ИЗУЧЕНИЕ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ СОЕДИНЕНИЯ РУ-1205 С АНАЛИЗАТОРАМИ НЕЙРОМЕДИАТОРНЫХ СИСТЕМ

Полный текст

В результате предварительные экспериментальных исследований по направленному поиску веществ с каппа-рецепторной активностью, проведенных на базе Волгоградского государственного медицинского университета, выявлено новое соединение под лабораторным шифром РУ-1205 с выраженным каппа-опиоидным агонистическим действием [2]. Нейротропные средства, в том числе и каппа-селективные агонисты, реализуют свои эффекты с вовлечением различных нейромедиаторных систем мозга [7]. Для расширения представле- ЛэеипрВз ний о механизме действия нового соединения актуальным является изучение его влияния на проявления действия различных нейромедиаторных анализаторов [1]. Исследование влияния новых молекул на нейрональные процессы в ЦНС представляет интерес не только с точки зрения выяснения общих принципов их действия, но и дальнейшей разработки рациональных путей поиска более совершенных лекарственных средств с заданными свойствами и минимальными нежелательными эффектами. Также в настоящее время накоплен фактический материал, свидетельствующий о важной роли ГАМК-ергической и дофаминергической систем в осуществлении антиноцицептивного действия известных каппа-опиоидных агонистов [6, 10]. ЦЕЛЬ РАБОТЫ Изучение взаимодействия соединения РУ-1205 с анализаторами нейромедиаторных систем. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ В настоящей работе представлены данные по изучению взаимодействия субстанции соединения РУ-1205 дигидрохлорида 9-(2-морфолиноэтил)-2-(4-фторфенил)-имидазо[1,2-а]бензимидазола, синтезированного в ЗАО «ЭМПИЛС-ФОХ» (г. Ростов-на-Дону) (Пат. РФ № 2 413 512 С1 от 29.07.2009 г) [3] с анализаторами нейромедиаторных систем. Экспериментальные исследования проводили с использованием галоперидола («Gedeon Richter», Венгрия), апоморфина гидрохлорида, фенамина («ICN Biomedical», США), L-3,4-диоксифенилаланина (L-ДОФА) («Sigma», США), клофелина («Биомед», Россия), резерпина («Sigma», США), 5-окситриптофана (5-ОТФ) («Sigma», США), ареколина («Sigma», США), никотина («Sigma», США), пикротоксина («ICN Biomedical», США), бикукуллина («Sigma», США). Эксперименты были выполнены на 108 нелинейных белых крысах массой 220-250 г и 282 нелинейных половозрелых белых мышах массой 20-25 г. Животные содержались в условиях вивария при постоянной температуре-22-24оС, относительной влажности воздуха 40-50 %, при 12-часовом световом режиме, на стандартной полнорационной диете (ГОСТ Р 50258-92), с соблюдением правил лабораторной практики при проведении доклинических исследований в РФ (ГОС З 51000.3-96 и 1000.4-96), а также правил и Междуна родных рекомендаций Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых при экспериментальных исследованиях. Для оценки нейрохимического спектра действия исследуемого вещества применялись разнообразные методические приемы при сочетанном введении исследуемого соединения с анализаторными агентами [1]. Влияние на моноаминергические структуры мозга изучали в тестах с галоперидолом (1 мг/кг в/бр), апоморфином (1 мг/кг в/бр), фенамином (5 мг/кг в/бр), клофелином (0,1 мг/кг в/бр), резерпином (2,5 мг/кг в/бр), 5-окситриптофаном (300 мг/кг в/бр), L-ДОФА (100 мг/кг в/бр); холинергическое действие определялось с учетом модуляции эффектов аре-колина (25 мг/кг п/к), никотина (6 мг/кг п/к); ГАМК-ергическое влияние-в тесте с пикротоксином (2,5 мг/кг в/бр), бикукуллином (2,7 мг/кг в/бр). Соединение РУ-1205 вводили внутрибрюшинно в дозе 1 мг/кг. Результаты обрабатывали статистически при помощи компьютерной программы «GraphPad Prism 5.0» с использованием критериев Краскела-Уолиса и Манна-Уитни. