EFFICIENCY OF USING CELLULAR TECHNOLOGIES IN THE TREATMENT OF PATIENTS WITH DIFFUSE LIVER DISEASES

Full Text

Каждый год здравоохранение различных стран мира отмечает рост количества пациентов с диффузными заболевания печени, возникающими в результате воздействия различных факторов. Более 30 млн человек во всем мире страдают алкогольной болезнью печени, более 10 млн -неалкогольным стеатогепатитом [2], более 170 млн человек поставлен диагноз хронического вирусного гепатита С [5]. Для Российской Федерации алкоголизм является достаточно серьезной проблемой. Так, практически 10 млн человек в РФ поставлен диагноз алкоголизма. Алкогольная болезнь печени занимает достаточно большую долю среди всех диффузных заболеваний печени - порядка 30 % [6]. При этом от 8 до 20 % случаев при алкогольной болезни печени трансформируется в цирроз [3]. При исследованиях выявляется корреляционная связь между количеством алкоголя, употребляемым населением и уровнем смертности от цирроза печени [1]. Увеличивающееся количество пациентов с измененной функцией печени, дороговизна и низкая эффективность применяемой терапии способствует рассмотрению альтернативных методик лечения, одним из вариантов которой является трансплантация стволовых клеток [4, 7]. Ниже мы представляем результаты нашего исследования по оценке эффективности использования аутологичных мезенхимальных стволовых клеток у пациентов с диффузными заболеваниями печени алкогольной этиологии. ЦЕЛЬ РАБОТЫ Оценка эффективности использования клеточных технологий в лечении пациентов с диффузными заболеваниями печени. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ Было выделено 2 группы. Условиями включения в данные группы были следующие характеристики: возраст от 30 до 60 лет, изменение биохимических показателей крови, алкогольная этиология изменений печени (при этом необходимым условием был отказ от алкоголя в течении 5 лет и более), отсутствие асцита, по данным эластографии печени F3-4. В основную и контрольную группу вошло по 20 человек. Средний возраст в контрольной группе составил (49 ± 5,5) года, в основной - (52,6 ± 3,9) года (р = 0,1). В контрольной группе было 17 мужчин и 3 женщины; в основной группа контроля ■ основная группа до лечения 1мес Змее бмес Рис. 1. Динамика уровня тромбоцитов (109/л) в контрольной и основной группах через 1,3 и 6 мес. после начала лечения 18 мужчин и 2 женщины. В основной группе в качестве лечения применялись клеточные технологии в виде непосредственного введения в артериальное или венозное русло печени аутологичных мезенхимальных стволовых клеток в количестве в среднем 25-30 млн. В контрольной группе в качестве терапии применяли L-орнитин^-аспартат по 1 пакетику 3 раза в день в течение 30 дней. Через 1, 3 и 6 мес. после лечения выполнялись контрольные анализы крови, оценка уровня энцефалопатии и изменения субъективных ощущений пациента. Через 1, 3, 6 и 12 мес. после лечения выполнялась эластография печени и лидокаино-вый тест. Стадии энцефалопатии оценивались по С.Д. Подымовой (2005). Для оценки энцефалопатии использовался тест связи чисел, тест линий. Для субъективной оценки состояния пациенты выполняли тест субъективной комфортности (А.Б. Леонов). Статистическая обработка данных проводилась с использованием пакета программ Statistica 10.0 и Microsoft Excel 2010. Статистически значимыми считались показатели р < 0,001. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ В клиническом анализе крови, выполненном до начала лечения, в обеих группах отмечалась тромбоцитопения (табл. 1). Достоверных различий между двумя группами до начала терапии не выявлено (р = 0,569). Таблица 1 Уровень тромбоцитов (109/л) в контрольной и основной группах до начала лечения ГО с с £ |_ Valid N Mean 5 а ■d w Е 3 Е с 5 Maximum Median Lower Quartile Upper Quartile Кон троль ная 20 174,74 37,17 118,7 218,4 184,85 138,65 206,6 Основ ная 20 165,73 59,63 69 251,2 159,05 108,4 225,5 На рис. 1 представлена динамика уровня тромбоцитов в обеих группах. Начиная с третьего месяца, в основной группе отмечается рост уровня тромбоцитов. Через 6 мес. после начала лечения отмечается стойкое увеличение уровня тромбоцитов в основной группе и сохранение показателей в пределах нормальных значений. В контрольной группе нормализации показателей не отмечено. Сравнение динамики роста тромбоцитов в обеих группах статистически достоверно (р = 0,0000). В обеих группах до начала лечения у