THE INFLUENCE OF ALIMENTARY HYPOMAGNESAEMIA ON THE GENERAL CONDITION OF LACTATING FEMALE RATS AND POSTNATAL STATUS OF THEIR OFFSPRING

Full Text

Magnesium deficiency, magnesium imbalance, magnesium salt-deficient diet, female rats, lactation, newborn rats, physical development of the offspring. Среди патологий элементного статуса у женщин дефицит магния занимает лидирующую позицию [2]. Дисбаланс магния в организме может быть вызван нарушениями питания, хроническим стрессом, заболеваниями желудочно-кишечного тракта, сердечно-сосудистой системы, а также нерациональным использованием фармакологических препаратов [2, 11, 13]. Дефицит магния у женщин может вызывать нарушения плацен-тации [1, 5, 14], преждевременные роды и быть причиной угрозы прерывания беременности [9, 12]. Несмотря на многочисленные исследования, тема дефицита магния во время беременности и его влияния на развитие потомства остается актуальной. ЦЕЛЬ РАБОТЫ Изучить влияние экспериментальной гипомагнезиемии на общее состояние лактирующих крыс-самок и на постнатальное развитие их потомства. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ Эксперименты проведены на 50 виргинных крысах-самках 3,5-4-месячного возраста, доставленных из пи томника государственного предприятия НИИГТиП (г. Волгоград) и прошедших 2-недельный карантин в виварии НИИ фармакологии ВолгГМУ. Содержание животных в период проведения исследований соответствовало правилам лабораторной практики РФ [ГОСТ Р-53434-2009]. Исследования проведены в два этапа. На первом этапе крысы-самки были расформированы на 2 равные группы по 25 особей: первая группа, интактный контроль, находилась на полноценном пищевом рационе РФ [ГОСТ Р-53434-2009]; вторая группа, опытная, получала диету без солей магния в течение 2 месяцев [4]. В данный период вели наблюдения за общим состоянием самок и динамикой прироста массы тела. По окончании 2 месяцев у крыс контрольной и опытной групп измеряли уровень магния в плазме крови и эритроцитах [6, 16]. Критерием развития гипомагнезиемии считали снижение концентрации магния ниже 1,4 ммоль/л в эритроцитах и ниже 0,7 ммоль/л в плазме [3, 8]. На втором этапе эксперимента проводили спаривание крыс-самок контрольной и опытной групп с ин-тактными самцами в соотношении 2 : 1. Первым днем беременности считали день обнаружения сперматозоидов в вагинальных мазках, при этом самок отсаживали Выпуск 3 (63). 2017 113 ЩШгорСз [ЩсмеТКЩ в клетки по одной особи. В наблюдениях за ними отмечали общее состояние, массу тела, количество разродившихся, дату родов, размер помета, количество живых и мертворожденных крысят. По отношению количества разродившихся крыс к количеству спарившихся рассчитывали индекс беременности. По отношению общего количества крысят к количеству пометов самок рассчитывали среднее количество крысят на одну самку. В период наблюдений за лактирующими самками отмечали их общее состояние и отношение к потомству. Наблюдения за потомством проводили до их 2-месячного возраста. При этом до тридцатидневного возраста крысята находились с самками, затем были отсажены по половым признакам. У потомства крыс оценивали общее состояние, динамику прироста массы тела, выживаемость и физическое развитие [15]. Статистическую обработку результатов проводили в программе Statistica 6.0. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ По результатам исследований первого этапа установлено, что содержание крыс самок на диете без солей магния в течение 2 месяцев способствовало постепенному изменению в их общем состоянии. У этих самок наблюдалось потускнение шерстного покрова, гиперемия открытых участков тела, появление хаотичных передвижений по клетке и снижение динамики прироста массы тела. По окончании 2 месяцев содержания самок на без-магниевой диете прирост массы тела у самок в опытной группе составил 19,7 % р < 0,05), тогда как в контрольной 25,1 % (р < 0,05) по отношению к исходным значениям. При этом уровень магния в крови у крыс опытной группы снизился в плазме на 51,4 % (0,69 ± 0,03) Ммоль/л, а в эритроцитах - на 25,7 % (1,33 ± 0,03) Ммоль/л по отношению