Оценка цитокинового состава сыворотки крови и препаратов на основе тромбоцитов человека
- Авторы: Боровкова Н.В.1, Макаров М.С.1, Андреев Ю.В.1, Сторожева М.В.1, Пономарев И.Н.1
-
Учреждения:
- ГБУЗ «Научно-исследовательекий институт скорой помощи им. Н.В. Склифосовского Департамента здравоохранения города Мооквы»
- Выпуск: Том 19, № 3 (2021)
- Страницы: 51-57
- Раздел: Статьи
- URL: https://journals.eco-vector.com/1728-2918/article/view/113422
- DOI: https://doi.org/10.29296/24999490-2021-03-08
- ID: 113422
Цитировать
Полный текст
Открытый доступ
Доступ предоставлен
Доступ платный или только для подписчиков
Аннотация
Введение. Тромбоциты человека потенциально обладают высоким репаративным и регенеративным потенциалом. Биохимический состав препаратов на основе тромбоцитов сильно зависит от способа его получения. Цель исследования. Оценка цитокинового состава тромбоцитарных лизатов, полученных различными способами.Метод. Из консервированной крови доноров-добровольцев получали 5 препаратов: богатую тромбоцитами плазму (БТП), БТП с высоким содержанием лейкоцитов (БТП ВСЛ), бедную тромбоцитами плазму (БеднТП), плазму, выделенную путем пассивной седиментации клеточных компонентов (ППСКК); суспензию тромбоцитов, отмытых от плазмы (СТОП). Кроме того, у доноров забирали неконсервированную кровь для получения сыворотки. Тромбоцитарный лизат готовили путем криодеструкции клеток при -40/-80°С с последующей разморозкой проб при +2/+4°С в течение 12 ч и центрифугированием при 3000 g. Результаты. Показано, что лизаты БТП, БТП ВСЛ, СТОП имеют заметно более высокий уровень ростовых факторов по сравнению с сывороткой. В БеднТП концентрация IL 1alfa, VEGF и TGFα была выше, чем в БТП. На фоне высокой концентрации лейкоцитов в БТП ВСЛ значимо повышался уровень PDGF, а также провоспалительных интерлейкинов IL 6 и IL8, при этом уровень VEGF был снижен по сравнению с БТП. В лизатах ППСКК концентрация VEGF и FGF не отличалась от аналогичных значений в сыворотке и была ниже, чем в БТП и БеднТП. Отмывание тромбоцитов от плазмы увеличивало содержание PDGF, EGF, VEGF, FGF в тромбоцитарном лизате в 2,3-4,9 раза. Выявлена сильная корреляционная связь между уровнем PDGF и EGF и общим содержанием тромбоцитов с гранулами в препаратах до криодеструкции. Общая концентрация тромбоцитов в БТП не коррелировала с концентрацией ни одного из исследованных цитокинов в лизате.Заключение. Факторы роста могут быть получены как в составе БТП, так и БеднТП. Отмывание тромбоцитов от плазмы заметно повышает уровень факторов роста в конечном лизате.
Ключевые слова
Полный текст
Об авторах
Наталья Валерьевна Боровкова
ГБУЗ «Научно-исследовательекий институт скорой помощи им. Н.В. Склифосовского Департамента здравоохранения города Мооквы»
Email: borovkovanv@sklif.mos.ru
заведующая научным отделением, доктор медицин€кихнаук
Максим Сергеевич Макаров
ГБУЗ «Научно-исследовательекий институт скорой помощи им. Н.В. Склифосовского Департамента здравоохранения города Мооквы»
Email: mcsimmc@yandex.ru
бтарший научный ттрудник, кандидат биологиче€кихнаук
Юлий Вадимович Андреев
ГБУЗ «Научно-исследовательекий институт скорой помощи им. Н.В. Склифосовского Департамента здравоохранения города Мооквы»
Email: andreevuv@sklif.mos.ru
бтарший научный ттрудник отделения биотехнологий и тражфузиологии, кандидат медицижких наук
Майя Викторовна Сторожева
ГБУЗ «Научно-исследовательекий институт скорой помощи им. Н.В. Склифосовского Департамента здравоохранения города Мооквы»
Email: storozhevamv@sklif.mos.ru
научный ттрудник отделения биотехнологий и тражфузиологии
Иван Николаевич Пономарев
ГБУЗ «Научно-исследовательекий институт скорой помощи им. Н.В. Склифосовского Департамента здравоохранения города Мооквы»
Email: ponomarevin@sklif.mos.ru
научный ттрудник отделения биотехнологий и тражфузиологии., кандидат медицижких наук
Список литературы
- Mehta S., Watson J.T. Platelet rich concentrate: basic science and current clinical applications. J Orthop Trauma. 2008; 22 (6): 432-8. DOI: 10.1097/ BOT.0b013e31817e793f.
