STUDY OF ANTIVIRAL ACTIVITY OF SOME HYDRAZONE PINOSTROBIN DERIVATIVES

Full Text

В последние десятилетия пристальное внимание исследователей привлекает поиск количественных соотношений структура-свойство химических соединений, позволяющих предсказывать их разнообразные свойства. Актуальным является получение новых производных пиностробина, обладающих высокой специфической биологической активностью. Цель работы: исследование противовирусной активности некоторых производных гидразона пиностробина. В работе были использованы следующие ортомиксовирусы: вирус гриппа птиц, штамм А/FPV/34/1 (H7N1), вирус гриппа человека, штамм А/Алматы/8/98 (H3N2), вирус гриппа свиней A/swine/Iowa/30 (H1N1). Вирусы выращивали в аллантоисной полости 10-дневных куриных эмбрионов в течение 36 часов при 37 °С. Вирусингибирующие свойства соединений изучали в экспериментах с ортомиксовирусами на куриных эмбрионах. Определение противовирусных свойств выполняли методом «скрининг-тест», рассчитанным на нейтрализацию вируса в количестве 100 ЭИД50 заданными концентрациями препаратов. Вирулицидную 92 Фармация и фармакология. № 6 (7), 2014 активность исследуемых веществ определяли путем обработки вируссодержащего материала химическими соединениями при 37 °С в течение 30 мин с последующим титрованием инфекционности обработанного материала. За реальное вирулицидное действие принимали разность между титром вируса в пробе без экспозиции и его титром после. Если разность в титрах составляла 1,0 - 2,0 lg, то вещество считали обладающим умеренной или выраженной противовирусной активностью [1]. Инфекционный титр вирусов определяли по методу Reеd и Muench [2]. В наших исследованиях проводилось сравнительное изучение антивирусных свойств гидразона пиностробина (1) и его производных (2-6). H3CO O H3CO O S S OH N NH C NH-C2H5 OH N NH C NH-C6H5 (3) (2) H CO O H3CO O 3 H3CO O OH N NH2 OH N N C (5) H (1) OH N N CH F Cl (4) H3CO O HO OH N N C H (6) Br Вирусингибирующая активность соединений (1-6) исследована в концентрации от 0,0016% до 0,2%, что соответствовало дозам 0,003 - 0,4 мг на куриный эмбрион (0,06 - 8 мг/кг). Установлено, что в заданном диапазоне доз исследованные образцы способны подавлять репродукцию вируса гриппа человека А/Алматы/8/98 (H3N2) не более, чем на 12%. При этом производные (5) и (6) проявляли более выраженные противовирусные свойства по отношению к вирусу гриппа человека штамм А/Алматы/8/98 (табл. 1), чем образцы (2-3) и (6). Таблица 1 - Вирусингибирующая активность образцов при воздействии на штамм вируса гриппа человека А/Алматы/8/98 (H3N2) Вирусингибирующая активность (%) в дозе Образцы мг/куриный эмбрион 0,003 0,02 0,08 0,4 1 2 3 4 5 Гидразон пиностробина (1) 0,0±0,0 0,0±0,0 0,0±0,0 0,0±0,0 2-(5-гидрокси-7-метокси-2- фенилхроман-4-илиден)-N- 0,0±0,0 2,1 3,6 3,6 фенилгидразино-1-карботиоамид (2) N-этил -2-(5-гидрокси-7-метокси-2- фенилхроман-4-илиден) гидразино- 0,0±0,0 1 1,5 3,6 1-карботиоамид (3) 93 Фармация и фармакология. № 6 (7), 2014 Продолжение таблицы 1 1 2 3 4 5 4-((4-фторбензилиден) гидразоно)-7- 0,0±0,0 2,1 6,0 6,25 метокси -2-фенилхроман-5-ол (4) 4-((2-хлорбензилиден) -гидразоно)-7- 0,0±0,0 0,0±0,0 6,25 12,5 метокси -2-фенилхроман-5-ол (5) 4-((2гидрокси-5- бромбензилиден) - гидразоно)-7-метокси -2- 0,0±0,0 0,0±0,0 10 12 фенилхроман-5-ол (6) Изучена вирусингибирующая активность образцов на модели вируса гриппа птиц штамм А/FPV/34/1 (H7N1) (табл.2). Показано, что в исследуемом интервале доз