КРИСТАЛЛОГРАФИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ РОТОВОЙ ЖИДКОСТИ У ПАЦИЕНТОВ С ПОСТПРОТЕТИЧЕСКИМИ ОСЛОЖНЕНИЯМИ ПРИ ДЕНТАЛЬНОЙ ИМПЛАНТАЦИИ В ДИНАМИКЕ ЛЕЧЕНИЯ

Полный текст

Оценка локальных кристаллических структур является информативным критерием в оценке системной организации биологических жидкостей, в частности ротовой жидкости [6]. Наиболее актуальным методом визуализации структурнопространственной организации ротовой жидкости является кристаллографическое исследование, сущность которого заключается в морфологическом исследовании с использованием световой и поляризационной микроскопии высушенной капли ротовой жидкости - фации [1]. Метод клиновидной дегидратации - основной способ исследования самоорганизации биологических жидкостей [1, 9]. В настоящее время нет ijcaeTDpfe ©©ffiTrf 0Щ>: методов, позволяющих наблюдать системную структуру биожидкостей в жидком состоянии [7]. Для того чтобы данная структура была доступна наблюдению, биожидкость необходимо перевести в твердую фазу [8]. Достигается это путем высушивания. В наших исследованиях мы использовали принцип высушивания как технически простой, экономичный и формирующий устойчивый объект, удобный для исследования. Мы использовали метод клиновидной дегидратации, так как клиновидная форма высыхающей биожидкости является важнейшим моментом системной самоорганизации растворов [4, 5]. Фазовый переход биологической жидкости из высокодинамического состояния в твердое организует определенный статический порядок, который становится наблюдаемым [2]. Это проявляется в характерных для каждого вида структурах биожидкости [3]. Данные структуры одновременно несут в себе черты, отражающие индивидуальные особенности организма, а также особенности, характеризующие соответствующие патологические нарушения. ЦЕЛЬ РАБОТЫ Провести сравнительный кристаллографический анализ ротовой жидкости у пациентов с пост-протетическими осложнениями при дентальной имплантации в динамике лечения. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ Проведенное исследование включало диагностику и наблюдение 120 пациентов с постпротетическими осложнениями при дентальной имплантации до начала и в динамике лечения. В соответствии с критериями включения и исключения методом простой рандомизации пациенты, в зависимости от методов фармакотерапии были разделены на 4 равные группы I группа - 30 пациентов, которым проводилось традиционное лечение постпротетических осложнений. II группа - 30 пациентов, в дополнение к традиционной терапии выполнялась озоно-терапия. III группа - 30 человек, которым на фоне традиционной терапии проводилась транскраниальная электростимуляция. IV группа - лечение 30 человек, с включением в схему лечения которых комбинации озонотерапии и транскраниальной электростимуляции. В качестве материала для исследования использовались ротовая жидкость (слюна). Биологический материал подвергался дегидратации по шесть капель каждого образца (по 2 мкл). В течение 30 мин при температуре 370 °С. Полученные фации биологической жидкости полости рта исследовались при помощи микроскопа (Carl Zeiss, Jena) с видеоокуляром DCM 51 О (5 Мп) при конечном увеличении от 34 до 164 раз. Проводился качественный анализ - описание общей кристаллографической картины, выявление маркеров патологии. Определяли характер организации структуры соли и распределения белкового вещества в зависимости от концентрации белка в биологической жидкости (слюне). Качественный анализ изображений кристаллограмм слюны проводили в ближайшие (до лечения, 3 дня, 7 дней и 14 дней) сроки наблюдения и лечения. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Кристаллограмма лиц контрольной группы характеризовалась четким зонированием на центральную и периферическую части. В центральной зоне фации локализовались минеральные вещества, формирующие единичные кристаллы и дендриты, расположенные под острым углом по отношению друг к другу, организующимися в виде древовидных и папортникообразных фигур с ответвлениями I и II порядка (рис. 1). Рис. 1. Центральная зона фации ротовой жидкости контрольной группы. Нативный препарат. Ув. *400 Краевая зона фации ротовой жидкости у лиц контрольной группы была представлена белковой составляющей, формирующей фигуру «крылья бабочки» с множественными взаимопереходами (рис. 2). Рис. 2. Краевая зона фации ротовой жидкости контрольной группы. Нативный препарат. Ув. *400 iliosnpCs При кристаллографическом исследовании ротовой жидкости у пациентов I группы до лечения отсутствовало разделение фации на центральную и краевую зоны с наличием трещин в местах перехода. Центральная часть была заполнена кристаллами древовидной формы с 1-2 ветвлениями, между которыми располагались патологические кристаллы неправильной формы, преимущественно по периметру краевой зоны. Стоит отметить, что в центральной части минеральной зоны кристаллы имели фрактальный характер. В краевой зоне определялось небольшое количество хаотически расположенных тонких коротких трещин и единичных кристаллов неправильной формы. При этом ширина периферической части фаций ротовой жидкости была