- Golebiewska E.M., Poole A.W. Secrets of platelet exocytosis - what do we really know about platelet secretion mechanisms? Br J Haematol. 2014; 165 (2): 204-16. doi: 10.1111/bjh.12682.
- Nurden A.T., Nurden P., Sanchez M., Andia I., Anitua E. Platelets and wound healing. Front Biosci. 2008; 13 (9): P. 3532-48.
- Marx R.E. Platelet-rich plasma: evidence to support its use. J Oral Maxillofac Surg. 2004; 62 (4): 489-96. DOI: 10.1016/j. joms.2003.12.003.
- Alsousou J., Thompson M., Hulley P., Noble A., Willett K. The biology of platelet-rich plasma and its application in trauma and orthopaedic surgery: a review of the literature. J Bone Joint Surg Br. 2009; 91 (8): 98796. doi: 10.1302/0301-620X.91B8.22546.
- Chellini F., Tani A., Zecchi-Orlandini S., Sassoli C. Influence of Platelet-Rich and Platelet-Poor Plasma on Endogenous Mechanisms of Skeletal Muscle Repair/Regeneration. Int J. Mol Sci. 2019; 20 (3): 683. doi: 10.3390/ijms20030683.
- Amable P.R., Carias R.B., Teixeira M.V, da Cruz Pacheco I., Correa do Amaral R.J., Granjeiro J.M., Borojevic R. Platelet-rich plasma preparation for regenerative medicine:optimization and quantification of cytokines and growth factors. Stem Cell Res Ther. 2013; 4 (3): 67. DOI: 10.1186/ scrt218.
- Макаров М.С., Хватов В.Б., Высочин И.В., Кобзева Е.Н., Боровкова Н.В. Морфофункциональный анализ тромбоцитов человека с помощью витального окрашивания. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2014; 156 (3): 409-12.
- Kamykowski J., Carlton P., Sehgal S., Storrie B. Quantitative immunofluorescence mapping reveals little functional coclustering of proteins within platelet alpha-granules. Blood. 2011; 118 (5): 1370-3. DOI: 10.1182/ blood-2011-01-330910
- Shahidi M., Vatanmakanian M., Arami M.K., Sadeghi Shirazi F., Esmaeili N., Hydarporian S., Jafari S. A comparative study between platelet-rich plasma and platelet-poor plasma effects on angiogenesis. Med Mol Morphol. 2018; 51 (1): 21-31. DOI: 10.1007/ s00795-017-0168-5
- Конторщикова К.Н., Шахова К.А., Янченко О.С., Тихомирова Ю.Р., Булат В.В., Булат А.В. Определение тромбоцитарных факторов роста в необогащенной тромбоцитами плазме. Медицинский альманах. 2018; 53 (2): 41-4
- Макаров М.С., Боровкова Н.В., Хватов В.Б., Кобзева Е.Н. Влияние центрифугирования на биологическую полноценность тромбоцитов человека. Вестник службы крови России. 2015; 1: 41-4
- Melzer M. Lysosomes, growth factor activity, and carcinogenic implications. Crit Rev Eukaryot Gene Expr. 2012; 22 (4): 345-58. doi: 10.1615/critreveukargeneexpr.v22. i4.70.
- Kreuter J., Gelperina S. Use of nanoparticles for cerebral cancer. Tumori. 2008; 94: 271-7.
- Сергеева Н.С., Шанский Я.Д., Свиридова И.К., Кирсанова В.А., Ахмедова С.А., Кувшинова Е.А., Мейснер И.С. Биологические эффекты тромбоцитарного лизата при добавлении в среду культивирования клеток человека. Гены и клетки. 2014; 9 (1): 77-85.
- Шанский Я.Д., Сергеева Н.С., Свиридова И.К., Киракозов М.С., Кирсанова В.А., Ахмедова С.А., Антохин А.И., Чиссов В.И. Исследование лизата тромбоцитов человека как перспективной ростовой добавки для культивирования стволовых и других типов клеток. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины 2013; 156 (1): 146-51
Дополнительные файлы
