THE FEATURES OF THE IMMUNE STATUS OF PATIENTS WITH COMBINATION OF ALLERGIC RHINITIS AND INFLAMMATORY DISEASES OF THE UPPER GASTROINTESTINAL TRACT

Full Text

Хронические воспалительные заболевания верхнего отдела желудочно-кишечного тракта (ВЗВОЖКТ) являются самой частой формой поражения органов пищеварения. Данным видом патологии в России страдает около трети населения [3]. ВЗВОЖКТ характеризуются полиэтиологичностью, при этом одной из основных причин развития гастритов в настоящее время считается инфекционная, и главная роль принадлежит бактерии H. pylori. Вместе с тем, к настоящему времени получены неопределенные результаты в отношении H. pylori в качестве фактора, оказывающего влияние на развитие и течение аллергических заболеваний. В ряде исследований показана возможная способность данной бактерии предотвращать развитие аллергических заболеваний [6], в частности, бронхиальной астмы и пищевой аллергии. Другие работы демонстрируют H. pylori в качестве фактора, играющего роль в развитии и/или течении заболеваний, не относящихся к пищеварительной системе (хроническая крапивница, пищевая аллергия, бронхиальная астма) [2]. Учитывая то, что основное число исследований направлено на изучение локальных изменений, происходящих под воздействием H. pylori (слизистая оболочка желудка и двенадцатиперстной кишки), представляют интерес процессы, касающиеся особенностей системной реактивности организма при H. ру/о/7-ассоциированных заболеваниях пациентов при контролируемом течении аллергического ринита (АР). ЦЕЛЬ РАБОТЫ Выявить особенности иммунного статуса у пациентов с ВЗВОЖКТ в зависимости от наличия аллергопатологии и H. ру/о/7-инфекции. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ Работа выполнена в дизайне одномоментного сравнительного аналитического исследования в параллельных группах. В исследование были включены 65 человек в возрасте от 18 до 40 лет, средний возраст составил (29,0 ± 6,64) года. Критерии включения: ВЗВОЖКТ до начала терапии (диагноз устанавливался гастроэнтерологом); наличие АР (диагноз устанавливался/подтверждался аллергологом-иммунологом) в стадии ремиссии. Критерии невключения: менее 30 дней после острых воспалительных заболеваний, не локализованных в области ЖКТ; наличие хронических воспалительных процессов другой локализации (кроме аллергических заболеваний). I группу (n = 23) составили пациенты с АР без патологии ЖКТ. II группу (АР+Нр-; n = 20) -пациенты с ВЗВОЖКТ и с АР, H. pylori-негативные. III группу (АР+Нр+; n = 22) - пациенты с ВЗВОЖКТ и с АР, H. pytor/'-позитивные. Показатели общего анализа крови определяли на гематологическом анализаторе ADVIA 2120 (Siemens, США). Иммунофенотип лимфоцитов по CD-антигенам (CD3, CD4, CD8, CD16, CD22) определяли иммуно-флюоресцентным методом на проточном цитометре Cytomics FC 500 (Beckman Coulter, США) с применением моноклональных антител (Beckman Coulter, США), меченных FITC (изотиоцианат флуо-ресцеина), PE (фикоэритрин), PC5 (комплекс PE с цианином-5) и ECD (комплекс PE с техасским красным). Определение концентрации IgM, IgA, IgG в сыворотке крови проводили иммунотурбиди-метрическим методом с использованием биохимического анализатора Bio Majestry JCA-BM6010/C (Jeol, Япония). Определение циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) проводилось методом осаждения полиэтиленгликолем по методу Гашковой и соавт. (1978). Определение содержания IL-4 и IL-10 в сыворотке крови проводили методом иммуноферментного анализа (ЗАО «Вектор-Бест», Новосибирск, Россия) с использованием следующего оборудования: фотометра для микропланшетов Stat Fax-2200 (Awareness Technology, США), шейкера-термостата ST-3L (Elmi, Латвия), вошера PW40 (Bio-Rad Laboratories, США). В соответствии с инструкцией, чувствительность наборов составляла 0,4 пг/мл и 1,0 пг/мл, верхняя граница референтного интервал а 4 пг/мл и 31 пг/мл соответственно. Определение содержания общего IgE в сыворотке крови проводили методом иммуноферментного