Открытый доступ
Доступ предоставлен
Доступ платный или только для подписчиков
Том 27, № 1 (2024)
Биологическая химия
Биологические особенности клеточной культуры Hedysarum alpinum L. при выращивании in vitro
Аннотация
Цель исследования – получение растущей в условиях глубинного культивирования клеточной культуры копеечника альпийского как продуцента ксантона мангиферина и изучение ее физиологических характеристик.
Материал и методы. Объектом исследования служила клеточная культура копеечника альпийского, полученная из семядоли проростка, штамм Hedysarum alpinum (С) 2016 коллекции ФГБНУ ВИЛАР, и нативное растение, выращенное на фармакопейном участке Ботанического сада ФГБНУ ВИЛАР, урожая 2013 года.
Результаты. Установлено, что регуляторы роста Кинетин и 2.4Д стимулируют ростовые процессы клеточной культуры Hedysarum alpinum (С) 2016 в условиях глубинного культивирования. Продолжительность роста составляет 20–23 суток. Максимальное нарастание соответствует 16 г/л на 20-е сутки роста. Максимальное потребление клеточной культурой кислорода составляет 30·10-4 моль/л·ч на 16-е сутки роста, когда клетки находятся в фазе регулярного роста.
Выводы. В результате проведенных работ получен стабильно растущий на поверхности агаризованной питательной среды клеточный штамм копеечника альпийского, имеющий потенцию к синтезу мангиферина; проведена работа по изучению его физиологических характеристик.
62-68
Вопросы экспериментальной биологии и медицины
Гиполипидемическая активность фитокомплекса травы фацелии пижмолистной ( Phacelia tanacetifolia benth.)
Аннотация
Введение. Использование фенольных соединений в качестве агентов предупреждения риска развития различных сердечно-сосудистых заболеваний, а также перспектива создания на их основе новых современных высокоэффективных лекарственных препаратов представляет актуальный практический интерес.
Цель исследования – выявление гиполипидемической активности фитокомплекса травы фацелии пижмолистной (Phacelia tanacetifolia Benth.) и возможности его применения в составе фитопрепаратов для лечения заболеваний сердечно-сосудистой системы.
Материал и методы. Объектом исследования являлась трава фацелии пижмолистной, выращенная в Нефтекумском районе. Трава собрана в период цветения, высушена воздушно-теневым способом. Изучение гиполипидемической активности проводили на 24 белых крысах-самках Wistar массой 270–290 г. В эксперименте создавали и использовали твиновую модель гиперлипидемии: однократное внутрибрюшинное введение твина-80 в дозе 250 мг на 100 г массы тела. Анализ липидограмм выполняли на биохимическом анализаторе RAL CLIMA MC-15 с использованием реагентов фирмы DiaSys (Германия).
Результаты. В результате исследования по показателям уровня триглицеридов и липопротеидов очень низкой плотности установили, что фитокомплекс достоверно превосходит значения препарата сравнения (фенофибрат-канон).
Выводы. В условиях твиновой гиперлипидемии лечебно-профилактическое введение фитокомплекса фацелии пижмолистной в дозе 300 мг/кг способствует нормализации показателей липидного обмена сыворотки крови.
69-74
Фармацевтическая химия
Лекарственные растения с общеукрепляющей и тонизирующей активностью, произрастающие в Республике Бурятия (обзор)
Аннотация
Актуальность. В народной медицине многих стран мира в качестве источника получения лекарственных средств издавна использовались растения, так как они обладают постепенным, медленным развитием терапевтического эффекта и мягким действием на организм. Благодаря данным характеристикам, такие препараты рекомендуются к применению при терапии и профилактике обострения ряда хронических заболеваний, сочетанных заболеваниях сердечно-сосудистой системы, органов дыхания и пищеварения, мочевыводящих путей и многих других патологиях, а также при восстановительной терапии после перенесенных заболеваний.
Цель работы ‒ обобщить данные отечественной и мировой литературы по изучению лекарственных растений с общеукрепляющей и тонизирующей активностью, произрастающих в Республике Бурятия.
