SOME INDICATORS OF ANTIOXIDANT PROTECTION IN SALPINGOOPHORITIS

全文:

На протяжении последних 25 лет ведущей формой воспалительных заболеваний органов малого таза (ВЗОМТ) является сальпингоофорит (СО), пик заболеваемости данной патологией приходится на возрастную группу от 21 до 25 лет. В последние годы преобладающей формой является обострение хронического воспалительного процесса (74,5 %). Значительно увеличилось количество случаев заболевания с тяжелым течением [10]. Хронический СО - наиболее частая причина бесплодия, невынашивания беременности, эктопической беременности и нарушения менструального цикла [4]. Общепринятые методы лабораторного исследования имеют определенную диагностическую ценность, при определении их в динамике, лишь у больных с выраженными клиническими проявлениями заболевания, тогда как при стертом течении их значимость невысока [10]. В настоящее время установлено, что возникновение и развитие широкого круга воспалительных заболеваний сопровождается активацией свободнорадикальных реакций (СРР) перекисного окисления липидов (ПОЛ). Концентрация малонового диальдегида (МДА) в сыворотке крови отражает активность процессов перекисного окисления липидов в организме больного и служит маркером степени эндогенной интоксикации. Как правило, высокое содержание малонового-диальдегида соответствует тяжелой степени эндогенной интоксикации [2]. Для оценки состояния антиоксидантной системы организма человека наряду с определением содержания отдельных антиоксидантов в плазме и клетках крови используют показатель, обозначаемый как общая антиоксидантная активность (ОАА) плазмы крови. ОАА плазмы (сыворотки) крови - это интегральный показатель, отражающий ее способность противодействовать развитию свободнорадикальных реакций [8]. В контроле свободнорадикального окисления важнейшее место занимает глутатионовая система, включающая глутатион, глутатионпероксидазу и глу-татионредуктазу. Глутатионпероксидаза (ГПО) - это селенсодержащий белок, относится к ферментативному звену антиоксидантной системы и обеспечивает детоксикацию органических пероксидов и пероксида водорода [5, 9]. Выпуск 3 (47). 2013 17 ЦЕЛЬ РАБОТЫ Оценить значение изменений некоторых показателей интенсивности СРР а также изменение активности ГПО и уровня селена, как компонентов антиоксидантной защиты организма с целью разработки дополнительных биохимических критериев диагностики тяжести течения сальпингоофоритов, основываясь на диагностике степени тяжести синдрома эндогенной интоксикации. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ Для достижения поставленной цели проведено обследование 63 женщин репродуктивного возраста, поступивших в гинекологические стационары г. Пензы и г. Заречный Пензенской области с диагнозами сальпингоофорит с различными вариантами клинического течения (основная группа). В нашей работе мы использовали разделение пациенток на группы с легким, средене-тяжелым и тяжелым течением сальпингоофоритов, (в зависимости от степени тяжести синдрома эндогенной интоксикации), на основе класссификации предложенной Краснопольским в 1995 году [3]. Критериями включения явилось наличие клинических проявлений в виде жалоб на боли внизу живота, нарушение менструального цикла, повышение температуры тела, дизурические явления. При объективном осмотре обнаруживали увеличение, болезненность, тяжистость и другая патология при пальпации придатков, патологические бели, а также общие симптомы эндотоксикоза (гипертермия, тахикардия, озноб, головная боль, диспепсия, общая слабость и т. д.) В исследование не вошли пациентки с послеродовыми осложнениями воспалительного характера. Пациентки, имевшие беременность на фоне ВЗОМТ, а также сопутствующие заболевания воспалительного характера, системные заболевания соединительной ткани и др. Группу контроля составили 40 здоровых женщин -доноров крови, обратившихся на областную станцию переливания крови. Пациенткам сравниваемых групп помимо общеклинического проводилось дополнительное обследование. МДА определялся методом с тиобарбитуровой кислотой-спектрофотометрия на автоматическом биохимическом анализаторе SABA - 18 M. Для определения общего антиокислительного статуса плазмы крови использовались тест-системы фирмы Randox. Изменение параметров окисления субстрата в присутствии плазмы крови регистрировалось спектрофотометрически (SABA - 18 M). Для выявления связи уровня селена в сыворотке крови с уровнем эндогенной интоксикации мы проводили исследование концентрации селена флюоримет-рическим методом в модификации Тутельяна В. А., Хо-тимченко С. А., Голубкиной Н. А. с использованием флюориметра «Флюорат-02-2М» [6]. Определение активности глутатионпероксидазы (ГПО) в сыворотке крови: для определения активности фермента использовали сыворотку после однократной заморозки. Определение проводили по методу В. М. Моина, 1986 [7]. Полученные результаты обрабатывались с помощью стандартных статистических программ Microsoft Office Exel 2010. Для всех показателей определяли средние значения (М), а также стандартную ошибку среднего (m). Для оценки степени достоверности различий между группами использовали простой критерий Стьюдента (t). Различия между показателями считали достоверными при p < 0,05. