INFLUENCE OF COLURIA GEOIDES (ROSACEAE) BAC ON HUMORAL IMMUNE RESPONCE

Abstract

The article presents the results of immunocorrecting properties of dry extract fractions of C. geoides (Rosaceae) for experimental immunodeficiency. Since the BAC fractions action relinquishes to the action of integral extract, the isolation of active substances is not reasonable.

Full Text

В настоящее время в практической медицине используется небольшой ассортимент иммунотропных препаратов растительного происхождения, хотя применение лекарственных растений при иммунодефицитах имеет многовековую историю. Введение в медицинскую практику новых фитопрепаратов и установление группы БАС, отвечающих за активность, является актуальной задачей экспериментальной фармакологии. Цель настоящего исследования - анализ иммунотропного действия отдельных фракций БАС сухого экстракта Coluria geoides (Рall.) Ledeb. (Rosaceae), проявившего иммунокорригирующее действие на гуморальный иммунный ответ в условиях экспериментального иммунодефицита [1]. Сухой экстракт из сырья (подземной и надземной части, собранных в июле 2014 г. в окр. д. Казановка, Республика Хакасия) C. geoides получали методом перколяции 40% этанолом, высушивали до постоянной массы, стандартизовали по содержанию m-кумаровой кислоты (8,6%). Комплексы БАС получали из сухого экстракта фракционированием: КЭ - 96% этанолом, КВ - водой; в качестве препарата сравнения использовали настойку эхинацеи пурпурной (НЭ). Исследование выполнено на 50 мышах-самках CBA/CaLac в возрасте 2 месяцев, разделенных на 5 групп (n=8-10): 2 контрольные и 3 экспериментальные. Животным первой контрольной группы однократно внутрибрюшинно вводили изотонический раствор. Экспериментальный иммунодефицит у 74 Фармация и фармакология. № 6 (7), 2014 животных второй контрольной и 1-3 экспериментальных групп создавали однократным введением циклофосфана (ЦФ) внутрибрюшинно в максимально переносимой дозе (250 мг/кг). Затем в течение 5 дней животным экспериментальных групп вводили исследуемые субстанции (КЭ, КВ) и препарат сравнения (НЭ) внутрибрюшинно в дозе 50 мг/кг, животным контрольных групп вводили дистиллированную воду. На 5 день животных иммунизировали эритроцитами барана в дозе 0,2 мл 15% суспензии. Забор материала для исследования осуществляли на 7 и 14 сутки после иммунизации. Число антителообразующих клеток (АОК) селезенки определяли методом локального гемолиза [2], титр антител - в реакции пассивной гемагглютинации [4]; общую клеточность селезенки - стандартными гематологическими методами [3]. Результаты обрабатывали с использованием пакета программ IBM SPSS Statiatics 19, представляли в виде медианы с 25% и 75% процентилями, достоверность различия считали значимой при р≤0,05 (критерий Манна-Уитни). В ходе эксперимента установили (табл. 1), что в условиях экспериментального иммунодефицита фракция КВ проявляет иммунокорригирующую активность, восстанавливая число кариоцитов селезенки до значений интактных животных (1 контрольной группы) и выше (на 7 сутки). Фракция КЭ стимулировала пролиферацию кариоцитов селезенки только на 7 сутки эксперимента, на 14 сутки не влияла на этот процесс. Таблица 1 - Влияние на иммунопролиферативные процессы в селезенке (медиана (25%÷75%), n = 8-10) Группа животных Число кариоцитов селезенки, млн клеток/орган 7 сутки 14 сутки 1-контрольная (изотонич. р-р) 106,00 (93,75÷117,75) 153,75 (138,75÷155,50) 2-контрольная (ЦФ) 46,50 (34,25÷50,25) 66,88 (56,75÷73,31) 1-экспериментальная (КВ, ЦФ) 261,20 (181,40÷267,40)*& 182,00 (121,25÷202,00)& 2-экспериментальная (КЭ, ЦФ) 326,60 (270,55÷353,40)*& 85,38 (64,50÷90,13)*# 3-экспериментальная (НЭ, ЦФ) 270,00 (233,25÷312,13)*& 116,25 (103,50÷166,25)& Примечание: различие достоверно: * - с показателями 1-й контрольной группы (без иммунодефицита), # - с показателями группы, получавшей препарат сравнения; & - с показателями 2-й контрольной группы (с иммунодефицитом). На фоне действия ЦФ исследуемые субстанции не влияли на пролиферацию АОК селезенки, только фракция КВ на 7 сутки после иммунизации достоверно, но незначительно увеличивала этот показатель (табл.2). Таблица 2 - Влияние на пролиферацию антителообразующих клеток селезенки (медиана (25%÷75%), n = 8-10) Группа животных Относительное число АОК селезенки, % 7 сутки 14 сутки 1-контрольная (изотонич. р-р) 29,0 (27,5÷32,3) 31,2 (28,5÷32,5) 2-контрольная (ЦФ) 19,0 (17,6÷20,7) 25,8 (24,1÷26,2) 4-экспериментальная (КВ, ЦФ) 23,8 (22,9÷24,8)*&# 26,3 (23,3÷28,0)*# 5-экспериментальная (КЭ, ЦФ) 19,3 (18,6÷21,0)*# 25,6 (24,5÷27,2)*# 6-экспериментальная (НЭ, ЦФ) 12,0 (11,5÷12,8)*& 16,2 (14,8÷16,6)*& Примечание: различие достоверно: * - с показателями 1-й контрольной группы (без иммунодефицита), # - с показателями группы, получавшей препарат сравнения; & - с показателями 2-й контрольной группы (с иммунодефицитом). При экспериментальном иммунодефиците фракции КВ и КЭ увеличивали титр суммарных антител до показателей интактных животных (1 контрольной группы) и выше, проявляя иммунокорригирующее действие (табл. 3). 75 Фармация и фармакология. № 6 (7), 2014 Таблица 3 - Влияние на синтез суммарных Ig к эритроцитам барана (медиана (25%÷75%), n = 8-10) Группа животных Концентрация суммарных Ig, lg2T 7 сутки 14 сутки 1-контрольная (изотонич. р-р) 4,32 (3,32÷4,32) 5,32 (5,32÷5,32) 2-контрольная (ЦФ) 0,00 (0,00÷0,00) 0,00 (0,00÷1,16) 4-экспериментальная (КВ, ЦФ) 5,32 (4,32÷5,32)*& 5,32 (4,32÷5,57)&# 5-экспериментальная (КЭ, ЦФ) 5,32 (4,32÷6,32)*& 5,32 (3,32÷6,32)&# 6-экспериментальная (НЭ, ЦФ) 5,32 (4,32÷5,82)*& 7,32 (6,32÷7,32)*& Примечание: различие достоверно: * - с показателями 1-й контрольной группы (без иммунодефицита), # - с показателями группы, получавшей препарат сравнения; & - с показателями 2-й контрольной группы (с иммунодефицитом). Выводы Сравнение полученных данных с результатами ранее проведенных исследований [1] свидетельствует о том, что фракции БАВ C. geoides уступают по активности цельному экстракту. Следовательно, выделение действующих веществ комплексного фитопрепарата нецелесообразно.