пациентов зафиксировано повышение уровня печеночных ферментов (табл. 2-5). Таблица 2 Уровень АЛТ (Е/л) до начала лечения в группе контроля и в основной группе (норма АЛТ 0-35 Е/л)* ГО с с £ 1_ Valid N Mean 5 а ■d 55 Е 3 Е ini iM Maximum Median Lower Quartile Upper Quartile Контрольная 20 63,87 6,18 53,7 72,9 64,8 58,55 68,8 Основная 20 65,55 4,83 55,4 72,9 66,05 63 69,05 •Достоверных различий между группами до начала лечения не выявлено (р = 0,345). Таблица 5 Уровень ГГТП (Е/л) до начала лечения в группе контроля и в основной группе (норма 0-40 Е/л)* Г руппа Valid N Mean 5 a ■d 55 m u E ini iM Maximum Median Lower Quartile Upper Quartile Кон троль ная 20 122,39 5,96 112,5 135,8 121,9 118,5 126 Основ ная 20 118,32 7,11 104,7 131,4 118,95 113,9 122,5 •Достоверных различий между группами до начала лечения не выявлено (р = 0,06). Динамика уровня печеночных ферментов отражена на рис. 2-5. ДИНАМИКАУРОВЕНЯ АЛТ (Е/Л) группа контроля ■ основная группа Таблица 3 Уровень АСТ (Е/л) до начала лечения в группе контроля и в основной группе (норма АСТ 0-32 Е/л)* Рис. 3. Динамика средних значений уровня АСТ (Е/л) в контрольной и основной группах через 1, 3 и 6 мес. после начала лечения Г руппа Valid N Mean 5 a ■d 55 m u E ini iM Maximum Median Lower Quartile Upper Quartile Контрольная 20 50,35 5,86 40 61,1 50,25 45,85 55,9 Основная 20 53,80 3,84 46,8 64,3 54 51,5 56,05 •Достоверных различий между группами до начала лечения не выявлено (р = 0,034). Таблица 4 Уровень щелочной фосфатазы (Е/л) до начала лечения в группе контроля и в основной группе (норма 0-120 Е/л)* Рис. 4. Динамика средних значений уровня щелочной фосфатазы (Е/л) в контрольной и основной группах через 1, 3 и 6 мес. после начала лечения Г руппа Valid N Mean 5 a ■d 55 m u E ini iM Maximum Median Lower Quartile Upper Quartile Кон троль ная 20 218,17 13,22 196,4 237,6 218,45 204,95 229,55 Основ ная 20 228,64 13,43 201,2 248,3 232,85 221,55 237,55 •Достоверных различий между группами до начала лечения не выявлено (р = 0,031). Рис. 2. Динамика средних значений уровня АЛТ (Е/л) в контрол ь ной и основной группах через 1, 3 и 6 мес. после начала лечения ДИНАМИКА УРОВНЯ ГГТП (Е/Л) группа контроля ■ основная группа [ИЗ JuL л ■ 1 [iiJI 1“^ 1 Шя Шшя ш ш 1 мес 3 мес 6 мес Рис. 5. Динамика средних значений уровня ГГТП (Е/л) в контрольной и основной группах через 1, 3 и 6 мес. после начала лечения Как видно из вышепредставленных диаграмм, в основной группе уже в течение первого месяца отмечалось снижение значений уровня печеночных ферментов, которые приближались к нормальным. Помимо снижения уровня печеночных ферментов, в основной группе нормальные показатели сохраняются через 3 и 6 мес. после лечения, тогда как в группе контроля изначально отмечалось снижения показателей, а к 6 мес. после терапии уровень показателей начинает расти. И также необходимо отметить, что нормальные показатели в группе контроля достигались лишь в единичных случаях. Как при сравнении показателей обеих групп, так и при сравнении динамических изменений показателей выявлены достоверно значимые различия (р = 0,0000). Также всем пациентам обеих групп была выполнена эластография печени до лечения и через 1, 3, 6 и 12 мес. после терапии. На рис. 6 представлена динамика показателей. Динамика средних значений показателей эластографии (F, кПа) в группе исследования и в группе контроля f 1111 до лечения через 1 через 3 через б через 12 месяц после месяца месяцев месяцев лечения после после после лечения лечения лечения ■ группа исследования группа контроля к и и и к о и и I 2 2 2 ! 2 2 2 з- тч еп т тН ГО IX) «ч сГ нет энцефалопатии субклиническая стадия контрольная группа ■ основная группа Рис. 8. Динамика стадии энцефалопатии у пациентов основной и контрольных групп Рис. 6. Динамика средних значений показателей эластографии печени в основной и контрольной группах Как видно по результатам диаграммы, в основной группе отмечается снижение уровня показателей по сравнению с контрольной группой. Однако достоверно значимых различий между показателями групп не выявлено, как до лечения, так и через 1, 3, 6 и 12 мес. после лечения (р = 0,432; р = 0,431; р = 0,431; р = 0,854; р = 0,814 соответственно). До начала лечения и на фоне терапии пациенты проходили тесты для оценки состояния субъективного комфорта и для выявления стадии энцефалопатии. Динамика изменения состояния субъективного комфорта отражена на рис. 7. Динамика уровня