Модель SPR иммуносенсора для определения аутоантител к глутатион-трансферазе в образцах сыворотки крови
- Авторы: Ершов П.В1, Калужский Л.А1, Иванов А.С1
-
Учреждения:
- ФГБНУ «Научно-исследовательский институт биомедицинской химии им. В.Н. Ореховича», Российской академии наук
- Выпуск: Том 18, № 6 (2020)
- Страницы: 38-43
- Раздел: Статьи
- URL: https://journals.eco-vector.com/1728-2918/article/view/113345
- DOI: https://doi.org/10.29296/24999490-2020-06-06
- ID: 113345
Цитировать
Полный текст
Открытый доступ
Доступ предоставлен
Доступ платный или только для подписчиков
Аннотация
Введение. Количественное определение и изотипирование аутоантител к клинически значимому белку - глутатион-S-траснферазе в образцах сыворотки крови актуально для мониторинга и прогноза динамики аутоиммунных процессов. Цель исследования. Целью настоящего исследования была адаптация оптического биосенсора поверхностного плазмонного резонанса (Surface Plasmon Resonance, SPR) для детекции взаимодействий глутатион-S-трансферазы (GST) и антител к ней в модельных экспериментах с использованием образцов сыворотки крови. Методы. Для детекции комплексов «антиген - антитело» был использован метод SPR. Эксперименты выполняли по схемам прямой регистрации взаимодействий, «усиления сигнала» и «конкурентного ингибирования». Результаты. Впервые было показано, что существует принципиальная возможность SPR анализа для детекции поликлональных антител против GST в образцах сыворотки и определения изотипов связавшихся антител со следующими параметрами иммуносенсора: а) уровень иммобилизации GSTна чипе CM5 составил 4-4,5 нг/мм2; б) падение способности GST связывать антитела за биосенсорный цикл при использовании регенерационного раствора 10мМ глицин-НCl (pH 1,5) было 0,1-0,3%; диапазон линейности 30-325нМ; в) содержание сыворотки в анализируемых образцах 10% (по объему). Заключение. Таким образом, адаптация SPR биосенсоров линейки Biacore (GE Healthcare, США) под серийные анализы образцов сыворотки для мониторинга наличия и динамики аутоантител к белкам организма человека (в том числе к GST) открывает новые пути развития диагностического инструментария в биомедицинских и клинических исследованиях.
Полный текст
Об авторах
П. В Ершов
ФГБНУ «Научно-исследовательский институт биомедицинской химии им. В.Н. Ореховича», Российской академии наук
Email: pavel79@inbox.ru
старший научный сотрудник Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Научно-исследовательский институт биомедицинской химии им. В.Н. Ореховича», кандидат биологических наук Российская Федерация, 119121, Москва, ул. Погодинская, д. 10 стр. 8
Л. А Калужский
ФГБНУ «Научно-исследовательский институт биомедицинской химии им. В.Н. Ореховича», Российской академии наук
Email: leonid.kaluzhskiy@ibmc.msk.ru
научный сотрудник Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Научно-исследовательский институт биомедицинской химии им. В.Н. Ореховича», кандидат биологических наук Российская Федерация, 119121, Москва, ул. Погодинская, д. 10 стр. 8
А. С Иванов
ФГБНУ «Научно-исследовательский институт биомедицинской химии им. В.Н. Ореховича», Российской академии наук
Email: alexei.ivanov@ibmc.msk.ru
заведующий лабораторией Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Научно-исследовательский институт биомедицинской химии им. В.Н. Ореховича», профессор, доктор биологических наук Российская Федерация, 119121, Москва, ул. Погодинская, д. 10 стр. 8
Список литературы
- Иванов А.С. Исследование межмолекулярных взаимодействий с помощью оптических биосенсоров, работающих на эффекте поверхностного плазмонного резонанса. Современные технологии в медицине. 2012; 4: 142-53
- Rich R.L., Myszka D.G. Why you should be using more SPR biosensor technology Drug Discov Today Technol. 2004; 1 (3): 301-8. https://doi.org/10.10167j.dd-tec.2004.09.009.
- Mariani S., Minunni M. Surface plasmon resonance applications in clinical analysis. Anal. Bioanal. Chem. 2014; 406 (9-10): 2303-23. https://doi.org/10.1007/s00216-014-7647-5.
- Оценка иммуногенности терапевтических белков, полученных с использованием биотехнологических методов (гл. 11). Решение Совета Евразийской экономической комиссии от 3 ноября 2016 г. №89 «Об утверждении Правил проведения исследований биологических лекарственных средств Евразийского экономического союза».
- FDA Draft: Guidance for Industry - Assay Development and Validation for Immunogenicity Testing of Therapeutic Protein Products. 2016.
- FDA-2009-D-0539-0054 «Immunogenicity Testing of Therapeutic Protein Products Developing and Validating Assays for AntiDrug Antibody Detection». Federal Register on February 1. 2019.
- EMEA/CHMP/BMWP/14327/2006 Rev 1. Committee for Medicinal Products for Human Use (CHMP) «Guideline on Immunogenicity assessment of therapeutic proteins». 2017.
- European Pharmacopoeia Department (European Directorate for the Quality of Medicines & Health) «The role of European Pharmacopoeia monographs in setting quality standards for biotherapeuticprod-ucts». 2016.
- Kato T., Miyakawa H., Ishibashi M. Frequency and significance of antiglutathione S-transferase autoantibody (anti-GST A1-1) in autoimmune hepatitis. J. Autoimmun. 2004; 22 (3): 211-6. https://doi. org/10.1016/j.jaut.2004.01.003.
- Yang J., Tezel G., Patil R.V., Romano C., Wax M.B. Serum autoantibody against glutathione S-transferase in patients with glaucoma. Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2001; 42 (6): 1273-6.
- Wesierska-Gadek J., Grimm R., Hitchman E., Penner E. Members of the glutathione S-transferase gene family are antigens in autoimmune hepatitis. Gastroenterology 1998; 114 (2): 329-35. https://doi. org/10.1016/s0016-5085(98)70485-8
- Мальцева Н.В., Лыкова О.Ф., Мельниченко М.А., Архипова С.В., Онищенко А.Л. Зависимость содержания иммуноглобулинов IgA и IgE в слезной жидкости от полиморфизмов гена глутатион-трансферазы у металлургов с офтальмопатологией. Медицинская иммунология. 2011; 13 (6): 609-16.
- Patent for the invention (RU2012147551) Methods for diagnostic of glaucoma. F. Cargo, N. Boehm, P. Norbert, K. Bel. 2014. https://patentscope.wipo.int/
- Jaki T., Lawo J.P., Wolfsegger M.J., Singer J., Allacher P., Horling F. A formal comparison of different methods for establishing cut points to distinguish positive and negative samples in immunoassays. J. Pharm. Biomed. Anal. 2011; 55 (5): 1148-56. https:// doi.org/10.1016/j.jpba.2011.04.006.
Дополнительные файлы
