EXPERIMENTAL STUDY OF THE DYNAMICS OF EDUCATION SUBSTITUTION OF DENTIN

Full Text

Вопросу о скорости образования заместительного (репаративного) дентина в искусственно созданных полостях твердых тканей зубов посвящено немало научных работ [1, 3, 7, 17, 20]. Так, научной группой во главе с профессором М. М. Царинским (1960, 1965) изучена скорость образования заместительного дентина в зубах экспериментальных животных и человека после препарирования кариозных полостей [2, 10]. Гистологические исследования показали, что примерно в течение 30 дней после вмешательства количество заместительного дентина оставалось незначительным, нарастая максимально к 70-90-м сут. В аналогичных исследованиях других авторов показано, что наивысший уровень образования заместительного дентина отмечен от 30-х до 60-х сут. (прирост - от 2 до 3,5 мк в сут.), а на 70-е и 140-е сут. темп дентиногенеза снижается до 0,15 мк за сут. [11, 15, 19]. Средний уровень образования репаративного дентина для всего периода изучения составил 1,35 мк в сут. [12, 14, 21]. Таким образом, данные различных исследователей, изучавших скорость формирования заместительного дентина в эксперименте, довольно противоречивы. В то время как K. Yoshiba (2010) относит начало генеза замести тельного дентина к 7-14-м сут. после создания у собак искусственных полостей [23], А. Г. Сирак (2012) при аналогичной методике эксперимента - к концу 1-го месяца [4, 6]. Вместе с тем изучение динамики образования заместительного дентина представляет для клиницистов исключительный интерес. Этот вопрос тесно связан с поисками и созданием новых лекарственных и пломбировочных препаратов [1, 5, 8, 9, 18]. Успех этих исследований, а также объективная оценка предлагаемых в продаже препаратов для стимуляции репаративной функции пульпы зуба возможны лишь при учете динамики образования заместительного дентина, которую можно детально изучить только экспериментальным путем. ЦЕЛЬ РАБОТЫ Экспериментальное определение сроков образования заместительного дентина в искусственно созданных полостях. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ Эксперимент проведен на 6 взрослых собаках (средний возраст около 3 лет), которым под общим Выпуск 4 (60). 2016 59 ЩШгорСз [ЩсмеТКЩ наркозом (Zoletil 50) создавали искусственные полости по типу глубокого кариеса без вскрытия рога пульпы. Препарирование полостей начинали с со-шлифования эмали алмазным бором и заканчивали твердосплавным бором при постоянном охлаждении стерильным физраствором. Искусственные полости в течение всего периода эксперимента оставались открытыми. Зубы удаляли под общим наркозом через 3, 7, 14, 21, 30, 60 и 90 дней после создания полостей. Материал фиксировали в 12%-м растворе нейтрального формалина, декальцинировали в 12%-м растворе азотной кислоты и заливали в целлоидин. Срезы окрашивали гематоксилин-эозином, по Массону-Гол-днеру, а для выявления аргирофильных волокон пульпы импрегнировали по Бильшовскому-Гросс. Всего морфологическому исследованию подвергнуто 40 зубов с искусственными полостями. В качестве контроля изучено 20 интактных зуба. Микроскопию срезов проводили на цифровом микроскопе со встроенным фотоаппаратом Olympus BX45. Морфометрические исследования проводили с использованием программы Видео-Тест Морфология 5.1 для Windows. Полученные цифровые данные были анализированы с применением статистического метода f-критерия Стьюдента в программе Primer of Biostatistics 4.03 для Windows. Достоверными считали различия при р < 0,05. Эксперимент на животных проведен в соответствии с принципами надлежащей лабораторной практики (Национальный стандарт «Принципы надлежащей лабораторной практики» ГОСТ Р 53434-2009), положительное заключение этического комитета СтГМУ № 34 от 12.02.2014. Исследование осуществлено в рамках Государственного задания Министерства здравоохранения Российской Федерации для ГБОУ ВПО «Ставропольский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации по осуществлению научных исследований и разработок по теме: «Стволовые клетки пульпы зуба в регенерации и иммуномодуляции» совместно с Всероссийским НИИ овцеводства и козоводства и Ставропольским государственным аграрным университетом (Ставрополь). РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Проведенные исследования показали, что при повреждении твердых тканей зуба изменения в дентине и пульпе преимущественно