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Все обследованные пациентки были в репродуктивном возрасте: в группе пациенток с сальпингоофо-ритами он составил (28,7 ± 5,3) года. Средний возраст пациенток контрольной группы был сопоставими составил (30,4 ± 6) лет. В целях разграничения по степени тяжести СЭИ были использованы разработанные в 1995 г. Краснопольским В. И. критерии оценки степени интоксикации у больных с гнойно-воспалительными заболеваниями гинекологического профиля, а именно учитывалось количество лейкоцитов в общем анализе крови, СОЭ, общий белок крови, температура тела (табл. 1, рис. 1). Таблица 1 Изменения исследуемых показателей в абсолютных показателях, p < 0,05 Исследуемый показатель Контрольная группа Основная группа Селен, мкг/л 109,25 82,32 ГПР, мкмоль гл/мин 151,45 104,72 МДА, нмоль/л, 2,99 5,04 ОАА, ммоль/л 1,5 1,34 ИСРР 1,99 3,3 Рис. 1. Изменение средних значений показателей при сальпингоофоритах в % от контрольной группы, p < 0,05 Оценивая окислительный стресс, мы получили следующие результаты: среднее значение МДА в исследуемой группе было достоверно выше значений группы контроля и свидетельствует об активизации ПОЛ и накапливании МДА. Уровень малонового диальдегида у лиц с анали- 18 Выпуск 3 (47). 2013 ©згшірСа ©ШгС зируемои патологиеи превышал нормальные значения на 195,65 %, свидетельствуя о чрезмерном усилении процессов пероксидации липидов в организме при ВЗОМТ В процессе возникновения и развития воспалительных заболеваний, с одной стороны, увеличивается эффективность стадии инициации СРР с другой стороны, уменьшается активность системы антиоксидантной защиты, что и приводит к ускорению свободнорадикального поражения компонентов клетки и липопротеидов. В нашем случае это демонстрируется снижением средних значений ОАА и ИСРР на 10,67 % и 65,83 % соответственно. К ферментам, метаболизирующим гидроперекиси, образующиеся в процессе реализации СРР, относят глутатионпероксидазу, в активный центр которого входит селен. Количество селена в сыворотке крови пациенток с СО уменьшилось на 24,65 %, активность ГПО снизилась на 30,86 %. Концентрация МДА возрастает по мере увеличения степени тяжести СЭИ. Выявлено, что концентрация МДА в группе пациенток с легкой степенью течения СЭИ при ВЗОМТ составила 148,83 % от нормальных значений, что достоверно выше, чем в группе контроля (р = 0,01). Значения МДА при средней и тяжелой степени нарастали и были достоверно выше р < 0,01), соответствуя 173,83 и 181,6 % от контрольной группы. Увеличение количества МДА позволяет говорить об интенсификации процессов свободнорадикального окисления и прогрессировании синдрома эндогенной интоксикации. Вследствие дисбаланса (неэффективность работы первого и второго звена ферментативной антиоксидантной защиты организма) в работе основных звеньев антиоксидантной защиты нарушается обезвреживание активных форм кислорода. Оценивая функцию ан-тиокислительной активности плазмы крови, мы получили следующие результаты. При исследовании и сравнении изменений в группах с легкой, средней и тяжелой степенью СЭИ при ВЗОМТ выявлено статистически значимое снижение антиокислительной активности плазмы, по мере утяжеления заболевания р < 0,01). При этом антиокислитель-ная активность при легкой степени тяжести СЭИ была достоверно выше (р < 0,01), чем в контрольной группе. У пациенток с легкими проявлениями эндотоксикоза уровень ОАА был повышен на 2,67 % (компенсация процессов СРР), при средней и тяжелой стадии процесса ОАА снижается на 10,67 и 19,33 % соответственно. Таким образом, различия между показателями ОАА у больных с разной степенью тяжести общего состояния признаны статистически достоверными (р < 0,01) и демонстрируют снижение способности клетки противодействовать развитию свободнорадикальных реакций. На наш взгляд, имеет место «напряжение функции» - увеличение активности