мониторинга эффективности проводимой терапии, а также для разработки новых терапевтических подходов, направленных на модуляцию иммунных и метаболических нарушений, ассоциированных с COVID-19.
77-85
Вопросы экспериментальной биологии и медицины
Церебропротекторный эффект субстанции софорикозида при ишемии головного мозга у крыс и оценка ее антиоксидантной активности in vitro
Аннотация
Введение. Основным принципом коррекции ишемических состояний головного мозга является обеспечение антиоксидантной защиты нейронных структур путем применения антиоксидантов в комплексной патофизиологической терапии. При исследовании и разработке таких средств в последнее время большое внимание уделяют лекарственным растениям как источникам безопасных антиоксидантных агентов преимущественно из класса флавоноидов.
Цель работы – определение церебропротекторной активности субстанции софорикозида (ССФ), полученной из плодов софоры японской, для оценки перспективы её использования при ишемических нарушениях головного мозга.
Материал и методы. Исследования проводили на половозрелых крысах-самцах Вистар, которые были разделены на четыре группы. Первая группа (контроль) включала крыс с ишемией головного мозга, получавших воду очищенную; 2, 3 и 4-ю группы составляли животные, получавшие ССФ per os однократно в течение 7 дней до эксперимента в дозах 20, 40 и 80 мг/кг соответственно. Модель ишемии головного мозга воспроизводили методом окклюзии обеих общих сонных артерий. Церебропротекторную активность ССФ оценивали по стандартной шкале неврологического дефицита. Идентификацию соединений в составе ССФ проводили методом ВЭЖХ-УФ-МС.
Результаты. У крыс контрольной группы неврологический дефицит составил 9,2 балла, а выживаемость – 20%. При превентивном курсовом введении крысам 2, 3 и 4-й групп исследуемой субстанции в дозах 20, 40 и 80 мг/кг показатели неврологического дефицита были меньше по сравнению с контролем на 13–22%, а выживаемость составила 50, 50 и 62,5% соответственно. В тестах in vitro ССФ ингибировала ДФПГ●– и ОН●– радикалы, показатели 50%-ного ингибирования составили соответственно 1,15±0,25 и 301,1±15,0 мкг/мл. Субстанция софорикозида в концентрациях 0,1–100 мкг/мл проявляла мембраностабилизирующую активность на модели перекисного/осмотического гемолиза: показатели составили 3–7%, против 100% гемолиза в контроле. Содержание основного вещества в исследуемой субстанции составило 90,2%. Методом ВЭЖХ-УФ-МС в составе ССФ идентифицированы примеси других флавоноидов: кемпферол-рамноглюкозида, кемпферол-глюкорамноглюкозида, кемпферол-диглюкозида, рутина, генистина, генистеин-глюкорамнозида, генистеина.
Выводы. Установлено церебропротекторное действие ССФ. В основе механизма действия исследуемой субстанции, предположительно, лежит антиоксидантная и антирадикальная активность софорикозида, как основного её компонента, а также сопутствующих флавоноидов.
86-93
Влияние физической нагрузки различной интенсивности на некоторые биохимические показатели в ткани внутренних органов экспериментальных животных
Аннотация
Введение. Направленность и выраженность адаптивных и дезадаптивных реакций во многом определяет состояние газообменной, синтетической и выделительной функций организма. Изучение биохимических показателей непосредственно в органах, отвечающих за указанные функции, расширяет представления о механизмах развития и срыва адаптации при воздействии физических нагрузок, обосновывает терапевтические подходы к состояниям, связанным с развитием физического перенапряжения.
Цель работы – изучение показателей перекисного окисления липидов, антиоксидантой защиты и обмена холестерина в ткани внутренних органов экспериментальных животных при воздействии умеренной и максимальной физической нагрузки.