к контролю, что свидетельствовало о развитии гипо-магнезиемии средней степени тяжести [10]. В этой связи, на 2-м этапе исследований были проанализированы результаты спаривания контрольной и опытной групп крыс самок с интактными самцами, проведена оценка состояния беременных и разродившихся самок и общее состояние их потомства. В эксперимент было отобрано по 20 спарившихся самок из каждой группы, в вагинальных мазках которых были обнаружены сперматозоиды. В наблюдениях за этими самками не обнаружено межгруппо-вых существенных различий в их общем состоянии, тогда как по результатам оценки динамики прироста массы тела выявлено, что на 20-й день беременности прирост массы тела у самок в опытной группе составил 15,8 % (р < 0,01), а в контрольной - 30,7 % (р < 0,001) (табл. 1). В наблюдениях за исследуемыми самками отмечено, что роды наступали в опытной и контрольной группах на 21-22 день, но у самок в опытной группе длились дольше, при этом был зарегистрирован единичный случай гибели самки в родах. Выявлено, что из 20 спарившихся самок в опытной группе разродилось 13 самок, Таблица 1 Исследование динамика массы тела крыс в периоды беременности и лактации (г, М ± m) Исследования в период беременности Периоды измерения и исследуемые показатели Контрольная группа (обычный рацион) (n = 20) Опытная группа (безмагниевая диета) (n = 20) 1 день 272,10 ± 6,06 235,90 ± 8,15 7 дней 290,1 ± 6,78 (6,6 %) 242,60 ± 3,66 (2,8 %) 14 дней 316,80 ± 7,34*** (16,4 %) 255,60 ± 4,87* (8,3 %) 20 дней 355,60 ± 10,82*** (30,7 %) 273,20 ± 7,84** (15,8 %) Индекс беременности 0,85 0,65 (-23,5 %) Среднее количество крысят на самку 9,40 ± 0,51 6,5 ± 0,28 (-30,8 %) Исследования в период лактации Периоды измерения Контрольная группа (обычный рацион) (n = 17) Опытная группа (безмагниевая диета) (n = 13) 1 после родов 290,40 ± 8,08 251,80 ± 7,43 7 дней 288,60 ± 7,33 (-0,6 %) 249,40 ± 6,74 (-1,0 %) 14 дней 291,40 ± 7,57 (0,3 %) 233,90 ± 7,74 (-7,1 %) 20 дней 286,70 ± 5,83 (-1,5 %) 226,00 ± 6,74* (-10,3 %) *p < 0,05; **p < 0,01; ***p < 0,001 различия достоверны по сравнению к исходным данным; в ( ) указан % по отношению к исходным данным. 114 Выпуск 3 (63). 2017 ©зеторСз [gofiïijf3 тогда как из 20 самок в контрольной группе - 17 самок. В этой связи индекс беременности в опытной группе составил 0,65, против 0,85 в контроле. При этом количество крысят в контрольной группе составило 151 особь (9,48 крысят на одну самку), а в опытной группе - 84 (6,5 крысят на одну самку). При визуальном осмотре пометов, полученных от самок с гипо-магнезиемией, было обнаружено, что у крысят опытной группы кожные покровы были гиперемированы. В период наблюдений у самок в опытной группе после родов выявлялись как положительные, так и отрицательные эффекты по отношени ю их к потомству. К положительным эффектам можно отнести то, что эти самки длительное время пребывали со своим потомством и проявляли активную заботу о нем. К негативным эффектам можно отнести то, что у самок опытной группы не было постоянного места гнездования, в этой связи у них отмечались хаотичные передвижения по клетке с переносом своих крысят и частым их перекладыванием. На вторые сутки у одной самки опытной группы был зарегистрирован случай каннибализма и полное уничтожение потомства. На десятый послеродовый день 3 самки загрызли свое потомство. Возможно, данное поведение у самок в опытной группе по отношению к своему потомству могло быть связано с их неустойчивым эмоциональным состоянием [10] и повышенной болевой чувствительностью [7], которая могла возникнуть при вскармливании крысят, или снижением количества молока и его качества. Измерение массы (таблица 1) тела у самок в опытной группе по окончании лактации позволило выявить ее достоверное снижение на 10,3 % (р < 0,05) по отношению к исходным значениям. В период наблюдений за потомством, до двухмесячного возраста, была зарегистрирована спонтанная гибель крысят, рожденных от самок с гипомагнезие-мий. В контрольной группе гибель крысят отмечалась в период первых двух суток. Ранняя неонатальная смертность крысят в обеих