Материалы и методы. В работе использовали публикационные материалы из баз данных PubMed и e-library, search.rsl. Литературный поиск осуществляли по следующим ключевым словам: общеукрепляющее, тонизирующее действие, растительные лекарственные средства, лекарственные растения Бурятии, биологически активные вещества, Astragalus membranaceus, Saposhnikovia divaricatа, Scutellaria baicalensis, Sedum roseum, Crataegus sangunea. Проанализированы статьи, опубликованные в течение последних 20 лет.
Результаты и выводы. Перечисленные в данном обзоре растения широко использовались в тибетской медицине. Вместе с тем, исходя из анализа представленных литературных данных, следует отметить, что спектр их действия гораздо шире, чем показания к применению в современной клинической практике. Информация, представленная в обзоре, может являться основанием для разработки новых лекарственных средств, в том числе и многокомпонентных сборов, с заданными фармакологическими свойствами.
3-14
Антиоксидантные свойства композиции дигидрокверцетина с альфа-токоферолом в условиях свободнорадикального окисления
Аннотация
Введение. Особую роль в проявлении соединением антиоксидантной способности играет его взаимодействие с другими антиоксидантами, влияющее на демонстрируемый итоговый антиоксидантный эффект. Распространенные в растительном мире флавоноиды, помимо широкого спектра биологической активности, отличаются выраженной антиоксидантной емкостью. В частности, для дигидрокверцетина – соединения с высоким профилем антирадикальной ёмкости, предполагается роль регенерирующего компонента в циклах взаимопревращений в антиоксидантных системах. Рассмотрен характер проявления антиоксидантной активности в композиции, состоящей из дигидрокверцетина и эссенциального антиоксиданта α-токоферола. Композиция исследована в широком диапазоне соотношения компонентов композиции дигидрокверцетин-α–токоферол от 1:1 до 1:20, исходя из предположения, что концентрация второго компонента в живых системах заведомо избыточная.
Цель работы – определение характера проявления антиоксидантной активности композицией дигидрокверцетин-α–токоферол in vitro как в целом, так и с точки зрения действия отдельных компонентов, входящих в нее.
Материал и методы. Изучение антиоксидантных эффектов композиции осуществляли в рамках деколоризационного и кинетического методов, в основе которых лежит ингибирование модельных радикал-катионов 2,2'-азино-бис-(3-этилбензтиозолин-6-сульфокислоты) диаммониевой соли. Для определения характера действия индивидуальных компонентов композиции использовали масс-спектрометрию высокого разрешения, на основе анализа спектров которой были построены кинетические кривые расходования компонентов композиции.
Результаты. Исследование взаимодействия дигидрокверцетина с α-токоферолом деколоризационным методом показало, что для всех соотношений компонентов композиций наблюдается незначительный субаддитивный эффект. Кинетическим методом обнаружен двухстадийный характер проявления антиоксидантной активности композиции, причем первая стадия индукционного периода может быть отнесена к действию α-токоферола, а вторая – дигидрокверцетина. В подтверждение высказанной гипотезе, методом масс-спектрометрии высокого разрешения показано, что уменьшение концентрации дигидрокверцетина в композиции начинается только после практически полного расходования α-токоферола.
Выводы. α-Токоферол предотвращает окисление дигидрокверцетина радикал-катионами ABTS•+ при совместном действии в композиции, причем регенерации одного антиоксиданта другим не происходит.
15-22
Получение рабочего стандартного образца халкона бутеина и его количественное определениe в растительном сырье
Аннотация
Введение. Бутеин – 2’,4’,3,4-тетрагидроксихалкон, содержится в ряде растений, обладающих выраженным антимикробным и противогрибковым действием, таких как: бутея односемянная – Butea monosperma Lam., череда волосистая – Bidens pilosa L., череда трехраздельная – Bidens tripartita L., гидрофитум – Hydnophytum formicarum Jack., тимьян ранний – Thymus praecox. Бутеин не является доминирующем представителем класса флавоноидов врастениях, однако он может служить маркерным соединением для анализа сырья, содержащего данный халкон.