образцы (1-3), (4) и (5) подавляли инфекционный титр вируса не более, чем на 12%. При изучении вирусингибирующих свойств исследуемых образцов на модели вируса гриппа, штамм A/swine/Iowa/30 (H1N1) (табл. 3), установлена аналогичная ситуация: образцы (1-3), (4) и (5) подавляли инфекционный титр вируса не более, чем на 15%, а образец (6) не проявил вирусингибирующую активность. Таблица 2 - Вирусингибирующая активность образцов при воздействии на штамм вируса гриппа птиц А/FPV/34/1 (H7N1) Образцы Вирусингибирующая активность (%) в дозе мг/куриный эмбрион 0,003 0,02 0,08 0,4 (1) 0,0±0,0 0,0±0,0 2,1±0,3 4,2±0,6 (2) 0,0±0,0 0,0±0,0 0,0±0,0 4,2±0,6 (3) 0,0±0,0 0,0±0,0 4,2±0,6 6,25±0,8 (4) 0,0±0,0 2 6,25±0,8 10±1,3 (5) 0,0±0,0 0,0±0,0 6,25±0,8 12±1,6 (6) 0,0±0,0 0,0±0,0 0,0±0,0 0,0±0,0 Таблица 3 - Вирусингибирующая активность образцов при воздействии на штамм вируса гриппа птиц A/swine/Iowa/30 (H1N1) Образцы Вирусингибирующая активность (%) в дозе мг/куриный эмбрион 0,003 0,02 0,08 0,4 (1) 0,0±0,0 0,0±0,0 3,1 5,2 (2) 0,0±0,0 0,0±0,0 0,0±0,0 5,2 (3) 0,0±0,0 0,0±0,0 5,2 7,25 (4) 0,0±0,0 2 8,25 12 (5) 0,0±0,0 0,0±0,0 6,25 15 (6) 0,0±0,0 0,0±0,0 0,0±0,0 0,0±0,0 Таким образом, показано, что исследуемые образцы в интервале исследуемых доз не проявляли ярко выраженной вирусингибирующей активности. Однако, установлено, что в ряду исследуемых соединений образцы (4) и (5) обладают более выраженной антивирусной активностью. В результате изучения образцов на вирулицидную активность выявлено, что образцы (1) и (2) подавляли инфекционность вируса гриппа на 0,75lg, что сопоставимо с некоторыми коммерческими противовирусными препаратами. Таким образом, в результате проведенных исследований установлено, что среди полученных соединений образцы 4-((4-фторбензилиден)гидразоно)-7-метокси-2-фенилхроман-5-ола (4) и 4-((2-хлорбензилиден) -гидразоно)-7-метокси -2-фенилхроман-5-ола (5) обладали слабой вирусингибирующей активностью, а образцы гидразона пиностробина (1) и 2-(5-гидрокси-7-метокси-2-фенилхроман-4-илиден)-N-фенилгидразино-1-карботиоамида (2) - средневыраженной вирулицидной активностью. 94 Фармация и фармакология. № 6 (7), 2014 Выводы Установлено, что в тестируемом диапазоне доз 0,03 - 0,4% у всех исследованных производных гидразона пиностробина не было достигнуто ЛД50. В дозе 0,4 мг/куриный эмбрион образцы 4-((4-фторбензилиден) гидразоно)-7-метокси -2-фенилхроман-5-ола (4) и 4-((2-хлорбензилиден)-гидразоно)-7-метокси-2-фенилхроман-5-ола (5) способны подавлять репродукцию вирусов гриппа от 10 до 30%. Образцы гидразона пиностробина (1) и 2-(5-гидрокси-7-метокси-2-фенилхроман-4-илиден)-N-фенилгидразино-1-карботио-амида (2) способны подавлять инфекционность вирусов гриппа не более, чем на 0,5 lg.

About the authors

G. K Mukusheva

”Fitohimiya” International scientific and manufacturing holding, Karaganda, Kazakhstan

G. M Baisarov

”Fitohimiya” International scientific and manufacturing holding, Karaganda, Kazakhstan

P. Z Zhanymkhanova

”Fitohimiya” International scientific and manufacturing holding, Karaganda, Kazakhstan

A. Sh Turysbaeva

”Fitohimiya” International scientific and manufacturing holding, Karaganda, Kazakhstan

A. P Bogoyavlensky

Microbiology and Virusology Institute, Almaty, Kazakhstan

V. E Berezin

Microbiology and Virusology Institute, Almaty, Kazakhstan

S. M Adekenov

”Fitohimiya” International scientific and manufacturing holding, Karaganda, Kazakhstan

References

Supplementary files