STUDY OF RECEPTOR MECHANISM OF ANALGESIC EFFECT SHOWN BY COMPOUND RU-1205

详细

We studied the mechanism of action of compound RU-1205. It is shown that the compound has significant kappa agonist effects on rabbit vas deferens preparations. These effects were blocked by norBNI, a selective kappa antagonist.

全文:

Селективные агонисты каппа-опиоидных рецепто- гетическому действию и наркогенный потенциал [4]. Реров представляют особый интерес для создания эффек- зультаты проведенных ранее исследований свидетельтивных анальгетиков, лишенных таких побочных эффек- ствуют о выраженных анальгетических свойствах соедитов, как респираторная депрессия, толерантность к аналь- нения под лабораторным шифром РУ-1205 [3]. Выпуск 1 (49). 2014 61 ©SSTOpßS ©ôffiïff ЦЕЛЬ РАБОТЫ Изучение механизма рецепторного действия соединения РУ-1205. МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ В настоящей работе представлены данные по изучению механизма рецепторной активности субстанции соединения РУ-1205 дигидрохлорида 9-(2-морфоли-ноэтил)-2-(4-фторфенил)имидазо[1,2-а]бензимидазола, синтезированного в НИИ физической и органической химии Южного федерального университета (Пат. РФ № 2 413 512 С1 от 29.07.2009 г.) [2]. Экспериментальные исследования проводили с использованием селективного агониста каппа-опи-оидных рецепторов - U-50,488 - («SIGMA», США), селективного антагониста каппа-опиоидных рецепторов - норбиналторфимина (nor-BNI) («SIGMA», США), агониста каппа- и парциальный агониста мю-опиоидных рецепторов - буторфанола тартрата («ОАО «Московская фармацевтическая фабрика», Россия). Для приготовления буферных растворов использовались химически чистые: натрия хлорид, калия хлорид, кальция хлорид, магния сульфат, натрия гидрокарбонат, калия дигидрофосфат, глюкоза («Мосреактив», Россия). Эксперименты были выполнены на изолированных препаратах семявыносящих протоков 5 кроликов-самцов породы шиншилла массой 4-4,5 кг. Животные содержались в условиях вивария при постоянной температуре - 22-24 оС, относительной влажности воздуха 40-50 %, при 12-часовом световом режиме, на стандартной полнорационной диете (ГОСТ Р. 50258-92), с соблюдением правил лабораторной практики при проведении доклинических исследований в РФ (ГОСТ З 51000.3-96 и 1000.4-96), а также правил и Международных рекомендаций Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых при экспериментальных исследованиях. Механизм рецепторного действия in vitro оценивали по способности угнетать вызванные электрической стимуляцией сокращения изолированного семявыносящего протока кролика (СПК), богатого каппа-опиоидными рецепторами [1]. Исследования проводились на специальной установке фирмы Ugo Basile (Италия) для работы с изолированными органами. Выделенный препарат СПК длиной 10-15 мм закрепляли между двумя электродами и помещали в ванночку объемом 10 мл, содержащую физиологический раствор при температуре 37 °С и постоянной аэрации воздухом. Регистрировали исходный сократительный ответ органов. Исследуемые вещества добавляли в ванночку в возрастающих концентрациях. О степени каппа-опиоидергической активности судили по разнице сократительного ответа, вызванного электрической стимуляцией между контрольными и опытными значениями. С помощью регрессионного анализа были рассчитаны показатели IC50 - концентрации агониста, ингибирующей сократительный ответ гладкомышечного органа на 50 %. Для подтверждения каппа-опиои-дергического влияния соединений на сократительный ответ изолированных препаратов проводили тесты с селективным каппа-антагонистом - норбиналторфи-мином (nor-BNI). Результаты обрабатывали статистически при помощи компьютерной программы «GraphPad Prism 5.0» с использованием критериев Краскела-Уолиса и Манна-Уитни. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Исследуемое вещество проявило высокую концентрационно-зависимую эффективность, подавляя вызванные электрической стимуляцией сокращения препарата СПК в диапазоне наномолярных концентраций. По ингибирующей активности соединение РУ-1205 было равно селективному агонисту каппа-опи-оидных рецепторов - U-50,488 и превосходило по этому показателю агонист каппа- и парциальный агониста мю-опиоидных рецепторов - буторфанола тартрат (рис. 1). *p < 0,05 - статистически значимо по отношению к контрольным значениям. Рис. 1. Влияние соединения РУ-1205, U-50,488 и буторфанола тартрата на вызванные электрической стимуляцией сокращения препарата семявыносящего протока кролика Рассчитанные методом регрессионного анализа показатели ингибирующей концентрации IC50 для соединений РУ-1205, U-50,488 и буторфанола составили 2,2 X 10-9 М, 7,0 X 10-9 М и 9,8 х 10-5 М соответственно. Эффекты изучаемого вещества на фоне инкубации ткани с селективным антагонистом каппа-опиоидных рецепторов nor-BNI в концентрации 1 рМ угнетались на 85 % (рис. 2). Норбиналторфимин блокировал эффекты U-50,488 на 68 %, а буторфанола на 32 %. 62 Выпуск 1 (49). 2014 ©зшірСз [ЩсоШтСІМЩ #р < 0,05 - статистически значимо по отношению к РУ-1205 - индуцированным эффектам; &р < 0,05 - статистически значимо по отношению к U-50,488 - индуцированным эффектам. Рис. 2. Влияние соединений РУ-1205, U-50,488 и буторфанола тартрата на сокращения семявыносящего протока кролика на фоне инкубации с селективным антагонистом каппа-опиоидных рецепторов - норбиналторфимином В результате проведенного исследования было показано, что исследуемое соединение проявляет селективность по отношению к каппа-опиоидным рецепторам. В экспериментах на семявыносящем протоке кролика была выявлена высокая активность соединения РУ-1205, равная агонисту каппа-опиоид-ных рецепторов U-50,488 и превосходящая агонист каппа- и парциальный агонист мю-опиоидных рецепторов - буторфанола тартрат. Селективность дей ствия изучаемого соединения подтверждалась блокированием его эффектов под действием каппа-антагониста nor-BNI. ЗАКЛЮЧЕНИЕ Исследуемое соединение - РУ-1205 оказывает выраженное каппа-агонистическое действие на препаратах семявыносящего протока кролика: концентрационно-зависимо и norBNI-обратимо ингибирует стимулированные электрическими импульсами сокращения препарата семявыносящего протока в диапазоне нано-молярных концентраций.