Цель исследования – синтез и анализ рабочего стандартного образца бутеина, а также разработка методики его количественного определения в сырье космеи дваждыперистой с использованием твердофазной экстракции.
Материал и методы. Синтез бутеина проводили по реакции Кляйзена–Шмидта, выход составил 44,4%. Идентификацию полученного бутеина осуществляли при помощи УФ-, ИК- и масс-спектроскопии. Количественное определение бутеина в сырье космеи дваждыперистой проводили методом ВЭЖХ в сочетании с твердофазной экстракцией.
Результаты. Полученные результаты подтверждают, что исследуемый образец является бутеином (2',4',3,4-тетрагидро-ксихалконом). Для определения бутеина в растительном сырье следует располагать стандартным образцом данного соединения, в связи с чем осуществлен синтез субстанции данного халкона и на ее основе, согласно Государственной фармакопее, получен рабочий стандартный образец (содержание бутеина в нем 99,62%). Идентификацию бутеина методом ВЭЖХ проводили по времени удерживания, которое на хроматограмме испытуемого раствора составляет 160,70 мин, на хроматограмме стандартного раствора – 160,07 мин± 2%. Содержание бутеина в цветках изучаемой космеи дваждыперистой в пересчете на сухое сырье составляет 0,043%± 2%.
Выводы. Осуществлен синтез халкона бутеина щелочной конденсацией резацетофенона с протокатеховым альдегидом. Выход бутеина составил 5,95 ±0,0195 г (44,4%). На основе субстанции бутеина получен рабочий стандартный образец, подлинность и чистота которого подтверждены температурой плавления. Полученный стандартный рабочий образец далее использовался для разработки методики количественного определения бутеина в цветках космеи дваждыперистой с использованием твердофазной экстракции. Содержание бутеина в пересчете на сухое сырье составило 0,043%±3%.
23-30
Разработка подходов к анализу элементных примесей в субстанции титана диоксида (определение бария и свинца)
Аннотация
Актуальность. Благодаря своим свойствам, субстанция титана диоксид продолжает широко использоваться в фармацевтической промышленности как эксципиент для лекарственных препаратов (ЛП). Вместе с тем с точки зрения безопасного применения любого компонента ЛП одним из важнейших факторов является определение содержания в нём элементных примесей (ЭП). Существующие для титана диоксида фармакопейные требования к содержанию ЭП на сегодня не гармонизированы. В связи с этим целесообразно разработать подходы к их определению в условиях самых строгих нормативов.
Цель исследования – разработка подходов к анализу и дальнейшей валидации методики определения сурьмы в субстанции титана диоксида на уровне 2 ppm.
Материал и методы. Используемая в работе методика основана на экстракции в органическую фазу ионных ассоциатов, в которых в качестве аниона выступает галогенидный комплекс сурьмы SbCl6–, взаимодействующий с красителем трифенилметанового ряда – бриллиантовым зеленым. Все реактивы и материалы соответствовали фармакопейным требованиям. В качестве объекта исследования использовали образец субстанции титана диоксида (Venator Germany GmbH, Германия). Валидацию методики проводили в соответствии с требованиями Государственной фармакопеи РФ по следующим характеристикам: специфичность, линейность, ПКО, правильность, повторяемость, внутрилабораторная прецизионность и диапазон методики.
Результаты. Показана применимость методики определения сурьмы в субстанции титана диоксида при содержании на уровне 2 ppm с использованием в качестве реактива бриллиантового зеленого. Валидационная оценка методики продемонстрировала соответствие полученных результатов критериям приемлемости по всем исследуемым характеристикам.
