ПРИМЕНЕНИЕ РАЗЛИЧНЫХ ФЛУОРЕСЦЕНТНЫХ КРАСИТЕЛЕЙ ДЛЯ ОКРАСКИ ЯДЕР КЛЕТОК В ФИКСИРОВАННОМ БИОЛОГИЧЕСКОМ МАТЕРИАЛЕ



Цитировать

Полный текст

Открытый доступ Открытый доступ
Доступ закрыт Доступ предоставлен
Доступ закрыт Доступ платный или только для подписчиков

Аннотация

В настоящее время для окраски ядер клеток различных органов широко применяют флуоресцентные ядерные красители. Несмотря на их большое разнообразие, подбор красителя для конкретного исследования представляет собой сложную задачу, при решении которой необходимо учесть целый ряд параметров, таких как степень конденсации хроматина изучаемых клеток, способ фиксации материала и др. В рамках данной работы изучены особенности окраски флуоресцентными красителями ядер клеток различных органов, фиксированных в цинк-этанол-формальдегиде, 10% формалине, жидкости Буэна. В ходе исследования установлено, что наиболее подходящей фиксацией для выбранных ядерных красителей является цинк-этанол-формальдегид. При использовании формалиновой фиксации в ряде случаев визуализацию реакции ухудшало появление фона. Фиксация в жидкости Буэна оказалась наименее пригодной для окраски флуоресцентными красителями ядер клеток в гистологических срезах. Показана возможность использования ядерных флуоресцентных красителей в сочетании с иммунофлуоресцентными методами окраски.

Полный текст

Доступ закрыт

Об авторах

Марина Александровна Сырцова

Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины СЗО РАМН

Email: marina.syrczova@mail.ru
лаборант-исследователь отдела общей и частной морфологии ул. Академика Павлова, д. 12, СПб, Россия

Елена Андреевна Колос

Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины СЗО РАМН

Email: Koloselena1984@yandex.ru
младший научный сотрудник отдела общей и частной морфологии ул. Академика Павлова, д. 12, СПб, Россия

Влада Андреевна Снегова

Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины СЗО РАМН

Email: biolaber@inbox.ru
старший научный сотрудник отдела общей и частной морфологии ул. Академика Павлова, д. 12, СПб, Россия

Валерия Владимировна Гусельникова

Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины СЗО РАМН; Санкт-Петербургский государственный университет

Email: Guselnicova.Valeriia@yandex.ru
младший научный сотрудник отдела общей и частной морфологии ул. Академика Павлова, д. 12, СПб, Россия

Список литературы

  1. Коржевский Д.Э., Кирик О.В., Сухорукова Е.Г., Гиляров А.В., Соловьев К.В., Грудинина Н.А. Изучение пространственной организации астроцитов головного мозга при помощи конфокальной лазерной микроскопии // Морфология. - 2009. - Т. 135, № 3. - С. 76-79.
  2. Лёвшин В.Л. Фотолюминесценция жидких и твердых веществ. - М. - Л.: Гостехиздат, 1951. - 456 с.
  3. Вежеева О.А., Сергеева Т.Н., Сергеев В.Г. Ингибирование нейровоспаления редуцирует дегенерацию дофаминергических нейронов черной субстанции мозга, индуцированную гиперэксперессией в них рекомбинантного гена альфа-синуклеина человека // Медицинский академический журнал. - 2013. - Т. 13, № 3. - С. 71-77.
  4. Коржевский Д.Э., Кирик О.В., Карпенко М.Н. Теоретические основы и практическое применение методов иммуногистохимии (руководство) / под ред. Д.Э. Коржевского. - СПб.: СпецЛит, 2012. - 116 с.
  5. Коржевский Д.Э., Кирик О.В. Специальные методы окраски, используемые для изучения структур клеточного ядра // Морфологическая диагностика. Подготовка материала для гистологического исследования и электронной микроскопии (руководство) / под ред. Д.Э. Коржевского. - СПб.: СпецЛит, 2012. - С. 59-65.
  6. Коржевский Д.Э. Нейрогенез и нейральные стволовые клетки // Медицинский академический журнал. - 2010. - Т. 10, № 4. - С. 175-182.
  7. Коржевский Д.Э., Гиляров А.В. Основы гистологической техники. - СПб.: СпецЛит, 2010. - 96 с.
  8. Коржевский Д.Э., Григорьев И.П., Новикова А. Д., Ковальчук В.А., Кирик О.В. Холинергические структуры поясной коры головного мозга крысы // Медицинский академический журнал. - 2013. - Т. 13, № 4. - С. 49-53.
  9. Suzuki T., Fujikura K., Higashiyama T., Takata K. DNA staining for fluorescence and laser confocal microscopy // J. Histochem. Cytochem. - 1997. - Vol. 45, № 1. - P. 49-53.
  10. Takata K., Hirano H. Use of fluorescein-phalloidin and DAPI as a counterstain for immunofluorescence microscopic studies with semithin frozen sections // Acta Histochem. Cytochem. - 1990. - Vol. 23, № 5. - P. 679-683.
  11. Сибирцев В.С. Флуоресцентные ДНК-зонды: исследование механизмов изменения спектральных свойств и особенностей практического применения // Биохимия. - 2007. - Т. 72, вып. 8. - С. 1090-1106.
  12. Matsuzaki T., Suzuki T., Fujikura K., Takata K. Nuclear staining for laser confocal microscopy // Acta Histochem. Cytochem. - 1997. - Vol. 30. - P. 309-314.
  13. Suzuki T., Matsuzaki T., Takata K. Fluorescence counter-staining of cell nuclear DNA for Multi-Color Laser Confocal Microscopy // Acta histochemica et cytochemica. - 1998. - Vol. 31, № 4. - P. 297-301.
  14. Никитин С.М., Гроховский С.Л., Жузе А.Л., Михайлов М.В., Заседателев А.С., Гурский Г.В., Готтих Б.П. Лиганды, обладающие сродством к определенным или последовательностям оснований ДНК // Биоорганическая химия. - 1981. - Т. 7, № 4. - С. 542-551.
  15. Битехтина М.А., Векшин Н.Л. 7-Аминоактиномицин как флуоресцентный зонд на расплетание и денатурацию ДНК // Биоорганическая химия. - 2008. - Т. 34, № 6. - С. 781-785.
  16. Greenlee J.E., Keeney P.M. Immunofluorescent labelling of K-papovavirus antigens in glycol methacrylate embedded material: a method for studying infected cell populations by fluorescence microscopy and histological staining of adjacent sections // Stain Technol. - 1982. - Vol. 57, № 4. - P. 197-205.
  17. Коржевский Д.Э., Сухорукова Е.Г., Гилерович Е.Г., Петрова Е.С. Преимущества и недостатки цинк-этанол-формальдегида как фиксатора для иммуноцитохимических исследований конфокальной лазерной микроскопии // Морфология. - 2013. - Т. 143, № 2. - С. 81-85.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Сырцова М.А., Колос Е.А., Снегова В.А., Гусельникова В.В., 2014

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License.
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: серия ПИ № ФС 77 - 74760 от 29.12.2018 г.