Деструктивное действие РНКазы А на вирус SARS-CoV-2 (исследование in vitro)

Обложка


Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Доступ платный или только для подписчиков

Аннотация

Обоснование. На сегодняшний день самым главным и обсуждаем вопросом в профессиональном медицинском сообществе остается проблема профилактики и лечения новой коронавирусной инфекции (COVID-19). Среди причин не спадающего роста заболеваемости и смертности доминирует отсутствие препарата этиотропного действия. В нашем исследовании предлагается использовать выпускаемый ранее для лечения клещевого энцефалита препарат рибонуклеазы А, получаемый из поджелудочной железы крупного рогатого скота.

Цель — изучить противовирусную активность РНКазы А в отношении SARS-CoV-2 в экспериментах in vitro.

Материалы и методы. В эксперименте применяли пробы 50 пациентов с подтвержденным (методом полимеразной цепной реакции) первичным диагнозом новой коронавирусной инфекции (COVID-19). Препаратом для исследования служила рибонуклеаза A (neoFroxx GmbH, Германия) в концентрациях 0,5; 1; 5 и 10 мг/мл. Пробы инкубировали при 4 и 37 °С, экспозиция — 20 мин и 20 ч. Полимеразную цепную реакцию проводили с использованием набора реагентов ОТ-ПЦР-РВ-SARS-CoV-2 (ООО «Синтол», Россия).

Результаты. Выявлена противовирусная активность рибонуклеазы А в минимальной концентрации 0,5 мг/мл при инкубации 20 мин и 20 ч в температурном диапазоне от 4 до 37 °С.

Заключение. Полученные в исследовании in vitro данные о способности рибонуклеазы А разрушать вирусную РНК предполагают возможность применения препарата как для лечения пациентов, так и для обработки объектов окружающей среды.

Полный текст

Доступ закрыт

Об авторах

Илья Андреевич Морозов

Пермский государственный медицинский университет им. акад. Е.А. Вагнера

Автор, ответственный за переписку.
Email: Lonny8@yandex.ru
ORCID iD: 0000-0003-4233-3711

студент лечебного факультета

Россия, Пермь

Анатолий Петрович Годовалов

Пермский государственный медицинский университет им. акад. Е.А. Вагнера

Email: agodovalov@gmail.com

д-р мед. наук, ведущий научный сотрудник центральной научной лаборатории, доцент кафедры микробиологии и вирусологии

Россия, Пермь

Денис Александрович Оборин

Пермский краевой центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями

Email: DAOborin@yandex.ru

врач-бактериолог

Россия, Пермь

Список литературы

  1. Романов Б.К. Коронавирусная инфекция COVID-2019 // Безопасность и риск фармакотерапии. 2020. Т. 8, № 1. С. 3–8. doi: 10.30895/2312-7821-2020-8-1-3-8
  2. Никифоров В.В., Суранова Т.Г., Чернобровкина Т.Я. и др. Новая коронавирусная инфекция (COVID-19): клинико-эпидемиологические аспекты // Архивъ внутренней медицины. 2020. Т. 10, № 2(52). С. 87–93. doi: 10.20514/2226-6704-2020-10-2-87-93
  3. Абатуров А.Е., Агафонова Е.А., Кривуша Е.Л., Никулина А.А. Патогенез COVID-19 // Здоровье ребенка. 2020. Т. 15, № 2. С. 133–144. doi: 10.22141/2224-0551.15.2.2020.200598
  4. Rosenberg H.F. RNase A ribonucleases and host defense: an evolving story // J. Leukoc. Biol. 2008. Vol. 83, No. 5. P. 1079–1087. doi: 10.1189/jlb.1107725
  5. Абатуров А.Е. Рибонуклеазы А — древнейшие компоненты неспецифической защиты респираторного тракта // Здоровье ребенка. 2011. Т. 5, № 32. С. 136–142.
  6. Ильинская О.Н., Шах Махмуд Р. Рибонуклеазы как противовирусные агенты // Молекулярная биология. 2014. Т. 48, № 5. С. 707. doi: 10.7868/S0026898414040053
  7. Dyer K.D., Rosenberg H.F. The RNase a superfamily: generation of diversity and innate host defense // Mol. Divers. 2006. Vol. 10, No. 4. P. 585–597. doi: 10.1007/s11030-006-9028-2

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
2. Рис. 1. Кинетические кривые роста сигнала флюоресценции по каналам HEX, FAM, Cy5, ROX в пробе № 26: а — до обработки РНКазой; b — после обработки РНКазой в концентрации 0,5 мг/мл в течение 20 мин при 37 °С. Регистрация сигналов по зеленому (FAM) и синему (Cy5) графикам свидетельствует об успешном выделении РНК из пробы и успешном прохождении полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией в реальном времени. Регистрация сигналов по красному (HEX) и фиолетовому (ROX) графикам свидетельствует о наличии специфической РНК вируса SARS-CoV-2

Скачать (300KB)
3. Рис. 2. Кинетические кривые роста сигнала флюоресценции по каналам HEX, FAM, Cy5, ROX в пробе № 26: а — до обработки изотоническим раствором натрия хлорида; b — после обработки изотоническим раствором натрия хлорида в течение 20 мин при 37 °С. Регистрация сигналов по зеленому (FAM) и синему (Cy5) графикам свидетельствует об успешном выделении РНК из пробы и успешном прохождении полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией в реальном времени. Регистрация сигналов по красному (HEX) и фиолетовому (ROX) графикам свидетельствует о наличии специфической РНК вируса SARS-CoV-2

Скачать (281KB)

© Морозов И.А., Годовалов А.П., Оборин Д.А., 2021

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International License.

СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: серия ПИ № ФС 77 - 74760 от 29.12.2018 г.