локализуются в секторе, соответствующем искусственной полости. По прошествии 3 сут. опыта в пододонтобластичес-ком слое (соответственно искусственной полости) отмечается некоторое увеличение количества клеточных элементов за счет малодифференцированных форм. Слой одонтобластов в этой области дезорганизован и содержит клетки с пикнотичными ядрами. Через 7 сут. зона предентина на границе со слоем одонтобластов теряет четкость очертаний, линия гиперкальцинации выражена хорошо (рис. а). Заслуживает внимания тот факт, что протяженность этой линии значительно превосходит диаметр искусственной полости. Аргирофильные волокна Корфа в этой области представляются несколько выпрямленными и укороченными. Концы их, обращенные к дентину, значительно утолщены (рис. б). Через 14 суток количество клеточных элементов в пододонтобластическом слое в проекции искусственной полости не отличается от такового на соседних участках. Слой одонтобластов несколько расширен. Однако это происходит не за счет увеличения числа рядов клеток, а вследствие более рыхлого их расположения. Большая часть клеток с пикнотичными ядрами. Зона предентина несколько расширена, и выраженной границы со слоем одонтобластов отметить не удается. Линия гиперкальцинации четкая. На ограниченном участке, соответствующем искусственной полости, аргирофильные волокна Корфа в отличие от нормы в еще большей степени, чем в предыдущем сроке, выпрямляются и утолщаются по направлению к дентину, напоминая по форме пирамиды (рис. в). Таким образом, изменения аргирофильных волокон уже в ранние сроки отражают проявление пластической реакции пульпы в ответ на повреждение твердых тканей зуба. В этом отношении полученные данные подтверждают наблюдения других авторов [13, 16, 22], которые при исследовании кариозных зубов человека уже в стадии пятна находили изменения аргирофильных волокон, радиально проходящих в слое одонтобластов. Через 21 сут. в пододонтобластическом слое отмечается увеличение количества клеточных элементов. Слой одонтобластов соответственно полости несколько обеднен клетками, встречаются формы с пикнотичными ядрами. Имеется четкая демаркационная линия, отделяющая первичный дентин от заместительного и по протяженности значительно превосходящая диаметр искусственной полости (рис. г). Отложения заместительного дентина несколько выступают в полость зуба, дентинные канальцы в нем приобретают неправильное расположение. Зона пре-дентина соответственно искусственной полости сужена. В новой генерации дентина замурованы единичные ядра одонтобластов. Аргирофильные волокна Корфа, расположенные в секторе, соответствующем искусственной полости, представляются тонкими, равномерно извитыми. Кроме того, здесь выявляется незначительное количество волокон, утолщенных на всем протяжении. Часть из них имеет пирамидообразные расширения на концах, обращенных к дентину. Описанная картина соответствует начальной фазе формирования следующего слоя заместительного дентина (регулярного). 60 Выпуск 4 (60). 2016 Рис. Микропрепараты основной группы на 7-е (а, б), 14-е (в) и 21-е (г) сутки эксперимента: а - линия гиперкальцинации (1) на границе со слоем одонтобластов (2). Окраска по Массону. Ок. 10, об. 40; б - утолщенные аргирофильные волокна Корфа (отмечены стрелками). Окраска гематоксилином и эозином. Ок. 15, об. 40; в - аргирофильные волокна Корфа (1), идущие по направлению к дентину Окраска по Массону Ок. 10, об. 40; г - отложение заместительного дентина с четкой демаркационной линией (отмечена стрелками), отделяющей первичный дентин от репаративного. Окраска гематоксилином и эозином. Ок. 10, об. 20 ЗАКЛЮЧЕНИЕ Как показали результаты проведенного исследования, уже через 2 недели после создания искусственных полостей толщина слоя заместительного дентина увеличивается и по прошествии 21-х суток в препаратах определяется пласт заместительного дентина, толщиной до 40 мк. Впоследствии (через 1, 2 и 3 месяца) толщина слоя заместительного дентина продолжает возрастать, его отложения чаще всего построены по типу регулярного дентина.

About the authors

S. V. Sirak

Stavropol State Medical University

Email: sergejsirak@yandex.ru

T. L. Kobylkina

Stavropol State Medical University

A. G. Sirak

Stavropol State Medical University

N. I. Bykova

Kuban state medical University

A. V. Arutyunov

Kuban state medical University

References

Supplementary files