антиоксидантов на начальных стадиях процесса развития эндотоксикоза, с целью его компенсации. Дальнейшее действие повреждающего агента (микробный токсин) приводит к усугублению процессов свободнорадикального окисления [1]. В качестве показателя СРР мы предлагаем использовать индекс свободнорадикального окисления (ИСРР), рассчитываемый как отношение ОАА к МДА. Как видно из рис. 1 и 2, его изменения более наглядно демонстрируют степень окислительного стресса у пациенток с сальпингоофоритами. Так, в случаях с легким течением данный показатель увеличивался всего на 24,12 %, в среднетяжелой на 60,8 %, в тяжелой на 94,97 % (почти в два раза!). Таким образом, ИСРР предлагается нами как один из дополнительных критериев тяжести течения сальпингоофоритов. Рис. 2. Изменения показателей в % от контрольной группы, р < 0,05 Характерной особенностью селенсодержащих белков млекопитающих является то, что они, по-видимому, связаны с окислительно-восстановительными процессами, происходящими внутри клетки и вне ее. Активность селенсодержащей ГПО напрямую зависит от уровня селена в организме. В нашем исследовании в случаях с легкой степенью тяжести активность ГПО снижалась на 29,65 %, а содержание селена на 16,76 %; при средней тяжести разница с контрольной группой составила 35,43 % и 33,16 % соответственно; далее в тяжелых случаях активность ГПО уменьшилась на 43,88 %, а количество селена снизилось на 39,59 %. Снижение содержания селена и активности глутатионпероксидазы по мере утяжеления течения сальпингоофорита также объясняет усугубление окислительного стресса и воспалительного процесса (табл. 2, рис. 2). Таблица 2 Изменения исследуемых показателей в зависимости от степени тяжести течения ВЗМОТ соответственно степени тяжести СЭИ, p < 0,05 Показатель Контрольная группа Легкая Средняя Тяжелая Селен, мкг/л 109,25 ± 14,26 90,94 ± 25,50 73,02 ± 19,79 66,01 ± 24,41 ГПР, мкмоль гл /мин 151,45 ± 6,94 106,54 ± 29,81 97,79 ± 27,69 84,99 ± 16,95 МДА,нмоль/л, 2,99 ± 0,33 4,451 ± 0,780 5,18 ± 1,06 5,43 ± 0,65 ОАА,ммоль/л 1,50 ± 0,11 1,54 ± 0,19 1,34 ± 0,15 1,21 ± 0,14 ИСРР 1,99 ± 0,22 2,47 ± 0,62 3,21 ± 1,54 3,88 ± 0,97 Выпуск 3 (47). 2013 19 На основании проведенных исследований нами разработаны дополнительные диагностические критерии тяжести течения сальпингоофоритов в соответствии со степенью выраженности синдрома эндогенной интоксикации. По мере увеличения степени тяжести СЭИ нарастали также и общие симптомы эндотоксикоза, такие как общая слабость, лабильность нервной системы, диспепсия, головная боль. При этом общая тем пературная реакция организма в ряде случаев не соответствовала клинической и биохимической картине заболевания. На основании полученных результатов нами разработаны дополнительные диагностические критерии тяжести течения ВЗОМТ в соответствии со степенью выраженности синдрома эндогенной интоксикации (табл. 3). Использовались некоторые показатели, оцененные Краснопольским в 1995 г. Таблица 3 Критерии оценки (референтные пределы показателей) степени тяжести ВЗОМТ в соответствии со степенью тяжести синдрома эндогенной интоксикации Критерии оценки Степень тяжести Показатель здоровые легкая средняя тяжелая Ле* 109/ л до 6 от 6 до 8 до 10 более 10 СОЭ, мм/ч до 12 До 25 до 30-40 более 40 н ° О до 37 норма или 37,3 норма или 37,4-37,8 37,8 и более Селен, мкг/л 109,25-90,94 90,94-73,02 73,02-66,01 66,01 и менее ГПР 151,45-106,54 106,54-97,79 97,79-84,99 84,9 и менее ОАА, ммоль/л 1,5-1,54 1,54-1,34 1,34-1,21 1,21 и менее МДА, нмоль/л 2,99-4,45 4,45-5,18 5,18-5,43 5,43 и более ИСРР 1,99-2,47 2,47-3,21 3,21-3,88 3,88 и более ЗАКЛЮЧЕНИЕ Сальпингоофориты протекают с изменениями обмена селена: снижается количество селена иглутати-онперокидазы, соответственно степени тяжести синдрома эндогенной интоксикации, что может быть использовано как критерии диагностики степени тяжести течения сальпингоофоритов и метроэндометритов. Неспецифическая диагностика СЭИ, основанная на изменении концентрации малонового диальдегида, общего антиокислительного статуса крови (АОС), интегрального показателя - ИСРР, позволит провести объективную диагностику тяжести состояния больных ВЗОМТ, выбрать оптимальный метод терапии соответственно каждой стадии эндогенной интоксикации и оценить эффективность проводимой терапии. А также определить необходимость амбулаторного или стационарного лечения, что в свою очередь повлечет за собой положительный медико-экономический эффект.

作者简介

M. Selikhova

Email: selichovamarina@yandex.ru

O. Vinogradova

S. Vdovin

M. Kuznetsova

参考

补充文件