Выводы. Контроль содержания ЭП является важным аспектом безопасного применения любого компонента ЛП. Ввиду широкого различия фармакопейных требований к содержанию ЭП в субстанции TiO2, в данном исследовании показана возможность использования экстракционно-фотометрического метода с применением красителя трифенилметанового ряда (бриллиантового зеленого) для определения Sb при самых строгих нормативах (2 ppm). Проведенная валидация методики по таким характеристикам, как специфичность, линейность, ПКО, правильность, повторяемость, внутрилабораторная прецизионность и диапазон, подтвердила возможность выполнения количественной оценки содержания Sb в субстанции TiO2 в диапазоне от 50% (ПКО) до 150% от уровня спецификации.
31-39
Применение сорбента для твердофазной экстракции на основе гипромеллозы для количественного определения бензокаина в комбинированных лекарственных препаратах
Аннотация
Введение. В контроле качества комбинированных лекарственных средств существуют методические подходы, основанные на предварительном разделении компонентов пробы, и подходы без предварительного разделения. Применение твердофазной экстракции (ТФЭ) позволяет разделять анализируемые компоненты на этапе пробоподготовки, при этом селективность разделения определяет селективность аналитической методики в целом.
Цель исследования ‒ оценка метрологических характеристик методики спектрофотометрического определения бензокаина в некоторых комбинированных лекарственных препаратах с использованием сорбента для твердофазной экстракции (ТФЭ) на основе гипромеллозы.
Материал и методы. Сорбент получали по разработанной авторами методике. Для формирования активных центров связывания в сорбенте использовали бензокаин (ФС.2.1.0634, ГФ РФ XV). Для выполнения ТФЭ предложена методика, включающая в себя этапы кондиционирования, нанесение раствора пробы, ступенчатое элюирование водой очищенной и раствором кислоты хлористоводородной концентрацией 0,1 моль/л. Оптическую плотность элюатов регистрировали на спектрофотометре СФ-56 при аналитической длине волны 286 нм. Для оценки селективности (специфичности) пробоподготовки при хроматографическом разделении комбинированных лекарственных препаратов регистрировали спектры поглощения элюатов в диапазоне длин волн 200‒400 нм. Идентификацию бензокаина в элюате проводили по наличию характерных максимумов поглощения 220 и 286 нм. Для расчета содержания бензокаина в элюатах строили градуировочный график в диапазоне концентраций 1‒20 мкг/мл. Для определения метрологических характеристик методик количественного анализа бензокаина проводили 11 параллельных исследований проб каждого лекарственного препарата
Результаты. При реализации методики количественного определения бензокаина для измерения оптической плотности целесообразно использовать только первые порции элюата в объеме 5‒10 мл, полученные на растворе кислоты хлористоводородной. Величина относительной ошибки при определении среднего значения содержания бензокаина в анализируемых препаратах находилась в диапазоне от 1,28 до 1,34% для методик с этапом ТФЭ и 1,86‒2,02% ‒ в случае ее отсутствия. Сравнение параметров воспроизводимости (сходимости) методик спектрофотометрического количественного определения бензокаина в лекарственных препаратах с применением гипромеллозного сорбента и методик без этапа ТФЭ показало, что для всех препаратов статистически значимое различиевоспроизводимости отсутствует. Для варианта методики без этапа ТФЭ в всех случаях наблюдается завышение содержания бензокаина и увеличение относительной ошибки единичного определения в среднем на 48,0%.
Выводы. Показана возможность применения селективного сорбента на основе гипромеллозы при пробоподготовке в количественном спектрофотометрическом определении бензокаина в комбинированных лекарственных препаратах. Применение сорбента для ТФЭ на этапе пробоподготовки приводит к снижению систематической погрешности методики спектрофотометрического определения бензокаина для исследуемого ряда препаратов в среднем на 79,2%.