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Соединение РУ-1205 при сочетанном введении с фенамином статистически значимо снижало фенамин-индуцированные поведенческие проявления на 47,3 % по сравнению с группой контроля (табл. 1). Таблица 1 Влияние соединения РУ-1205 (1 мг/кг в/бр) на локомоторную активность в актометре (M ± m) Вещество Двигательная активность Интактный контроль (n = 8) 134,3 ± 12,8 Контроль (Фенамин) (n = 8) 308,7 ± 24,8 Контроль (РУ-1205) (n = 8) 148,7 ± 14,9 РУ-1205+Фенамин (n = 8) 162,8 ± 27,4 *Статически значимо по отношению к интактной контрольной группе животных (р < 0,05). В тесте с антагонистом ГАМК-рецепторов - пикротоксином исследуемое вещество РУ-1205 статистически значимо увеличивало латентный период развития тремора, клонуса в 2,4 и 1,2 раза соответственно и уменьшало (на 24,4 %) число пикротоксин-индуциро-ванных конвульсивных припадков (р < 0,05) (табл. 2). Таблица 2 Влияние соединения РУ-1205 (1 мг/кг в/бр) на эффекты пикротоксина (2,5 мг/кг в/бр) у мышей (M ± m) Вещество/группа, (n = 8) Латентный период,сек Длительность тремора, с Начало конвульсий, с Число конвульсивных прип. Интактный контроль 0 0 0 0 Контроль (РУ-1205) 0 0 0 0 Контроль (Пикротоксин) 784,5 ± 40,8 253,8 ± 24,9 1037,9 ± 37,4 4,5 ± 0,2 РУ-1205 + Пикротоксин 850,1 ± 55,4 106,9 ± 15,5 1209,1 ± 53,8 3,4 ± 0,3 *Статистически значимо по отношению к контролю, p < 0,05 Выпуск 2 (50). 2014 121 fèi(5ÿ?îïïKirufa П^оХпТгГІМШ = Таблица 3 Влияние соединения РУ-1205 (1 мг/кг, в/бр) на эффекты бикукуллина у мышей (M± т) Вещество, (n = 9) Латентный период,с Длительность конвульсий,с Число конвульсий Интактный контроль 0 0 0 Контроль (РУ-1205) 0 0 0 Контроль (Бикукуллин) 201,6 ± 17,8 137,2 ± 25,7 4,7 ± 0,6 РУ-1205+ Бикукуллин 279,9 ± 24,3 184,3 ± 29,4 2,1 ± 0,1 *Статистически значимо по отношению к контролю (бикукуллин) (p < 0,05). Соединение РУ-1205 при совместном введении с бикукуллином приводило к статистически значимому увеличению длительности латентного периода развития конвульсий в 1,4 раза и снижению числа бикукул-лин-индуцированных приступов в 2,2 раза по сравнению с контрольной группой животных (табл. 3). В тесте с галоперидолом тестируемое вещество РУ-1205 не вызывало изменений каталептогенных свойств у крыс опытной группы по сравнению с контрольными животными. Исследуемое соединение не влияло на выраженность апоморфин-индуцированной стереотипии у животных. Комбинация тестируемого соединения РУ-1205 + L-ДОФА не оказывала модулирующего влияния на дофаминергическую нейротрансмиссию и, как следствие, поведенческие эффекты низких доз L-ДОФА. Соединение РУ-1205 и Н-холиномиметик - никотин при сочетанном введении не вызывали изменений латентного периода и длительности тремора по отношению к контрольной группе животных. Соединение РУ-1205 существенно не влияло на стимулирующие эффекты ареколина. Исследуемое вещество не оказывало влияния на понижение ректальной температуры, индуцированной клофелином. В тесте с резерпином изучаемое вещество РУ-1205 не влияло на выраженность гипотермии, блефароптоза и локомоторной активности. Комбинация изучаемого вещества РУ-1205 в дозе 1 мг/кг с метаболическим предшественником серотонина статистически значимо не влияло на стимулирующие эффекты 5-окситриптофана. ЗАКЛЮЧЕНИЕ В результате проведенного исследования было выявлено статистически значимое снижение гиперактивности мышей в тесте с фенамином по сравнению с контрольной группой животных. Данные результаты предположительно могут указывать на способность исследуемого соединения блокировать дофаминовую нейропередачу в мезолимбической системе мозга. Однако нельзя исключать и другие механизмы снижения двигательного поведения животных, учитывая то, что фенаминовая гиперактивность может быть обусловлена высвобождением из нервных окончаний различ ных катехоламинов (норадреналина, дофамина и серотонина) [5, 9]. При проведении исследований с пикротоксином и бикукуллином было выявлено, что соединение РУ-1205 снижает число конвульсий по сравнению с контрольной группой животных. Вероятно, данная активность может быть обусловлена как аллостерическими взаимодействиями с компонентами ГАМК-рецепторного комплекса [4] так и влиянием на Ca2+-зависимые-K+ токи [8]. Было выявлено, что тестируемое вещество не оказывает влияния на эффекты адренергических, се-ротонинергических и холинергических анализаторов нейромедиаторных систем.

Об авторах

Александр Алексеевич Спасов

Волгоградский государственный медицинский университет

Email: aspasov@mail.ru
академик РАН, з. д. н. РФ, профессор, д. м. н., зав. кафедрой фармакологии

О. Ю. Гречко

Д. М. Штарёва

А. И. Ращенко

К. Ю. Калитин

Р. А. Литвинов

Список литературы

Дополнительные файлы