группах наблюдалась в первые 48 часов (таблица 2) Таблица2 Динамика гибели крысят, полученных от самок с низким уровнем магния в крови Периоды наблюдений (дни) Экспериментальные группы контрольная группа (обычный рацион) (n = 151) опытная группа (безмагниевая диета) (n = 84) 1-2 7 12 3-13 0 29 14-20 0 4 21-29 0 2 30-44 0 8 45-60 0 3 Общая гибель крысят 7 58 Количество выживших крысят (%) 95,4 34,5 В данный период наблюдений было зарегистрировано 7 погибших крысят в контрольной группе и 12 особей в опытной. Определить, погибли данные крысята после родов или были изначально мертворожденными, не представилось возможным. В дальнейшем, в опытной группе наибольшая гибель - 29 особей крысят -была зарегистрирована с 7-20 дня молочного вскармливания. В период перехода крысят опытной группы на дефинитивное питание погибло всего 2 особи. В опытной группе, в период самостоятельного питания, было зарегистрировано 3 гибели крысят. Таким образом, за весь период наблюдений за пометами крыс, общая гибель составила 58 особей в опытной группе, что соответствовало 69 % от общего количества родившихся крысят, тогда как в контроле данный показатель составил 7 особей, что соответствовало 4,6 % от общего количества. По результатам оценки динамики прироста массы тела у потомства крыс в опытной группе отмечено ее снижение во все периоды наблюдений по сравнению с контрольной группой. Динамика массы тела у крысят в опытной группе на 4-й и 21-й дни жизни была ниже значений контрольной группы на 12,5 % (р < 0,001) и 15,6 % (р < 0,001) соответственно (таблица 3). В наблюдениях за крысятами, перешедшими на самостоятельное питание с 1 -го по 2-й месяцы исследований, прибавка массы тела также была сниженной на 24,8 % (р < 0,001) и 44,1 % (р < 0,001) соответственно по отношению к контрольной группе. Взвешивание крысят по окончанию второго месяца их жизни позволило обнаружить, что их масса тела увеличилась в 6 раз (50,7 ± 1,58) г по отношению к первому дню жизни, тогда как в контроле в 12,6 раз (116,6 ± 1,22) г. Таблица 3 Динамика массы тела крысят, полученных от самок с низким уровнем магния в крови (г, М ± m) Время измерений Экспериментальные группы контрольная группа (обычный рацион) (n = 151) опытная группа (безмагниевая диета) (n = 84) 4 дня 8,60 ± 0,14 7,00 ± 0,13*** (-18,6 %) 21 день 26,20 ± 0,36*** (206,3 %) 22,10 ± 0,62*** (218,2 %) 1 месяц 44,40 ± 0,84*** (418,6 %) 33,40 ± 1,31*** (380,1 %) 1,5 месяца 74,80 ± 1,33*** (773,3 %) 41,80 ± 1,81*** (501,2 %) 2 месяца 116,60 ± 1,22*** (1261,2 %) 50,70 ± 1,58*** (628,6 %) ***p < 0,001 различия достоверны по сравнению к исходным данным; в ( ) указан % по отношению к исходным данным. Выпуск 3 (63). 2017 115 ЩШгорСз [ЩсмеТКЩ По результатам наблюдений за физическим развитием в опытной группе у потомства по сравнению с контролем обнаружено отставание в сроках отлипания ушной раковины на 0,1 дня (р < 0,05), обрастания шерстным покровом - на 1,2 дня (р < 0,001), прорезания резцов - на 1,2 дня (р < 0,001), открытия глаз -на 1 день (р < 0,001), открытия влагалища - на 8,2 дня (р < 0,001) и опущения семенников - на 8,7 дня (р < 0,001) по отношению к контрольной группе. При этом сроки физического развития крысят в опытной группе укладывались в рамки физиологической нормы. ЗАКЛЮЧЕНИЕ На основании полученных результатов в ходе проведения исследований можно сделать заключение, что содержание крыс самок в течение 2 месяцев на диете без солей магния приводит к снижению уровня данного нутриента в крови. При этом у самок крыс дефицит магния в период беременности и лактации негативно отражается на состоянии их потомства и снижает их жизнеспособность и замедляет сроки формирования физического развития. ЛИТЕРАТУРА

About the authors

A. A. Spasov

Volgograd Medical Scientific Center

L. I. Bugaeva

Volgograd Medical Scientific Center

S. A. Lebedev

Research Institute of Pharmacology of the VolgSMU

Email: lebedeva.farm@mail.ru

T. M. Korzhova

Research Institute of Pharmacology of the VolgSMU

A. Y. Getmanenko

Research Institute of Pharmacology of the VolgSMU

References

Supplementary files