оценки субъективного комфорта низкии уровень сниженный уровень приемлимыи высокии уровень субъективного субъективного уровень субъективного комфорта комфорта субъективного комфорта комфорта контрольная группа ■ основная группа Рис. 7. Динамика уровня оценки состояния субъективного комфорта у пациентов основной и контрольных групп Как видно на представленной диаграмме, основные улучшения самочувствия начинают проявляться через 3 мес. после лечения. Через 6 мес. п осле начала лечения в основной группе отсутствует низкий и сниженный уровень субъективного ко мфорта. Через 6 мес. от начала лечения 60 % основной группы оценивали свое состояние на приемлемом уровне субъективного комфорта, 40 % - на уровне высоком уровне. Тогда как в контрольной группе через 6 мес. после лечения 45 % пациентов оценивали свое состояние на низком уровне субъективного комфорта, 35 % - на сни-женн о м уровне и 20 % - на приемлемом уровне субъективного комфорта (р = 0,0000). Улучшения отмечаются как в основной, так и в контрольной группе. Однако через 6 мес. после лечения наиболее значимые изменения отмечаются в основной группе, где у 85 % пациентов нет проявлений энцефалопатии, у 10 % - субклиническая стадия и у 5 % - 1-я стадия. Тогда как в контрольной группе у 55 % нет проявлений энцефалопатии, у 35 % - субклиническая стадия и у 10 % - 1-я стадия (p = 0,00096), рис. 8. Динамика изменений стадии энцефалопатии Для оценки функционального состояния печени до начала лечения и через 1, 3 и 6 месяцев после лечения выполнялся лидокаиновый тест (MEGX), рис. 9. Рис. 9. Динамика показателей лидокаинового теста (нгр/мл) в группе контроля и в основной группе В основной группе отмечено значительное улучшение функции печени. Через 6 месяцев после лечения в основной группе нет пациентов со значительным снижением функции печени (до лечения 30 % основной группы составляли подобные пациенты); умеренное снижение функции отмечалось у 30 % пациентов (до лечения - 55 %); нормальная функция у 70 % (до лечения - 15 %). В контрольной группе количество пациентов со значительным снижением функции снизилось на 5 % (с 35 до 30 %); количество пациентов с умеренным снижением функции осталось без изменений - 45 %; количество пациентов с нормальной функцией увеличилось на 5 % (с 20 до 25 %). Достоверные различия между основной и контрольной группами подтверждены статистически (р = 0,0005). ЗАКЛЮЧЕНИЕ На основании проведенного исследования можно сказать, что введение аутологичных мезенхимальных стволовых клеток непосредственно в сосудистое русло печени с целью улучшения функции печени оказывает более значимое влияние по сравнению с использованием L-орнитин-L-аспартата, что проявляется в следующем: 1. Нормализация уровня тромбоцитов, начиная с третьего месяца после использования клеточных технологий. 2. Нормализация уровня печеночных ферментов, начиная с 1-го месяца после использования клеточных технологий. А также длительное и стойкое удержание положительного эффекта в отличие от контрольной группы. 3. Фиксация стабильного улучшения функционального состояния печени через 6 мес. после лечения, подтвержденного MEGX. Нормализация функции печени у 70 % пациентов основной группы и у 25 % контрольной. 4. Регрессия проявлений, соответствующих энцефалопатии, у 65 % пациентов основной группы и 10 % пациентов контрольной. 5. Субъективное улучшение самочувствия, которое более выражено в основной группе. Так, через 6 мес. после лечения в основной группе отсутствовали пациенты, которые оценивали свое состояние на низком и сниженном уровне субъективного комфорта. Тогда как в контрольной группе 45 и 35 % пациентов оценивали свое состояние на низком и сниженном уровне субъективного комфорта соответственно. И в контрольной группе отсутствовали пациенты, которые оценивали бы свое состояние на высоком уровне субъективного комфорта, тогда как в основной группе таких пациентов было 40 %.

About the authors

I. E Kotkas

FSBEI HE «Northwestern State Medical University named after I.I. Mechnikov» of Public Health Ministry of the Russian Federation

Email: inna.kotkas@yandex.ru

N. I Enukashvili

FSBEI HE «Northwestern State Medical University named after I.I. Mechnikov» of Public Health Ministry of the Russian Federation

Sh. M Asadulaev

FSBEI HE «Northwestern State Medical University named after I.I. Mechnikov» of Public Health Ministry of the Russian Federation

References

Supplementary files