неодинаковой с наличием участков сужения (рис. 3). Рис. 3. Фация ротовой жидкости у пациентов I группы до лечения. Нативный препарат. Ув. *200 В I группе при использовании традиционной терапии на протяжении 3 дней в фациях ротовой жидкости значительных отличий обнаружено не было. В центральной зоне располагались неправильной формы кристаллы, которые утратили свою дендритную форму и не имели ветвлений. Древовидные кристаллы имели линейный характер роста с наличием 1-2 разветвлений, располагались между центральной и периферической фракциями фаций с наличием мелких трещин в местах перехода. Патологические кристаллы встречались на всем поле зрения, однако более крупные формы встречались непосредственно в зоне перехода между фракциями. Периферическая зона с наличием мелких трещин. При изучении фаций ротовой жидкости у пациентов I группы, получавших традиционное лечение на протяжении 7 и 14 дней, было обнаружено отсутствие четкой зональности с расширением периферической зоны и наличием патологических кристаллов неправильной формы по всему полю зрения. В местах перехода определялись небольшие трещины, которые были ярко выражены в местах соединения и формировали кристаллические структуры в виде папоротника. В центральной зоне фации часть кристаллов была разрушена, определялось уменьшение количества древовидных кристаллов, которые имели линейный вид. Морфологическая картина фаций свидетельствовала о нарушении структурной организации ротовой жидкости, характеризующаяся отсутствием разделения на зоны. При этом центральная часть была заполнена белковыми конгломератами различной формы, среди которых определялись патологические кристаллы темного цвета. На периферии количество этих кристаллов было значительно меньше. Встречались небольшие белковые образования по типу бляшек. У пациентов II группы, которым в качестве лечения дополнительно проводили озонотерапию, при кристаллографии в период до лечения определялись нарушения структурно-пространственной организации ротовой жидкости. Так, в центральной зоне располагались кристаллы линейного типа строения, имеющие одно ветвление, часть их которых была разрушена и локализовалась ближе к периферии фаций. Однако четкого разделения на зоны не было. В области перехода определялись единичные патологические кристаллы вытянутой формы. Также визуализировалась широкая краевая зона с элементами нарушения целостности структуры (рис. 4). Рис. 4. Фация ротовой жидкости, до лечения. II группа. Нативный препарат. Ув. *200 При лечении с применением озонотерапии в этой группе кристаллография не выявила значительных изменений. Центральная часть фаций была заполнена оптически плотными белковыми конгломератами округлой формы. При этом встречались единичные патологические кристаллы, расположенные в центре капли. Краевая зона характеризовалась наличием «денатурации белка», что являлось маркером отсутствия терапевтического эффекта с точки зрения нормализации пространстве нной структуры. Лечение в течение 1-2 недель Выпуск 3 (75). 2020 99 iliosnpCs во II группе не выявило значительных отличий морфологической картины фаций ротовой жидкости, которая характеризовалась отсутствием четкой границы между фракциями и наличием патологических кристаллов по всему полю зрения. В центральной части определялся процесс фолдинга белков в виде локальных закристаллизованных дефектных структур, которые имели вид тонких спиралей. В III группе у пациентов до лечения в фациях ротовой жидкости определялись признаки нарушения кристаллической организации. Граница между фракциями была не четкой, визуализировалась широкая краевая зона с элементами разрушенных структур, в центральной части определялось большое количество патологических кристаллов, лишенных определенной структуры и организации. В промежуточной зоне определялись единичные кристаллы древовидной формы, большинство из которых было разрушено (рис. 5). Рис. 5. Фация ротовой жидкости, до лечения. III группа. Нативный препарат. Ув. *200 Аналогичная картина наблюдалась при однократном применении транскраниальной электростимуляции (ТЭС). Однако при лечении с использованием транскраниальной электростимуляции уже через 3 дня зарегистрированы кристаллографические изменения фаций, выражающиеся в уменьшении периферической зоны, где непосредственно у края препарата определялось скопление мелкозернистых аморфных структур. Центральную часть фации занимали крупные структуры в виде бляшек, вокруг которые при увеличении на 400 определялись тонкие трещины. Единичные дендритные кристаллы не имели ветвлений и располагались преимущественно в местах перехода. При увеличении сроков лечения до 7 дней были обнаружены признаки фолдинга патологических белков, которые в виде тонких спиралей заполняли центральную часть фаций ротовой жидкости. При этом в промежуточной зоне количество кристаллов дендритной формы возросло, часть из которых имела ветвления первого порядка. Незначительное расширение краевой зоны сопровождалось появлением линий Вальнера, которые определялись по всей окружности фаций. Аналогичная картина наблюдалась при исследовании фаций на фоне