Материал и методы. Проведено параллельное исследование ключевых показателей, характеризующих состояние процессов перекисного окисления липидов, антиоксидантной защиты и обмена холестерина в ткани легких, печени и почек 24 белых крыс-самцов. Животные были разделены на 3 группы по 8 особей: контроль, 1-я – умеренная плавательная нагрузка (20 мин), 2-я – максимальная плавательная нагрузка (90 мин).
Результаты. Установлены закономерности изменений метаболизма в ткани легких, печени и почек в зависимости от интенсивности мышечной работы в виде компенсированного окислительного стресса и наличия незначительной тенденции к снижению содержания холестерина при умеренной физической нагрузке и декомпенсированного окислительного стресса на фоне достоверного увеличения содержания холестерина при максимальной нагрузке. В легочной ткани явления окислительного стресса выражены в наибольшей степени (диеновые конъюгаты относительно контроля выше в 2,9 раза, ТБК активные продукты – в 3,1 раза; величина общей антиоксидантной активности ниже на 25,5%; p=0,008, антирадикальной активности – на 22,6%; p<0,001). Увеличение содержания холестерина при воздействии максимальной плавательной нагрузки в наибольшей степени выражено в ткани почек (выше на 50,9%; p<0,001).
Выводы. Физическое перенапряжение сопровождается развитием декомпенсированного окислительного стресса и явлениями атерогенеза, что подтверждается достоверными изменениями показателей, характеризующих состояние оксидантного баланса на фоне увеличения содержания холестерина. Выполнение умеренной физической нагрузки характеризуется наличием слабовыраженного компенсированного окислительного стресса и наличием тенденции к благоприятным изменениям состояния липидного обмена. Результаты исследования обосновывают применение препаратов антиоксидантной и гиполипидемической направленности при состояниях, связанных с физическим перенапряжением.
94-100
Влияние цитоскелета на активность и свойства ацетилхолинэстеразы эритроцитов крыс
Аннотация
Введение. Ацетилхолинэстераза – ключевой фермент холинергической системы, который катализирует гидролиз ацетилхолина до холина и ацетата. Фермент обнаруживается в тканях мозга и эритроцитах млекопитающих. Изучение его активности в мембранных препаратах эритроцитов актуально для диагностики влияния фосфорорганических соединений и при создании методов коррекции нейродегенеративных заболеваний. Цитоскелет эритроцитов, основанный на комплексе спектрина и актина, играет важную роль в поддержании механических свойств клетки. Влияние компонентов цитоскелета на ферментативную активность ацетилхолинэстеразы позволяет глубже понять регуляцию этого фермента.
Цель исследования – изучение влияния цитоскелета на активность и кинетические параметры ацетилхолинэстеразы эритроцитов крыс.
Материал и методы. В эксперименте использовали крыс Wistar массой 200–230 г, содержавшихся на стандартной диете. Из полученных эритроцитов после гипоосмотического гемолиза готовили тени (мембранные препараты) и бесспектриновые везикулы, удаляя часть цитоскелетных белков. Активность ацетилхолинэстеразы определяли по методу Elman et. al., (1961) в пересчете на микромоли гидролизованного ацетилтиохолина. Оценку кинетических параметров (Km и Vmax) проводили по методу Лайнувивера–Берка.
Результаты. Активность фермента в бесспектриновых везикулах снижалась примерно на 30%, однако последующая обработка детергентом Тритон X-100 приводила к восстановлению активности до уровней, сопоставимых с тенями эритроцитов. Анализ показал, что отсутствие цитоскелета не вносило изменений в значения Km и Vmax, что подтверждает стабильность каталитических свойств фермента. Уменьшение белкового состава в везикулах подтверждено методом Лоури.
Выводы. Функциональная активность ацетилхолинэстеразы сохраняется при частичном удалении цитоскелета. Обработка детергентом выявляет латентную часть активности фермента, что связано с нарушением ориентации мембраны при везикуляции. Полученные результаты расширяют возможности использования мембранных препаратов эритроцитов в моделировании работы холинэстераз при различных физиологических и патологических состояниях.
101-106