REAKTIVNYE IZMENENIYa ASTROTsITOV PRILEZhAShchEGO YaDRA GOLOVNOGO MOZGA POSLE OGRANIChENIYa KROVOTOKA V EKSPERIMENTE

Abstract



Введение. Распространенной моделью ишемических повреждений головного мозга является модель с перевязкой обеих общих сонных артерий. При этом центр ишемии захватывает передний мозг, кровоснабжение которого значи тельно ограничивается, поскольку он получает кровь через коллатеральные сосуды из позвоночных артерий. Животные выживают в течение 2-4 нед, если их не подвергать стрессу [1]. В течение этого времени по результатам неврологиче- 76 МЕДИЦИНСКИЙ АКАДЕМИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ, 2016 г., ТОМ 16, № 4 ских и биохимических тестов устанавливают эффективность антигипоксантов и нейропротекторов. Реактивные изменения клеток прилежащего ядра переднего мозга (ПЯ), расположенного в центре частичной ишемии, не изучались. Цель исследования: установить реактивные изменения астроцитов головного мозга, расположенных в области выраженного ограничения кровотока. Объекты, материалы и методы. Опыты выполнены на самцах крыс Вистар массой 200-220 г, возрастом 4 мес. Подопытных крыс (4 особи) фиксировали на станке, под эфирным наркозом препарировали и лигировали обе общие сонные артерии. Рану обрабатывали антисептиком и зашивали. У ложнооперированных крыс (4 особи, контроль) воспроизводили все этапы операции без перевязки артерий. Через 7 сут животных декапитировали, головной мозг фиксировали в 9%-м растворе нейтрального формалина, готовили фронтальные парафиновые срезы ПЯ толщиной 3 мкм (в области между передней спайкой и обонятельными ядрами). Срезы окрашивали крезиловым фиолетовым по Нисслю, выявляли глиальный фибриллярный кислый белок астроцитов (GFAP) с использованием мышиных моноклональных антител (клон GA-5; Biocare medical, США; 1:250). Вторичные антитела применяли из набора VECTASTAIN ABC, США. После проявления связанных антигенов диаминобензидином срезы докрашивали гематоксилином. Строение астроцитов изучали в 7 последовательных квадратах площадью 0,01 мм2 у каждого животного в группе (n=28). Устанавливали количество клеток, расстояние между их телами и стенкой капилляра в пределах окружности радиусом 20 мкм, площадь тел клеток и длину их главных отростков. Определяли глиоцито-нейрональный индекс как отношение числа клеток-сателлитов к числу жизнеспособных нейронов (малоизмененных, гипохромных набухших и сморщенных гиперхромных). Морфометрию проводили с помощью программы Imagescope (Электронный анализ, Россия). Определяли среднее арифметическое, ее стандартную ошибку и среднеквадратическое отклонение. О значимости различий судили по величине t-критерия Стьюдента и считали их значимыми при р<0,05. Результаты и их обсуждение. Тела нейронов и астроцитов ПЯ ложнооперированных крыс находились на разном расстоянии от стенки кровеносных капилляров, клетки-сателлиты были единичными. GFAP в телах астро-цитов имел строение непрерывной рыхлой тонкопетлистой сети и часто образовывал сгущение в виде одной-двух глы-бок. Экспрессия GFAP в отростках и глиальных периваску-лярных мембранах была непрерывной. Через 7 сут ишемии определялось большое количество измененных форм нейронов: «клеток-теней», гиперхромных сморщенных и набухших гипохромных; тела многих нейронов, астроцитов и оли-годендроцитов группировались вблизи стенки кровеносных капилляров. Тела астроцитов были набухшими, их площадь, в сравнении параметром в контроле, возросла (р<0,05). Ядрышко располагалось вблизи ядерной оболочки. GFAP часто концентрировался в основании главных отростков, длина которых сократилась (р<0,05). В периваскулярных мембранах GFAP был более тонким, чем в контроле и в ряде ее участков отсутствовал. Расстояние между телами астроцитов и стенкой капилляров сократилось, глиоцито-нейрональный индекс возрос (р<0,05). Количество астроцитов после ишемии значительно не изменилось. Среди них, несмотря на особенности положения в системе «капилляр-астроцит-нейрон», теневидные и сморщенные формы отсутствовали. Выявленные изменения нейронов и астроцитов являются следствием токсических реакций глютамат-кальциевого каскада, которые запускаются в фокусе ишемии [2] и коррелируют с данными ультраструктурных изменений клеток [3]. Авторы наблюдали расширение полостей органелл, матрикса митохондрий и деструкцию клеточных мембран, что ведет к утрате внутриклеточной жидкости и сморщиванию клетки. Выводы. Астроциты более устойчивы к ишемическому повреждению, чем нейроны. Они испытывают набухание, деструкцию промежуточных филаментов в телах, периферических частях отростков и периваскулярных глиальных мембранах. Формирование нейроно-глио-васку-лярных комплексов представляет собой защитный механизм и условие выживания клеток при ишемии.

N G Naumov

Email: ngnaumov@gmail.com

A V Droblenkov

  1. Шабанов П.Д., Зарубина И.В., Soultanov V.S. К механизму действия полипренолов при ишемии головного мозга // Мед. акад. журн.- 2011. - Т. 11, № 2.- С. 24-31.
  2. Гусев Е.И., Скворцова В.И. Ишемия головного мозга.- М: Медицина, 2001.- 328 с.
  3. Caltana L., Merelli A., Lazarowski A., Brusco A. Neuronal and glial alterations due to focal cortical hypoxia induced by direct cobalt chloride (CoCl2) brain injection // Neurotox. Res.- 2009.- Vol. 15, № 4.- P. 348-358.

Views

Abstract - 14

PDF (Russian) - 0

Cited-By


PlumX

Refbacks

  • There are currently no refbacks.

Copyright (c) 2016 Naumov N.G., Droblenkov A.V.

Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.

This website uses cookies

You consent to our cookies if you continue to use our website.

About Cookies