двухнедельного лечения. Однако количество патологических кристаллов было значительно меньше, чем в данной группе на предыдущем сроке. Наряду с дендритными формами, имеющими ветвления первого порядка, определялись единичные папоротникообразные кристаллы, расположенные в промежуточной зоне фаций. В местах перехода зафиксированы тонкие короткие трещины. Кристаллография фаций ротовой жидкости в IV группе до лечения выявила отсутствие четкой структурной организации слюной жидкости, выражающееся в отсутствии границ между фракциями (рис. 6). Рис. 6. Фация ротовой жидкости, до лечения. IV группа. Нативный препарат. Ув. *200 Центральную часть заполняли аморфные структуры различной формы и дендритные кристаллы, часть из которых была разрушена. По всему полю зрения определялись патологические кристаллы в виде темных бесформенных структур. Широкая краевая зона включала элементы патологических белков. При лечении пациентов IV группы с сочетанным применением озонотерапии и транскраниальной электростимуляции, в течение 3 суток в это й группе наблюдались признаки кристаллизации, которая характеризовалась появлением кристаллов средних размеров папоротникообразной формы, имеющих одно или два ветвления. Располагались такие кристаллы преимущественно ijcaeTDpfe Igsrnfff3 ВЩ* в промежуточной зоне, где в местах перехода определялись тонкие трещины. При сочетанном применении озонотерапии и ТЭС в течение 7 суток фации ротовой жидкости не имели достоверных различий. В центральной части фаций было отмечено появление множества мелких белковых агрегаций в виде спирально скрученных пленок, между которыми определялись единичные дендритные кристаллы, не имеющие ветвлений. Краевая зона представлялась аморфной или плотной сетчатой структурой трещин (рис. 7). Рис. 7. Фация ротовой жидкости, IV группа с сочетанным применением озонотерапии и ТЭС, 7 сут. Нативный препарат. Ув. *200 Кристаллография фаций у пациентов IV группы с сочетанным применением озонотерапии и транскраниальной электростимуляции длительностью 2 недели представлена на рис. 8. Рис. 8. Фация ротовой жидкости, IV группа с сочетанным применением озонотерапии и ТЭС, 14 сут. Нативный препарат. Ув. *200 ЗАКЛЮЧЕНИЕ После проведения традиционного лечения не уд алось достигнуть нормализации структурнопространственной организации ротовой жидкости, однако кристаллы, расположенные в центральной зоне были компактно конденсированы в виде «звездного облака». После проведенной терапии с использованием озона в центральной зоне фации обнаруживались не только единичные кристаллы, но и дендриты, интермедиаты. Однако по-прежнему в большом количестве зарегистрированы аморфные кристаллы. Окончательного структурирования кристаллической решетки ротовой жидкости у пациентов II группы не произошло. Как следует из представленной микрофотограммы, структурнопространственная организация ротовой жидкости приобрела четкую зональность с разграничением центральной и периферической фракции. Таким образом, в результате проведенного кристаллографического исследования ротовой жидкости у пациентов обследуемых групп установлено, что до проведения лечения и на ранних сроках терапии фации ротовой жидкости зарегистрировано нарушение структурно-пространственной организации ротовой жидкости. Во всех образцах ротовой жидкости отсутствовало разграничение центральной и краевой з он , о т ме ч ено обеднение центральной зоны кристаллическими структурами, с преобладанием патологических аморфных кристаллов. По мере увеличения длительности лечения происходила структуризация кристаллической решетки, нарастающая в ряду: пациенты с традиционной терапией (I группа) - пациенты с применением озонотерапии (II группа) - пациенты с применением транскраниальной электростимуляции (III группа) - пациенты с сочетанным применением озона и транскраниальной электростимуляции (IV группа). При этом достоверных различий в улучшении организации фаций при применении озонотерапии и ТЭС выявлено не было. Особое внимание необходимо обратить на тот факт, что полная нормализация структуры фаций ротовой жидкости происходила только при комплексной терапии озоном и ТЭС. Изучение ротовой жидкости с помощью кристаллографии является скрининговым методом диагностики нарушения структурно-пространственной организации, преимущества которого заключаются в неинвазивности исследования, высокой информативности, технической простоте, не требующим высококвалифицированного персонала и специализированного оборудования.

Об авторах

Дмитрий Валерьевич Михальченко

ФГБОУ ВО «Волгоградский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Email: karta007@rambler.ru
д. м. н., доцент, зав. кафедрой пропедевтики стоматологических заболеваний

Ю. А Македонова

ФГБОУ ВО «Волгоградский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации

кафедра пропедевтики стоматологических заболеваний, кафедра стоматологии Института НМФО

Л. М Гаврикова

ФГБОУ ВО «Волгоградский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации

кафедра пропедевтики стоматологических заболеваний, кафедра стоматологии Института НМФО

Список литературы

Дополнительные файлы