40-46
Основные методы контроля качества лекарственных препаратов бета-адреноблокаторов и применение спектрофотометрии в анализе мазей антиангиогенного действия на основе тизоль геля (обзор)
Аннотация
В течение последних десятилетий бета-адреноблокаторы показали свою перспективность в терапии гемангиом кожи. Инфантильные гемангиомы являются наиболее распространенными опухолями мягких тканей, возникающими у 4–10% детей в возрасте до одного года. Для лечения заболевания используются различные методы: лазеротерапия, хирургическое иссечение, криодеструкция, склерозирование, а также консервативное лечение системными глюкортикостероидами и бета-адрено-блокаторами, применяемыми энтерально, местно и наружно. Наиболее эффективным и безопасным методом считается фармакотерапия с использованием аппликационных лекарственных форм антагонистов бета-адренорецепторов. Такой подход к лечению имеет ряд преимуществ перед пероральным способом введения: во-первых, удобство и безболезненность применения, во-вторых, локальное воздействие на патологический процесс, и, как следствие, снижение риска возникновения системных побочных эффектов (брадикардия, гипотензия, бронхоспазм, бессонница). Все эти преимущества подчеркивают актуальность разработки мягких лекарственных форм бета-адреноблокаторов. В патенте RU 2471500 C2 «Применение бета-блокатора для изготовления лекарственного средства для лечения гемангиом» в качестве агентов антиангиогенного действия предложены атенолол, бетаксолол, бисопролол, карведилол, метопролол, небиволол, пропранолол и соталол. Создание мягких лекарственных форм бета-адреноблокаторов с отечественным транскутанным проводником Тизоль гелем является решением проблемы целенаправленной доставки действующих веществ в очаг поражения. Для разработки новых лекарственных препаратов фундаментальное значение имеет одно из важнейших направлений фармацевтической науки – фармацевтический анализ, основные задачи которого заключаются в определении качественных и количественных характеристик лекарственных средств. Представлен обзор основных методов анализа бета-адреноблокаторов, используемых для эффективного контроля качества лекарственных препаратов, а также рассмотрены способы идентификации, количественного определения и биофармацевтического анализа новых мазей на основе Тизоль геля.
47-54
Компонентный состав эфирного масла Thymus pulchellus С. A. MEY., интродуцированного в условиях Дагестана
Аннотация
Цель исследования – изучение компонентного состава эфирного масла в надземной части образца Thymus pulchellus С. A. Mey., эндемичного для Краснодарского края, пересаженного на Цудахарскую экспериментальную базу Горного ботанического сада Дагестанского федерального исследовательского центра РАН (ЦЭБ, 1000 м над у.м., Дагестан, Россия), для поиска растений с высоким выходом эфирного масла c максимальным содержанием ценных биологически активных компонентов и расширения ареала произрастания этого вида чабреца.
Материал и методы. Надземная часть интродуцированного на ЦЭБ образца Th. pulchellus собрана в фазу цветения. Эфирное масло получено методом гидродистилляции (метод Клевенджера) в течение 2 ч из подготовленного общепринятыми способами сухого сырья. Компонентный качественный и количественный анализ выделенных образцов эфирного масла проведен методом хромато-масс-спектрометрии на Shimadzu GCMSQP2010plus на колонке Supelco SLB TM-5 ms (30 м × 0,25мм × 0,25 мкм) в режиме «сплит».
Результаты. Выход ЭФ составил 0,26% в пересчете на воздушно-сухое сырье. Методом хромато-масс-спектрометрии в образце ЭФ найдено 56 компонентов, из них идентифицировано 49 соединений.
Выводы. Впервые приводятся данные по изучению состава эфирного масла в надземной части интродуцированного дагестанского образца Th. pulchellus. Полученное эфирное масло состоит в основном из сесквитерпеновой фракции (84,12%). Эфирное масло исследуемого образца чабреца красивенького показало совершенно отличный от других видов набор основных компонентов, среди которых главными являются лимонен, γ-кадинен, α-мууролол, эпикубенол, что позволяет говорить об обособленности данного вида. Полученные результаты характеризуют эфирное масло Thymus pulchellus как источник ценных компонентов, а само растение как перспективное лекарственное сырье.
55-61
Юбилеи и даты
Памяти профессора Олега Никифоровича Толкачева
75-75