анализа (Siemens, Великобритания; чувствительность метода 1,0 МЕ/мл) с использованием иммуно-хемилюминесцентного анализатора Immulite 2000 (Siemens, США). Статистическая обработка данных проводилась общепринятыми методами с помощью пакета прикладных программ «Statistica 6.0» (StatSoft Inc., США). Для количественной характеристики показателей использовали среднее арифметическое значение и среднеквадратическое отклонение (М ± SD) (при нормальном распределении показателя), медиану c интерквартильным размахом (Me [Q1; Q3]) (при распределении показателя, отличающимся от нормального). Для сравнения абсолютных величин использовали критерий Стьюдента. Для сравнения частот в двух независимых группах объектов исследования применяли точный критерий Фишера или критерий х2 (в зависимости от численности группы). Различия показателей считали достоверными при уровне значимости р < 0,05. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Пациенты во всех группах были сопоставимы между собой по возрасту и полу. В группу обследованных вошли лица обоего пола: 46 женщин (70,8 %) и 19 мужчин (29,2 %). Показатели иммунного статуса всех обследованных пациентов представлены в таблице. В целом, количество лейкоцитов в группах пациентов находилось в пределах референтных значений, однако наблюдались некоторые раз-л ич ия . Так, H. pylori-инфекция ассоциировалась с более высоким количеством лейкоцитов (за счет более высоких абсолютных значений количества нейтрофилов, лимфоцитов и моноцитов) (данные не приводятся). Как относительные, так и абсолютные показатели содержания CD3+ клеток у Нр+ пациентов с ВЗВ ОЖКТ были значительно выше, чем в группе как с изолированной аллергопатологией, так и с заболеваниями ЖКТ без H. pylori-инфекции, что, по нашему мнению, является отражением активации Т-клеточного звена. Аналогичная закономерность сохранялась и при сравнении количества CD4+ и CD8+ клеток. При этом у Нр+ пациентов относительное содержание этих клеток было достоверно выше только в сравнении с группой пациентов с АР. Можно предположить, что в группе АР+Нр- имеет место тенденция к повышению количества хелперных и цитотоксических клеток, вероятно, за счет H. pylori-независимой этиологии заболевания. Показатели иммунного статуса пациентов с ВЗВОЖКТ Показатель Референтное значение № группы p < 0,05 I II III АР (n = 23) АР+Нр-(n = 20) АР+Нр+ (n = 22) Количество лейкоцитов, *109/л 3,8-8,6 5,30 ± 1,29 5,40 ± 1,28 7,60 ± 1,79 и" 0,0000 "■ш 0,0000 CD3+ % 60-85 69,20 ± 8,92 65,90 ± 10,01 81,30 ± 11,26 и" 0,0002 "■ш 0,0000 кл/мкл 1100-1900 1807,00 ± 292,23 1895,50 ± 491,18 2387,9 ± 519,8 и" 0,0000 "■ш 0,0031 CD4+ % 29-59 36,0 ± 5,7 38,40 ± 6,46 42,20 ± 6,34 и" 0,0013 кл/мкл 700-1400 977,70 ± 149,16 1012,60 ± 63,68 1234,20 ± 164,37 и" 0,0000 "■ш 0,0000 CD8+ % 19-46 30,80 ± 5,79 31,80 ± 6,32 35,10 ± 5,95 и" 0,0179 кл/мкл 500-1100 911,60 ± 107,68 882,1 ± 172,7 1040,40 ± 214,92 и" 0,0141 "■ш 0,0125 CD4+/CD8+ 1-1,5 1,20 ± 0,32 1,30 ± 0,46 1,20 ± 0,23 - CD16+ % 6-29 13,6 ± 4,99 11,30 ± 3,59 15,10 ± 4,42 "'ш0,0040 кл/мкл 200-600 389,50 ± 135,99 365,90 ± 97,66 336,7 ± 90,1 - CD22+ % 1-15 13,80 ± 6,57 10,9 ± 3,49 8,60 ± 3,51 и" 0,0018 "'ш 0,0309 кл/мкл 50-600 358,70 ± 95,76 313,90 ± 72,15 279,50 ± 62,12 и" 0,0021 IgM, г/л 0,5-2,5 1,20 ± 0,48 1,30 ± 0,21 1,30 ± 0,38 - IgA, г/л 0,7-3,5 1,50 ± 0,48 1,50 ± 0,41 1,40 ± 0,31 - IgG, г/л 7-22 11,90 ± 4,81 11,30 ± 3,44 10,90 ± 2,88 - ЦИК, усл. ед. <60 25,40 ± 10,65 24,4 ± 8,8 25,9 ± 9,7 - IL-4, пг/мл 0-4 4,2 [0, 10; 6, 10] 12,0 [0, 30; 18, 60] 1,0 [0, 01; 6, 70] - Частота значений IL-4 >пг/мл, % - 52,2 70,0 36,4 "'ш 0,0365 IL-10, пг/мл 0-31 33,7 [12, 80; 136, 90] 34,0 [4, 70; 40, 10] 16,7 [4, 60; 29, 00] - Частота значений IL-10 > 31 пг/мл, % - 56,5 60,0 22,7 и" 0,0331 "■ш 0,0265 Общий IgE, МЕ/мл 0-78 101,6 [54, 00; 327, 50] 100,0 [34, 80; 154, 00] 31,5 [15, 80; 98, 00] - Частота значений общего IgE >78 МЕ/мл, % - 52,2 70,0 31,8 "'ш 0,0294 Иммунорегуляторный индекс (коэффициент), определяемый по соотношению CD4+/CD8+, у пациентов с ВЗВОЖКТ вне зависимости от наличия H. pylori-инфекции был сопоставим между группами. Полученные данные свидетельствуют о том, что при H. pytor/'-неассоциированных ВЗВОЖКТ происходит снижение количества Т-клеток за счет возможной супрессии данного звена и/или ухода этих клеток в очаг воспаления, что согласуется с имеющимися научными данными [4]. Не исключено, что в группах Нр+ пациентов происходит дополнительная стимуляция иммунной системы за счет наличия бактериальной инфекции. Относительное содержание CD16+ клеток в периферической крови Нр+ пациентов с сочетанием АР и ВЗВОЖКТ было значительно выше, чем в группе Нр- лиц с аналогичной патологией. По данным литературы, CD16+ рецептор участвует в реализации антителозависимой цитотоксичности. Следовательно, увеличение численности CD16+ лимфоцитов и, как результат, реализация их цитотоксичности при обострении заболеваний верхнего отдела ЖКТ могут способствовать атрофии слизистой оболочки. Также известно, что наличие H. pylori-инфекции ассоциируется с риском развития онкологических заболеваний ЖКТ [1]. Полученные данные свидетельствуют о напряженности естественных противоопухолевых механизмов в группе Нр+ лиц. Что касается CD22+ клеток, то их относительное и абсолютное содержание у Нр+ пациентов было значительно ниже, чем у пациентов I группы. Вероятнее всего, причиной этому служит угнетение ^2-типа иммунного ответа у Нр+ пациентов за счет активации ^1-пути. По содержанию иммуноглобулинов классов G, M, A достоверных различий между группами выявлено не было, так же, как и по количеству ЦИК. Группа АР+Нр- оказалась сопоставима с группой пациентов с АР по уровню повышенных значений общего IgE (70,0 % vs 52,2 %, р = 0,3495). Существует вероятность, что в развитии воспалительных заболеваний ЖКТ у данных пациентов принимали участие IgE-зависимые механизмы. При этом у пациентов III группы отмечалась более низкая частота повышенных значений общего IgE по сравнению с Нр- пациентами с аналогичными патологиями (31,8 % vs 70,0 %, р = 0,0294). Группа АР+Нр- также оказалась сопоставима с I группой по уровню повышенных значений IL-4 и IL-10 (соответственно 70,0 % vs 52,2 %, р = 0,3495; 60.0 % vs 56,5 %, р = 0,8176) и характеризовалась более высокой частотой повышенных значений данных показателей по сравнению с группой АР+Нр+ (соответственно 70,0 % vs 36,4 %, р = 0,0365; 60.0 % vs 22,7 %, р = 0,0265). Вероятной причиной представленной зависимости может служить факт попадания ингаляционных аллергенов в ЖКТ пациентов группы АР+Нр- и, как следствие, развитие у данных пациентов аллергического гастрита. Возможно, что в группе АР+Нр+ развитие этого патологического процесса блокируется наличием H. pylori-инфекции [5]. ЗАКЛЮЧЕНИЕ Таким образом, ВЗВОЖКТ у больных с АР ассоциируются с различным характером иммунного ответа в зависимости от наличия H. pylori-инфекции. При ее наличии характерной особенностью является активация специфической и неспецифической цитотоксичности, в ее отсутствие -большая активность Th2- и Treg-клеток.

About the authors

N. S Iraklionova

FSBEI HE «Volgograd State Medical University» of Public Health Ministry of the Russian Federation

Email: ins2904@rambler.ru

E. B Belan

FSBEI HE «Volgograd State Medical University» of Public Health Ministry of the Russian Federation

S. V Turkina

FSBEI HE «Volgograd State Medical University» of Public Health Ministry of the Russian Federation

A. M Dotsenko

FSBEI HE «Volgograd State Medical University» of Public Health Ministry of the Russian Federation

E. L Rudobaba

FSBEI HE «Volgograd State Medical University» of Public Health Ministry of the Russian Federation

A. A Panina

FSBEI HE «Volgograd State Medical University» of Public Health Ministry of the Russian Federation

R. G Myazin

FSBEI HE «Volgograd State Medical University» of Public Health Ministry of the Russian Federation

References

Supplementary files