ANTIBIOTIChESKOE DEYSTVIE NA STAPHYLOCOCCUS AUREUS I ESCHERICHIA COLI SEKRETA SLYuNNYKh KLETOK HIRUDO MEDICINALIS - MNOGOFUNKTsIONAL'NOGO KOMPLEKSA, NE VYZYVAYuShchEGO ANTIBIOTIKOREZISTENTNOSTI

Abstract



Введение. В настоящее время резистентность микроорганизмов к противомикробным препаратам, и, прежде всего - к антибиотикам (антибиотикорезистентность - АР), стремительно расширяется, превратившись в глобальную мировую проблему. С целью решения последней изучают активность антимикробных пептидов (АМП) - альтернативу традиционно используемым лекарственным средствам. Однако часто препятствием для лечебного применения ряда АМП является их высокая гемолитическая активность и токсичность. Исследование путей преодоления АР доказало, что только комбинация нескольких АМП не вызывает АР у патогенов. Причём, активность смеси двух и более АМП часто возрастает, благодаря синергизму [1]. Поэтому всё больше внимания уделяют изучению природных, эволюционно сбалансированных комплексов биологически активных веществ, содержащих АМП. Особое место среди таких комплексов занимает секрет слюнных клеток медицинской пиявки Hirudo medicinalis (ССК) - основной гуморальный агент, в первую очередь обеспечивающий высокую эффективность используемого с древности лечения пиявками - гирудотерапии (ГТ). ССК не токсичен и не вызывает гемолиз эритроцитов. Важнейшим его свойством справедливо считают уникальную противотромботическую активность, когда проявляется фибринолитический и множество других эффектов ГТ, обусловленных, в первую очередь, многофункциональным комплексом ССК [2]. Антибиотический эффект ССК, также весьма значимый при ГТ, пока изучен недостаточно. Установлено, что ССК обладает высокой антимикробной активностью широкого спектра, причём, часто он способен подавлять развитие ряда микроорганизмов, нечувствительных к лизоциму - активному компоненту врождённого иммунитета [2, 3]. Среди последних известен Staphylococcus aureus, устойчивый к лизоциму благодаря модификации его пептидогликана О-ацетилтрансфера-зой, вызывающий заболевания разной степени тяжести (вплоть до стафилококкового сепсиса), всё более опасные из-за широкой АР этого возбудителя. Расширяется также и АР ряда штаммов Escherichia coli. Цель нашей работы - сравнительное изучение антибиотического влияния ССК на S. aureus и E. œli. Материалы и методы. Отбирали нативный, свободный от примесей, ССК от H. medicinalis, выращенных на биофабрике и купленных в аптеке, известным, описанным ранее способом [3]. Работу проводили с культурами S. aureus штамм 144 и E. coli штамм 52 из Музея куль тур кафедры микробиологии МГУ. Бактерии выращивали при 37 С в течение суток на агаризованной питательной среде состава (г/л): K2HPO4 - 7,0; KH2PO4 - 2,0; цитрат натрия - 0,4; MgSO4 - 0,05; (NH4)2SO4 - 1,0; H2O дист. К среде добавляли 10 г/л триптозного бульона и 10 г/л глюкозы; при выращивании стафилококков также добавляли 100 г/л NaCl. В среды вносили 15 г/л агара («Sigma» или «Difco», США). Определение антибиотической активности ССК в физиологическом растворе проводили, контролируя подавление роста клеток в жидкой среде, а также методом диффузии в агар [3]. Исследовали с помощью сканирующей и трансмиссионной электронной микроскопии (СЭМ и ТЭМ) препараты клеток после их обработки ССК, которые готовили общепринятыми методами. СЭМ и ТЭМ проводили на микроскопах JSM-6380 (Япония) при ускоряющем напряжении 20 к^ и Geol JEM 1011 при ускоряющем напряжении 80 кВ, соответственно [3]. Результаты и их обсуждение. Растворы ССК подавляют рост исследуемых бактерий (таблица). Клетки E. coli почти полностью лизируются уже через 3 ч действия на них ССК (его минимальная ингибирующая концентрация - МИК, составила 4,5 мкг/мл). Признаки лизиса этих клеток (в СЭМ и ТЭМ) под влиянием ССК сходны с признаками, изученными нами у Pseudomonas aeruginosa [3]. Минимальная концентрация раствора ССК, подавляющая рост S. aureus (МПК) составила 35 мкг/мл. Более половины стафилококков через 7 ч действия на них в жидкой среде 2 МПК (70 мкг/мл) ССК не способны к росту. Изменение ультрамикроструктуры клеток S. aureus под влиянием ССК начинается с септы, образующейся при их делении. ТЭМ показала, что этот самый молодой участок под влиянием ССК становится в 2-4 раза шире остальной части клеточной стенки, его электронная плотность уменьшается, при этом нарушается и прилегающая к нему цитоплазматическая мембрана. Заключение. В работе показана способность ССК оказывать прямой бактерицидный и/или бактериостати-ческий эффект на патогенные бактерии.

Go Dan'yan

Email: guody@mail.ru

I B Pavlova

  1. Yu C., Baeder D. Y., Regoes R. R., Rolff J. Combination Effects of Antimicrobial Peptides // Antimicrob Agents Chemother. - 2016.- Vol. 60, № 3.- P. 1717-1724
  2. Баскова И. П. Научные основы гирудотерапии. Гуморальное звено. Тула: Аквариус, 2015-228 с
  3. Изучение перспектив использования секрета слюнных клеток медицинской пиявки Hirudo medicinalis и препарата «Пиявит» как антимикробных комплексов, не вызывающих резистентности у микроорганизмов / Павлова И. Б., Юдина Т. Г., Баскова И. П., Го Даньян, Чен Л. Ч., Феоктистова Н. А., Васильев Д. А., Золотухин С. Н. // Современные проблемы науки и образования.- 2015.- № 2. URL: www.science-education.ru/131-23637.

Views

Abstract - 45

PDF (Russian) - 2

Cited-By


PlumX

Refbacks

  • There are currently no refbacks.

Copyright (c) 2016 Dan'yan G., Pavlova I.B.

Creative Commons License
This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.

This website uses cookies

You consent to our cookies if you continue to use our website.

About Cookies